Summary

Enregistrement et analyse des rythmes circadiens dans la course roue-activité chez les rongeurs

Published: January 24, 2013
doi:

Summary

Les rythmes circadiens en cours d'exécution volontaire roues activité chez les mammifères sont étroitement associés aux oscillations moléculaires d'une horloge maître dans le cerveau. En tant que tel, ces rythmes quotidiens du comportement peut être utilisée pour étudier l'influence de facteurs génétiques, pharmacologiques et environnementaux sur le fonctionnement de cette horloge circadienne.

Abstract

Lorsque les rongeurs ont accès gratuitement à une roue qui tourne dans leur cage, l'utilisation volontaire de cette roue dépend du moment de la journée 1-5. Rongeurs nocturnes, dont les rats, les hamsters et les souris, sont actifs pendant la nuit et relativement inactif pendant la journée. De nombreuses autres mesures comportementales et physiologiques présentent également des rythmes quotidiens, mais chez les rongeurs, la course roues activité constitue une mesure particulièrement fiable et commode de la sortie de l'horloge circadienne principale, le noyau suprachiasmatique (NSC) de l'hypothalamus. En général, par le biais d'un processus appelé entraînement, le modèle journalier de courir roues activité sera naturellement s'aligner sur l'environnement cycle lumière-obscurité (cycle LD, par exemple 12 heures de lumière: 12 h-foncé). Rythmes circadiens sont cependant générés de manière endogène les modèles de comportement qui présentent une période de 24 heures ~, et persister dans l'obscurité constante. Ainsi, en l'absence d'un cycle LD, l'enregistrement et l'analyse de l'activité dans une roue peutêtre utilisée pour déterminer le temps subjectif-de-jour. Parce que ces rythmes sont dirigés par l'horloge circadienne la subjectivité du temps de la journée est appelée rythme circadien (CT). En revanche, quand un cycle LD est présent, le temps de la journée qui est déterminée par le cycle de l'environnement LD est appelé le temps zeitgeber (ZT).

Bien que les rythmes circadiens dans une roue d'activité sont généralement liés à l'horloge 6-8 SCN, oscillateurs circadiens dans de nombreuses autres régions du cerveau et du corps 14.9 pourrait également être impliquée dans la régulation des rythmes d'activité quotidienne. Par exemple, les rythmes quotidiens en nourriture anticipation activité ne nécessite pas le SCN 15,16 et à la place, sont en corrélation avec des changements dans l'activité des extra-SCN oscillateurs 17-20. Ainsi, les enregistrements d'activité en cours d'exécution roues peuvent fournir d'importants renseignements sur le comportement non seulement à propos de la sortie de l'horloge du SCN maître, mais aussi sur l'activité des extra-SCN oscillateurs. Ci-dessous nous descrBIE Le matériel et les méthodes utilisés pour enregistrer, analyser et afficher des rythmes circadiens d'activité locomotrice des rongeurs de laboratoire.

Protocol

1. Logement des animaux Cage: Afin d'enregistrer l'activité d'une roue d'un rongeur individuel, chaque cage doit accueillir un rongeur unique et une roue d'. Parce que les roues de course peut être considéré comme une forme d'enrichissement, tous les rongeurs dans toute étude devrait avoir un accès similaire à une roue qui tourne. Changements Literie: manipulation des animaux ainsi que des changements dans des cages ou de la literie pe…

Representative Results

Programmes informatiques: programmes informatiques spécialisés sont généralement utilisés dans la production de actograms et le calcul de la période circadienne. Ces programmes comprennent, mais ne sont pas limités à, Actiview (Minimitter, Bend, OR) et Circadia. Actograms: Actograms fournir une illustration graphique des tendances quotidiennes de fonctionnement roues activité. Il ya un seul tracé (axe x = 24 h) et double-tracé (axe x = 48 h) actograms. Les deux jours parcelle méth…

Discussion

Surveillance des rythmes d'activité par jour à l'aide des roues de roulement est la méthode la plus couramment utilisée et fiable pour évaluer la sortie de l'horloge circadienne chez les rongeurs nocturnes. Roue marche à l'activité, cependant, n'est qu'un des nombreux aspects du comportement et de la physiologie qui peuvent être surveillés en permanence. Bien que la grande majorité des une roue d'activité a lieu pendant la nuit, plus de 30% de l'éveil totale survient au cours …

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Les auteurs tiennent à remercier les bourses salariales, subventions d'équipement et les fonds de fonctionnement des Fonds de la recherche en santé du Québec (FRSQ), les Instituts de recherche en santé du Canada (IRSC), en sciences naturelles et en génie du Canada (CRSNG), et l'Université Concordia Programme des chaires de recherche (CRUC), ainsi que la rétroaction réfléchie sur ce manuscrit du Dr Jane Stewart.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments (optional)
Vitalview Card & Software Mini Mitter #855-0030-00 (Bend, OR, USA)
DP24 Dataport Mini Mitter #840-0024-00 (Bend, OR, USA)
QA4-Module Mini Mitter #130-0050-00 (Bend, OR, USA)
Magnetic Switch Mini Mitter #130-0015-00 (Bend, OR, USA)
C-50 Cable assembly Mini Mitter #060-0045-10 (Bend, OR, USA)
Rat running wheel assembly Mini Mitter #640-0700-00 (Bend, OR, USA)
Cage and tray support Mini Mitter #640-0400-00 (Bend, OR, USA)
Useable cut away cage Mini Mitter #664-2154-00 (Bend, OR, USA)
Grid floor for cage Mini Mitter #676-2154-00 (Bend, OR, USA)
Waste tray Mini Mitter #684-2154-00 (Bend, OR, USA)
Lamp housing Microlites Scientific #R-101 (Toronto, ON, Canada)
4W Fluorescent lamps Microlites Scientific #F4T5/CW (Toronto, ON, Canada)
Isolation chambers Custom built 28″H x 20″W x 28″D ½” Black Melamine.

