마우스에서 초기 임신 특성에 대 한 3 차원 높은-주파수 초음파의 새로운 사용
Summary
마우스 널리 임신 생물학을 공부 하는 데 사용 됩니다. 그러나, 임신 종료는 이러한 연구는 경도 조사 하는 걸로 하 고 동물의 큰 숫자의 사용을 필요로 필요 합니다. 따라서 조기 발견에 대 한 높은 주파수 초음파의 비-침략 적 기법 및 임신 마우스에서 후 이식 이벤트 모니터링 설명 합니다.
Abstract
높은 주파수 초음파 (HFUS) 비 접촉 utero에인간 태아의 실시간 개발을 모니터링 하는 일반적인 방법입니다. 마우스 배아 착상과 임신 진행을 vivo에서 모델 정기적으로 사용 됩니다. 불행히도, 이러한 murine 연구 후속 phenotypic 분석을 임신 중단을 요구. 이 문제를 해결 하려면 우리는 HFUS 조기 발견 및 murine 배아 이식 사이트 및 그들의 개인적인 발달 진행 utero의 특성화에 대 한 데이터를 이미징의 3 차원 (3 차원) 재구성을 사용 합니다. 3 차원 개조와 HFUS 이미징 및 모델링을 결합 수 있었습니다 정확 하 게 계량 배아 이식 사이트 번호로 9.5 d.p.c. 통해 5.5 일 포스트 성교 (d.p.c.)에서 임신 C57BL6J/129S 마우스에 발달 진행 모니터링 와 변환기의 사용. 포함 하는 측정: 번호, 위치, 및 간 이식 사이트 간격; 이식 사이트의 볼륨 태아 생존 능력은 심장 활동을 모니터링 하 여 평가 했다. 즉시 포스트 주입 기간 (5.5 8.5 d.p.c.), 메쉬 및 고체 오버레이 벗 자 궁의 3 차원 재구성 형식 각 자 궁 경적 내 개발 임신의 시각적 표현을 사용할 수 있습니다. 유전자 조작된 생쥐 여성 생식 고기 자 궁 기능 장애에서 파생 하는 데 사용할 계속,이 방법은 검색 하 고, 계량, 초기 이식 이벤트에서 vivo에서성격에 새로운 접근 방식을 제공 합니다. 3 차원 HFUS 이미징의 소설의 사용이 성공적으로 감지, 시각화, 및 비-침략 적 방법으로 배아 이식 사이트 murine 임신 초기 동안 특성의 수를 보여 줍니다. 기술 총 조직 및 조직 특성에 대 한 임신의 중단에 의존 하는 현재의 방법에 비해 상당한 개선을 제공 합니다. 여기 비디오와 텍스트 형식을 사용 하 여 성공적으로 메쉬 및 고체 3 차원 이미지에서 재건의 자 궁 형태와 안정적이 고 재현 가능한 데이터를 생성 하는 murine 임신 초기의 초음파를 수행 하는 방법을 설명 하.
Introduction
재발 이른 임신 손실 하나 가장 일반적인 합병증의 임신 후 이며1,2임신을 하려고 하는 커플의 약 1%에 영향을 미칩니다. 이른 임신 손실의 기본 메커니즘 변화 된다: 내장 배아 이상 및 모성 comorbidities 자궁내 막 감수1,,34에 결함에서. 그들의 유전 추적성 때문에 마우스 모델 초기 배아 이식 및 임신의 수사를 위해 널리 이용 되어 있다. 또한, 마우스와 대규모 연구를 수행 하는 능력의 짧은 임신 시간 인간의 생식 의학5핵심 임상 질문 해결에 마우스의 성장 유틸리티를 보장입니다. 즉, murine 실험적인 디자인의 대다수 여전히 요구 순차적 임신 일 임신6, 동안 주입 사이트 위치, 번호, 크기 및 간격 패턴을 분석 하 고 계량 하에 안락사를 수많은 댐 7,8, 따라서 제외 같은 동물에 대 한 경도 연구.
병원에서 초음파는 인간의 태아 생존 능력 및 비-침략 적 방식으로9,,1011개발 모니터링 하 고 귀중 한 도구 이다. 더 최근에, 높은-주파수 초음파 (HFUS) 태아 생존 능력 및 임신12,,1314동안 모니터링을 위한 방법으로 마우스에 제한 된 응용 프로그램을 찾을 시작 했다. 초음파 영상에서 최근의 기술 진보는 동물 장기의 시각적 재구성 및 pathologies15,16의 후속 모니터링에 대 한 3 차원 (3 차원) 데이터의 응용 프로그램을 허용 했 17. 이 고급 이미징 기술의 사용은 현저 하 게 작은 볼륨 변동을 줄이고 간 동물 다양성, 모니터는 병의 진행 이나 치료 적 개입17의 효능을 검색 하는 힘을 향상 시켰다. 이 기술의 기본 유틸리티 oncomouse 모델15,16암 진행 모니터링 하고있다, 반면 3 차원 HFUS 이미징 최근에 quantitate 배아 이식의 활성 증가 모니터링 하 사용 되었습니다. 그리고18의 마우스 자 궁 태아의 개발.
여기, HFUS 2 차원 및 3 차원 데이터를 생성 이미징 생성 초기 임신 마우스 자 궁의 개조를 수행 하는 방법을 보여 줍니다. 비-침략 적 방식으로 데이터를 수집 하는 연구를 수 있도록이 소설 방법 임신 종료 하지 않고도 이러한 초기 배아 이식 이벤트 감지의 유틸리티를 설명 합니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
3 차원 HFUS 이미징의 소설의 사용이 성공적으로 감지, 시각화, 및 비-침략 적 방법으로 배아 이식 사이트 murine 임신 초기 동안 특성의 수를 보여 줍니다. 기술 총 조직 및 조직 특성에 대 한 임신의 중단에 의존 하는 현재의 방법에 비해 상당한 개선을 제공 합니다. 그러나 그 조직학 방법 아직도 간주 됩니다 더 최적의 특성 더 확대 하 고 더 많은 세포 수준에서 원하는 때 또는 때 유전자와 단백질 ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
우리는 아주 많이 룽 자오, Jie Li 및 연 잉의 도움 주셔서 감사합니다.
Materials
| VisualSonics Vevo 2100 Ultrasound Imaging Platform/Machine | VisualSonics, inc. | VS-11945 | |
| Vevo Imaging Station | VisualSonics, inc. | SA-11982 | |
| Aquasonic 100 Ultrasound Transmission Gel | Parker | #SKU PLI 01-08 | |
| Isoflurane (IsoThesia) 100mL bottle | Henry Shein | #29404 | |
| PuraLubenAnimal Ophthalmic Ointment | Dechra | #12920060 |
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