בידוד והעשרה של קבוצות משנה כבדים ובתאים המזוהים על ידי שילוב מרקר Surface Novel

התחדשות כבדה מזוהית בעיקר עם קיבולת החידוש העצמי של hepatocytes. עם זאת, פציעות כבדות כרוניות להתרחש עם הפעלת תא אב והתרחבות, אשר נקשרו עם יכולת להתמיין hepatocytes ו cholangiocytes ^{1, 2, 3, 4.} זה רלוונטי במיוחד כי, במהלך פציעות כרוניות, התפשטות hepatocyte אינה יעילה. למרות מחקרי מעקב גנטי מיקוד מרובים ובתאים, תפקידם ההתחדשות כבדה נשאר שנוי במחלוקת ^{5, 6, 7, 8.} יתר על כן, ההפעלה ובתאים נקשרה בתגובת fibrotic גדלה בכבד, מה שמעלה שאלות לגבי תפקידם המדויק במהלך פציעות ⁹, ^10.

האופי ההטרוגני של תא תא האב הוצע ארוך על ידי מחקרי התבטאות גנים מבודדים ובתאים להביע סמן משטח יחיד באמצעות microdissection או מיון תא מבוסס שיטות ^{1, 11.} ואכן, לאחרונה, שילוב סמן משטח רומן באמצעות gp38 (podoplanin) מקושר באופן חד משמע סמנים יחידים קודמים של ובתאים כדי תת שונה ^12. חשוב לציין, תת אלה לא היו שונים רק הביטוי סמן פני השטח שלהם, אלא גם הציג שינויים תפקודיים במהלך פציעות ^12.

במודלים של בעלי חיים מרובים כבר נוצל כדי לחקור הפעלת תא אב והתחדשות כבדה. נראה כי סוגי הפציעה השונים לקדם את ההפעלה שונה תת קבוצות של ובתאים ^12. זה עשוי להסביר את phהבדלי enotypic תגובת ductular שנצפתה אצל בני אדם ^4. לפיכך, פנוטיפי מורכבים והניתוחים תפקודיים של ובתאים הם מרכזיים להבין את תפקידם פציעות ואת המשמעות האמיתית של תגובת ductular במחלות כבדות.

מלבד שילובים סמן משטח, ההבדלים המכריעים פרוטוקולי בידוד תא לסבך עוד יותר את המסקנות בהתבסס על מחקרים קודמים ^2. חלק גדול ממאגרי נפט המחקרים התייחסו התפקיד של ובתאים כי שונים מאוד בפרוטוקול בידודם (למשל, דיסוציאציה הכבד (שילוב אנזים ומשך התהליך), בינוני צפיפות, ומהירות צנטריפוגה) ^2. טכניקת בידוד אופטימיזציה, מתן כדאיות טובה יותר עבור אוכלוסיות תאים נדירות ומהורהרת של רכב משנה, פותחה ופורסמה ¹² לאחרונה. מטרת מאמר זה היא לספק יותר detפרוטוקול שמציק של הליך בידוד תא הכבד הזה ואת ניתוח המשנה כדי לאפשר הרבייה הנכונה של הטכניקה. בנוסף, הפרוטוקול כולל השוואה עם שיטת הבידוד הקודמת המצביעים על ההבדלים לעומת הפרוטוקול החדש.