Summary

羊の非定型および古典スククレープを検出する臨床検査プロトコル

Published: January 19, 2014
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Summary

短い臨床検査プロトコルは羊およびヤギの古典的および非定型的なスククレーピーの検出を助けるために提示される。

Abstract

羊とヤギの伝染性スポンジ状脳症(TSE)であるスクレーピーの診断は、現在、 死後 の検査による疾患関連プリオンタンパク質の検出に基づいています。羊やヤギの集団のランダムなサンプルがスクレーピーについて積極的に監視されていない限り、スククレー症例の同定は、病気に関する個人の精通と擦り傷に関連する臨床徴候を認識する能力に依存する臨床容疑者の報告に依存する。スクレーピーは、小さな反する人の神経疾患の鑑別診断では考慮されない場合があります, 特にスクレーピーの有病率が低い国で, またはそれは非定型のスクレーピーのような非不作尿形態として提示する場合は認識されません.臨床容疑者の同定を支援するために、短い検査プロトコルが提示され、ヤギにも適用できる羊の掻痒および非不全形態のTSEに関連する特定の臨床徴候の表示を評価する。これには、行動の評価、視力(脅威反応のテストによる)、掻痒(スクラッチへの応答をテストすることによる)、および動き(目隠しの有無にかかわらず)が含まれます。これは、スクレーピー容疑者として動物を報告するより詳細な神経学的検査につながる可能性があります。また、病気の進行を評価したり、臨床の終点を特定するために、羊やヤギの実験的なTSE研究で使用することができます。

Introduction

スクレーピーは、牛の牛海綿状脳症(BSE)、鹿の慢性消耗性疾患、ヒトのクロイツフェルト・ヤコブ病などのタンパク質誤折障害のグループに属する羊とヤギの伝染性スポンジ状脳症(TSE)です。診断は、通常脳内でプロテイナーゼ耐性であるプリオンタンパク質の異常な形態を検出することによって死後に行われる。2つの主要な天然のスクレーピー形態は、疫学的、病理学的、および生化学的に異なる区別することができる:古典的なスククレーピーおよび非定型スククレーピー。また、古典的な擦り傷のような臨床徴候を有する神経疾患は、BSE剤6,10-11との実験的感染によって羊およびヤギに誘発され得る。実際、天然に発生するBSEはヤギ3,17で診断されている。プリオンタンパク質遺伝子を標的とした遺伝的抵抗性の繁殖によって古典的なスクラッパー(および天然に生じた場合は羊のBSE)の制御が達成されたが、これは散発性疾患であると考えられており、古典的なスクラッパーから解放されていると考えられている国で診断されている非定型スクラッパーにとってより困難である7。

スクイリーは、成人の羊やヤギの神経疾患であり、行動、感覚、運動の変化をもたらすが、この疾患は徐々に進行性であり、動物飼育員や獣医が臨床徴候に精通していないか、または小さな反すう動物の神経疾患の鑑別診断ではスクレーピーが全く考慮されていないため、臨床徴候はしばしば認識されない。

提案された検査プロトコルは、2つの目的を念頭に置いてスクレーピーの臨床診断を支援するように設計されました:それは短期間で多くの動物のスキャンを可能にするためにかなり簡単であるべきですが、スクレーピーの影響を受けた動物の検出を可能にするのに十分な具体的なものである必要があります。このプロトコルは、古典的なスクラッパー11 の徴候についてヤギを監視するために使用されるものからのわずかな変更であり、通常はスククレーピー9に関連しない臨床徴候を悪化させる可能性のある動物の目隠しを含む。

