وصفنا استراتيجية لرصد نضوج والهجرة من الخلايا الجذعية رئوي ردا على ovalbumin في تحديد ovalbumin يسببها التهاب الشعب الهوائية التحسسي. ويمكن تعديل هذه الاستراتيجية لتقييم الهجرة من الخلايا الجذعية الرئوي في ضبط العدوى.
Abstract
الخلايا الجذعية (DCS) هم اللاعبون الرئيسيين المشاركين في الشروع في رد الفعل المناعي على التكيف من خلال تفعيل الخلايا التائية مستضد معين. البلدان النامية موجودة في الأنسجة الطرفية في حالة مستقرة، ولكن استجابة لتحفيز المستضد، DCS تناول مستضد وبسرعة تهاجر إلى الغدد الليمفاوية استنزاف حيث تبدأ T استجابة الخلية ضد 1،2 مستضد. بالإضافة إلى ذلك، البلدان النامية أيضا أن تلعب دورا رئيسيا في بدء الاستجابة المناعية الذاتية، فضلا عن الحساسية 3.
البلدان النامية تلعب دورا أساسيا في كل من الشروع في استجابة جهاز المناعة، والحث على التسامح في تحديد بيئة الرئة 4. بيئة الرئة هو مولد للتحمل إلى حد كبير، وذلك بسبب التعرض لمجموعة واسعة من المستضدات البيئية 5. ومع ذلك، في بعض الأفراد هناك انقطاع في التسامح، الأمر الذي يؤدي إلى تحريض الحساسية والربو. في هذه الدراسة، ونحن تصف استراتيجية، والتي يمكن استخدامها لمراقبة مجرى الهواء العاصمة نضوج وميغالتموينية في استجابة للمستضد المستخدمة لتوعية. قياس نضوج العاصمة مجرى الهواء والهجرة يسمح لتقييم حركية من خلال استجابة مناعية التهاب الشعب الهوائية التحسسي، ويساعد أيضا في فهم حجم للاستجابة المناعية لاحق جنبا الى جنب مع الآليات الكامنة.
ترتكز استراتيجيتنا على استخدام ovalbumin كعامل توعية. Ovalbumin الناجم عن الحساسية والربو هو نموذج يستخدم على نطاق واسع إلى إنتاج فرط الحمضات الهوائية، والتهاب رئوي وارتفاع مستويات الجلوبيولين وجدت خلال 6،7 الربو. بعد التوعية، هي الطعن الفئران عن طريق التسليم من داخل الأنف ovalbumin FITC المسمى، والذي يسمح لوضع العلامات المحددة للبلدان النامية الهوائية التي ovalbumin امتصاص. المقبل، وذلك باستخدام العديد من علامات العاصمة محددة، ويمكننا أن نقيم نضوج من هذه البلدان النامية، ويمكن أيضا تقييم هجرتهم إلى الغدد الليمفاوية استنزاف من خلال توظيف التدفق الخلوي.
Protocol
1. التوعية من الفئران مع Ovalbumin يعد حل OVA (V الدرجة؛ سيغما، MO) في برنامج تلفزيوني العقيمة بتركيز 1 ملغ / مل (يمكن تخزينها في حل درجة مئوية -80). من أجل إعداد OVA-الشب خليط، وتأخذ الشبة في أنبوب ويضاف حل…
Discussion
الطريقة المعروضة هنا يقدم نهجا يستند إلى التدفق الخلوي لتحليل البلدان النامية الرئوي، على أساس تسليم FITC-OVA لتحدي الشعب الهوائية. وهذا يسمح لرصد انتقائي من البلدان النامية الرئوي، الذي يستغرق OVA-FITC، وبالتالي فإن سكان العاصمة، والتي يتم مراقبتها بشكل فعال تلك التي تشا…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
وقد تم تمويل هذا العمل عن طريق المنح وكندا CIHR CF إلى الدكتور جيم هو جين تاو وكذلك من خلال منحة دراسية لدرجة الدكتوراة التي منحت لKushwah راهول من كندا CF.
Kushwah, R., Hu, J. Analysis of Pulmonary Dendritic Cell Maturation and Migration during Allergic Airway Inflammation. J. Vis. Exp. (65), e4014, doi:10.3791/4014 (2012).