References

  1. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. V. Pacemaker Structure: A Clock for All Seasons. J. Comp. Physiol. 106, 333-355 (1976).
  2. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. IV. Entrainment: Pacemaker as Clock. J. Comp. Physiol. 106, 291-331 (1976).
  3. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. III. Heavy Water and Constant Light: Homeostasis of Frequency?. J. Comp. Physiol. 106, 267-290 (1976).
  4. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. II. The Variability of Phase Response Curves. J. Comp. Physiol. 106, 253-266 (1976).
  5. Pittendrigh, C. S., Daan, S. A Functional Analysis of Circadian Pacemakers in Nocturnal Rodents. I. The Stability and Lability of Spontaneous Frequency. J. Comp. Physiol. 106, 223-252 (1976).
  6. Ralph, M. R., Foster, R. G., Davis, F. C., Menaker, M. Transplanted suprachiasmatic nucleus determines circadian period. Science. 247, 975-978 (1990).
  7. Moore, R. Y., Eichler, V. B. Loss of a circadian adrenal corticosterone rhythm following suprachiasmatic lesions in the rat. Brain Res. 42, 201-206 (1972).
  8. Stephan, F. K., Zucker, I. Circadian rhythms in drinking behavior and locomotor activity of rats are eliminated by hypothalamic lesions. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 69, 1583-1586 (1972).
  9. Abe, M., et al. Circadian rhythms in isolated brain regions. J. Neurosci. 22, 350-356 (2002).
  10. Yamazaki, S., et al. Resetting central and peripheral circadian oscillators in transgenic rats. Science. 288, 682-685 (2000).
  11. Lamont, E. W., Robinson, B., Stewart, J., Amir, S. The central and basolateral nuclei of the amygdala exhibit opposite diurnal rhythms of expression of the clock protein Period2. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 4180-4184 (2005).
  12. Amir, S., Lamont, E. W., Robinson, B., Stewart, J. A circadian rhythm in the expression of PERIOD2 protein reveals a novel SCN-controlled oscillator in the oval nucleus of the bed nucleus of the stria terminalis. J. Neurosci. 24, 781-790 (2004).
  13. Yoo, S. H., et al. PERIOD2::LUCIFERASE real-time reporting of circadian dynamics reveals persistent circadian oscillations in mouse peripheral tissues. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101, 5339-5346 (2004).
  14. Guilding, C., Piggins, H. D. Challenging the omnipotence of the suprachiasmatic timekeeper: are circadian oscillators present throughout the mammalian brain?. Eur. J. Neurosci. 25, 3195-3216 (2007).
  15. Boulos, Z., Terman, M. Food availability and daily biological rhythms. Neurosci. Biobehav. Rev. 4, 119-131 (1980).
  16. Boulos, Z., Rosenwasser, A. M., Terman, M. Feeding schedules and the circadian organization of behavior in the rat. Behav. Brain Res. 1, 39-65 (1980).
  17. Verwey, M., Amir, S. Food-entrainable circadian oscillators in the brain. Eur. J. Neurosci. 30, 1650-1657 (2009).
  18. Davidson, A. J., Poole, A. S., Yamazaki, S., Menaker, M. Is the food-entrainable circadian oscillator in the digestive system?. Genes Brain Behav. 2, 32-39 (2003).
  19. Hara, R., et al. Restricted feeding entrains liver clock without participation of the suprachiasmatic nucleus. Genes Cells. 6, 269-278 (2001).
  20. Damiola, F., et al. Restricted feeding uncouples circadian oscillators in peripheral tissues from the central pacemaker in the suprachiasmatic nucleus. Genes Dev. 14, 2950-2961 (2000).
  21. Mrosovsky, N. Phase response curves for social entrainment. J. Comp. Physiol. A. 162, 35-46 (1988).
  22. Cain, S. W., et al. Reward and aversive stimuli produce similar nonphotic phase shifts. Behav. Neurosci. 118, 131-137 (2004).
  23. Antle, M. C., Mistlberger, R. E. Circadian clock resetting by sleep deprivation without exercise in the Syrian hamster. J. Neurosci. 20, 9326-9332 (2000).
  24. Banjanin, S., Mrosovsky, N. Preferences of mice, Mus musculus, for different types of running wheel. Lab Anim. 34, 313-318 (2000).
  25. Verwey, M., Lam, G. Y., Amir, S. Circadian rhythms of PERIOD1 expression in the dorsomedial hypothalamic nucleus in the absence of entrained food-anticipatory activity rhythms in rats. Eur. J. Neurosci. 29, 2217-2222 (2009).
  26. Gooley, J. J., Schomer, A., Saper, C. B. The dorsomedial hypothalamic nucleus is critical for the expression of food-entrainable circadian rhythms. Nat. Neurosci. 9, 398-407 (2006).

Play Video

Cite This Article
Verwey, M., Robinson, B., Amir, S. Recording and Analysis of Circadian Rhythms in Running-wheel Activity in Rodents. J. Vis. Exp. (71), e50186, doi:10.3791/50186 (2013).

View Video