Protocol

1. 姿勢評価 邪魔されない間に動物の姿勢を評価する。 TSEの影響を受ける動物は、広いベースの手足で立ったり、ハンチングしているように見えたり、頭のキャリッジが低い状態で立ったりすることがあります。 2. 行動評価 動物の行動を研究する,放置したとき,近づくと,取り扱われた時。 TSEの影響を受けた動物は、他の羊とは別に立っているか、他の羊の直後に立つことによって、変化したメンテーションを示す可能性があります。 動物が近づくと、逃げ出して倒れたり、取り扱い時に床に倒れたりする。非定型のスクレーピーを持つ羊では、時計回りまたは反時計回りに強制的に回っているのが見られます。 3. 脅威反応試験 脅威反応のテストのために動物の頭を保持する:点滅応答を誘発するために動物の各目に向かって手または数本の指を数回動かすが、顔の毛に触れたり、動物が点滅する原因となる空気の乱気流を作り出さないように注意してください。 脅威反応は、スクレーピーの影響を受けた動物、特に非定型の擦り傷を持つ羊では存在しない可能性がある。脅威応答の検査はプロトコルの一部として使用される唯一の脳神経検査であるが、この処置の間に顔の目視検査は、例えば顔面麻痺 など 、擦り傷に通常見られない神経学的欠損の他の徴候を明らかにすることができる。動物が脅威に反応して点滅しない場合は、動物が点滅できないことが顔面麻痺によって引き起こされていないことを確認するために、まぶたに触れることによって触手反射をテストすることをお勧めします。 4. スクラッチ応答のテスト この手順では、苦しんでいる動物ではテストを解釈できないため、動物が落ち着いているかどうかを確認してください。 胸部、腰椎、仙骨領域の背中のスクラッチ領域は、各スクラッチエピソードの間に一時停止します。 動物がリズミカルな頭や体の動きに反応する場合、または特定の領域の傷を付けて唇を動かしたり舐めたりする場合は、スクラッチテストを繰り返してスクラッチ応答の再現性を確認します。 反復可能な応答は、通常、古典的なスクレーピーを持つ羊または掻痒の形態のヤギを含む掻痒性の動物で引き出されるが、他の掻痒性皮膚状態または外在植物が存在しない限り、一般的に非定型スクレーピーを持つ羊では反応がない。 5. ウールの損失と皮膚病変のチェック 皮膚を点検します。 擦傷による掻痒は通常、下層の皮膚が正常に見える過度の擦り傷や引っ掻き傷のために、世論調査、背中、ランプ、胸部または腹部の側面にある可能性のある脱毛を引き起こす。 動物が鋭利な物体をこする機会がある場合、擦り傷は後で現れる可能性があります。咬傷は、特に手足の過度のニブリングのために、手足に現れる可能性があります。 6. スコアリングボディコンディション 腰椎の背中と横のプロセスを触診することによって、動物の体の状態を評価します。 擦り傷は、腰椎の横方向のプロセスが個別に容易に感じることができ、プロセスの終わりが鋭く見える体の状態の進行性喪失を引き起こす可能性があります。 7. 動物の目隠し 動物の目をフードで覆い、動物の呼吸を可能にするために1つのコーナーが切り取られた非見の袋を使用して作ることができます。 安全上の懸念がなく、パニック動物による怪我の危険性がない場合にのみ、動物を解放します。それ以外の場合は、羊を保持し、動物の制御中に動物の動きを研究します。 目隠しは、前庭系または小脳機能障害の徴候を悪化させる可能性があり、これは動物がその視力を補う能力によって隠される可能性がある。バランスの喪失、不整合、または旋回は、特に非定型スクレーピーを有する臨床的に顕著でない羊において引き起こされ得る。 8. 動物の動きの評価 動物が自由に動くときの歩行と筋肉の動きを研究する。 不整合は、後肢の広いベースの動き、両方の後肢でホッピング、または後ろの四肢で過度に揺れ、つまずいたり一時的に座ったりする可能性があります。 頭部振戦の存在は、動物が邪魔されないが、臨床検査の完了中または後により顕著になる可能性がある場合、しばしば微妙である。 9. 解釈 スクレーピーに関する調査結果の重要性を考えてみましょう。 個々の徴候の存在は、傷、振戦、異常行動、回り回り、崩壊するエピソード、運動失調、または不在の脅威反応に対する反復可能な応答など、様々な原因を有する可能性があるが、これらの徴候の2つ以上の組み合わせの発生は、羊またはヤギの擦傷を非常に示唆している。

Representative Results

臨床的に健康な羊。ニュージーランド起源の牛の脳を脳内に接種し、接種後49ヶ月で調べたスクレーピーフリーの群れからのポーリングドーセットウェザー。この羊は正常な姿勢を持ち、正常に動作し、正常な脅威反応(図1)を表示し、スクラッチテストに反応せず、無傷のフリースを有し、非常に良好な体の状態を有する。目隠しをすると臨床的に顕著で、運動障害の徴候を示さない。 羊の中のTSEの非不作尿形態を呈する非定型のスクレイピー羊。同じプリオンタンパク質遺伝子型(AHQ/AHQ)の非定型スククレーピーフィールドケースから脳ホモゲネートで脳ホモゲネートを接種し、接種後36ヶ月で調べたスクレーピーフリーの群れからシェビオット・ウェザー。この羊はまた、通常の姿勢を持っていますが、ペンの他の羊とは異なる振る舞い、時計回りに円を描きます。脅威反応がテストされたときに点滅しません。傷は何の反応も引き出さないし、フリースの変化は明らかではないが、体の状態は公正に過ぎない。目隠しをすると時計回りに回り、バランスが崩れる。歩行は無数で、細かい頭部の揺れが見える。 古典的な擦り傷に影響を受けた羊の臨床プレゼンテーションに臨床的に似ている羊のTSEの慎重な形態を提示する非定型BSE羊。このため、古典的なスクレーピーケースは含まれていません。ペールドーセットは、ウシ非定型(L型)BSE脳ホモゲネートで脳内に接種された脳内で排他性の群れからドーセットウェザーをポーリングし、接種後50ヶ月で調べた。この羊は少し腰を下ろし、後肢を広く保ち、捕まえると床に落ちる傾向があります。脅威反応は弱い。背中の様々な領域の傷は頭や唇の動きを引き出し(図3)、世論調査では軽度の皮膚外傷を伴う羊毛の損失がある。体の状態が良いです。目隠しをすると、動きに消極的で、バランスを保つために後端をハードルの上に置きます。羊は無菌であり、前肢のハイパーメトリアを表示します。 図 1.脅威応答テスト。 動物の目に向かって威圧的なジェスチャーは、瞬き応答を誘発する。 ここをクリックすると、より大きな画像が表示されます。 図 2.目隠し。 フードで羊を目隠しすることによって引き出される時計回りの周りを回る。 ここをクリックすると、より大きな画像が表示されます。 図 3.スクラッチ応答のテスト。 背中の引っ掻きは、頭の横方向の動きで唇を舐める引き出す ここをクリックすると、より大きな画像を表示します。

