マウスの早い妊娠の特性の三次元の高周波超音波の新規な使用
Summary
マウスは、妊娠性生物を勉強する広く使用されます。ただし、妊娠の終了は、縦断的な調査を排除する、多数の動物の使用を必要とするこのような研究に必要です。したがって、早期発見のための高周波超音波の非侵襲的手法と妊娠マウスに着床後イベントの監視について述べる。
Abstract
高周波超音波 (HFUS) は、非侵襲的子宮内胎児のリアルタイムの開発を監視するための一般的な方法です。マウスは体内モデルとして胚移植と妊娠の進行の勉強を日常的に使用されます。残念ながら、このようなマウスの研究は、フォロー アップの表現型解析を有効にする妊娠の中断を必要とします。この問題に対処するため立体 (3 D) HFUS 画像マウス胚の注入のサイトと、個々 の発達進行で子宮の早期検出と評価のためのデータを使用しました。我々 は、正確に胚移植サイト数を定量化すると同様に 9.5 d.p.c. を通じて 5.5 日ポスト膣 (d.p.c.) から C57BL6J/129S 妊娠マウスにおける発達の進行を監視ができた HFUS 3次元再構成画像とモデルを組み合わせて、探触子を用いる。含まれている測定: 数、場所、およびサイト間注入間隔と同様、着床のボリューム胚の生存率は、心臓の活動を監視することによって評価されました。すぐ着床後期間 (5.5 〜 8.5 d.p.c.) 再構成メッシュと固体のオーバーレイの両方で妊娠の子宮の形式にはそれぞれの子宮角内にある発展途上の妊娠の視覚的表現が有効になります。遺伝子改変マウスが子宮の機能不全から派生した女性の生殖形質を特徴付けるために使用するのにつれ、このメソッドは、検出、定量化、および初期注入イベント特徴づける体内への新しいアプローチを提供しています。3次元 HFUS イメージングのこの小説の使用は、正常に検出、視覚化、および非侵襲的方法で妊娠初期マウス胚着床を特徴付ける機能を示します。技術は、総組織と病理組織学的評価のために妊娠の中断に依存する現在の方法と比べて大幅に改善を提供しています。ここでメッシュと立体画像で子宮の形の改築に伴う信頼性と再現性のあるデータを生成するのにマウス妊娠初期の超音波を正常に実行するのに方法について説明ビデオ、テキスト形式を使用します。
Introduction
再発妊娠初期の損失は受胎後は最も一般的な合併症の 1 つと1,2を想像しようとするカップルの約 1% に影響を与えます。妊娠初期の損失のメカニズムは変わる: 本質的な胚の異常や子宮内膜の感受性1,3,4の欠陥に母体合併症から。自分の遺伝的少ないのためのマウス モデルは、初期胚移植の妊娠の調査のため広く利用されています。さらに、マウスと大規模な研究を実行する能力の短い妊娠時は、人間の生殖医学5の主要な臨床質問に対処でマウスの成長しているユーティリティを確保しています。つまり、マウスの実験的デザインの大半はまだ定量化妊娠6、中に注入サイトの場所、数、サイズ、および間隔のパターンを分析して順次妊娠日の安楽死させたことに多数のダムを必要とします。 7、8、それによって同じ動物に関する縦断的研究は除外。
クリニックで超音波は人間の胎児の生存、非侵襲的方法9,10,11の開発を監視する信頼性の高い、非常に貴重なツールです。最近では、高周波超音波 (HFUS) は、マウスの胎児の生存および妊娠12,13,14中の成長を監視する方法として限られたアプリケーションを検索し始めています。超音波画像における最近の技術の進歩は、動物の臓器の視覚的な復元と病態15,16、それ以降の監視の立体 (3 D) データのアプリケーションを許可しています。 17。この高度なイメージング技術の使用より小さいボリュームの変動、動物間の可変性を減らすために、病理学の進行または17の治療的介入の有効性を監視するための検出力は飛躍的に。この技術の主要なユーティリティは、営利的モデル15,16における悪性腫瘍の進行を監視してきましたが、3-d HFUS ばかり量的に表わすし、胚移植の積極的な成長を監視する使用されていますマウス子宮18で胎児の発育。
ここでは、初期の妊娠マウス子宮の再構成を生成する 2 D と 3 D データを生成するイメージング HFUS を実行する方法を示します。非侵襲的な方法でデータを収集するために研究者を許可する妊娠の終了を必要とせずこれらの初期胚の注入のイベントを検出するこの手法の有用性を示す.
Protocol
Representative Results
Discussion
3次元 HFUS イメージングのこの小説の使用は、正常に検出、視覚化、および非侵襲的方法で妊娠初期マウス胚着床を特徴付ける機能を示します。技術は、総組織と病理組織学的評価のために妊娠の中断に依存する現在の方法と比べて大幅に改善を提供しています。しかし、組織学的方法まだと思われるより最適なより拡大しより細胞レベルで評価が必要なときや、遺伝子・ タンパク質解析が?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
我々 は非常に栄趙、杰李 Ying ヤンの協力をありがとうございます。
Materials
| VisualSonics Vevo 2100 Ultrasound Imaging Platform/Machine | VisualSonics, inc. | VS-11945 | |
| Vevo Imaging Station | VisualSonics, inc. | SA-11982 | |
| Aquasonic 100 Ultrasound Transmission Gel | Parker | #SKU PLI 01-08 | |
| Isoflurane (IsoThesia) 100mL bottle | Henry Shein | #29404 | |
| PuraLubenAnimal Ophthalmic Ointment | Dechra | #12920060 |
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