Discussion

スクレイは、世界保健機関(OIE)によってリストされた病気であり、迅速かつ信頼性の高い アンティ死後 検査がない場合、この疾患に関連する臨床徴候を認識する農家または獣医師の能力に依存しています。しかし、ほとんどのスクラッパー症例、特に非定型スククレーピー症例は、現在、標的となるTSE監視、 すなわち 殺処分または落下したストック動物の対象となる小さな反すう人の脳検査によって発見されている。古典的なスクラッパーの数を減らした古典的なスクレーピーに対する耐性のために羊を繁殖させることは、羊の神経疾患の鑑別診断であまり考慮されにくくなるように、病気に対する人々の意識を低下させた可能性が最も高い。非定型スクラッパーはまた、アバトワールで約5例、ヨーロッパ4でテストされた10,000人当たりの下落株で8例と低い有病率を有する。また、掻痒は、通常、排泄の有無にかかわらず脱毛症として明らかであり、しばしば擦物13の特徴的な徴候と考えられる。したがって、非定型スククレーピー12 または非不作尿形態のカプリンスクレーピー11 で観察される付随性掻痒のない神経疾患は、スクレーピーの疑いを引き起こさない可能性がある。

この検査プロトコルは、様々なタイプのスククレー(非定型で古典的なスクラッパー、後者は非定型BSE接種羊に代表される非定型のスクラッパー)に関連する特定の臨床徴候を評価することによって、羊のTSEの臨床徴候を同定するように設計された。古典的なスクラッパーでは、肯定的な傷反応(「ニブル反射」)を示した症例の割合は、100頭以上の羊の50-77の範囲であった5,8を研究した。運動障害は、様々な研究に基づいて古典的なスククレーピー症例の最大81%で観察することができる18.また、非整型スクリューの様々な自然発生症例の主要な兆候であり、しばしば行動変化を伴う1が、自然および実験的に感染した非定型スククレーピー羊の両方で報告された追加の徴候は、目隠しおよびメナス応答の検査が試験プロトコルに含まれる理由である12,15,16を回っていた。体の状態をスコア付けすると、例えば6点スコアリングシステム14を用いて、斑点に影響を受けた羊5で観察され得る気化の評価が可能になる。羊のスクレーピーの検出を支援するための臨床基準は以前2に提案されているが、これらは古典的なスクラッパーの検出にのみ関連し、動物がアバトワールで提示された場合には利用できない可能性のある臨床歴を考慮に入れた。

現在のプロトコルは、短期間でスクレーピーの兆候のために多くの動物のスクリーニングを可能にする。さらに、検査プロトコルは、臨床発症、進行、および終点を監視するために、羊およびヤギのスクイチーの実験的研究に適用することができる。しかし、より詳細な身体的および神経学的検査を臨床症例歴の適切な記録に置き換えるものではなく、おそらく補助的な診断検査(血液および脳脊髄液の検査;適切であればより洗練されたイメージング技術)が続き、その後、同様の徴候を有する小さな反すrumants剤の様々な他の状態を排除する必要があるかもしれない代謝や炎症性の神経疾患、脳膿瘍、腫瘍など。

臨床検査は、プリオンタンパク質2,11の検出に基づく死後の検査よりも一般的にTSEの影響を受けた動物の検出にあまり敏感ではありませんが、特にインキュベーション期間の初期段階では、これは現在、生きている動物の唯一の検出方法であり、TSEの影響を受けた小さな反する動物を識別するための標的監視システムを持たない国に最も関連しています。

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

動物を提供する研究は、英国食糧環境農村省と欧州連合(EU TSE参照研究所の資金提供を通じて)によって資金提供されました。私たちは、プロジェクトマネージャー、シモンズ博士、ジェフリー博士.M.Mサポートを受け入れます。

References

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Cite This Article
Konold, T., Phelan, L. Clinical Examination Protocol to Detect Atypical and Classical Scrapie in Sheep. J. Vis. Exp. (83), e51101, doi:10.3791/51101 (2014).

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