Caractériser les mécanismes de résistance Herbivores: cercopes sur Brachiaria Spp. comme un exemple

1. Plantes Boutures simple à partir de plantes matures sont utilisés comme unités expérimentales. Les boutures sont taillés à 10 cm pour assurer l'uniformité du matériel de plantation. Pour éviter la contamination par des agents pathogènes des plantes, les boutures sont lavés dans une solution d'hypochlorite de sodium à 3% pendant 2 min, puis rincée avec de l'eau du robinet thoughroughly. Chaque bouture est plantée dans ca. 36 g de sol stérile dans un tube cylindrique en PVC (5,3 cm de diamètre extérieur de 6,5 cm de hauteur) scellé à l'extrémité inférieure avec une tasse de styromousse et coiffé d'une douille en PVC. La coupe est maintenu en place par un anneau en mousse placée dans l'ouverture centrale de la douille. Les plantes sont fécondées et arrosés au besoin pour maintenir l'humidité du sol suffisante. Les plantes poussent pendant un mois avant d'être contestée par les insectes, ce qui permet le développement des racines superficielles, qui servent de sites d'alimentation pour les nymphes cercope racine xylème-alimentation. Tubes en PVC avec des boutures enracinées sont inversées pour les huit d avant l'infestation de stimuler davantage la croissance des racines superficielles, partiellement tenu compte des différences inhérentes à l'architecture des racines. Cette étape nécessite une source de lumière artificielle, qui nous fournissent pour 24 h par jour. Pour éviter échappe confondants d'herbivores à la résistance des herbivores, des plantes individuelles réplique avec peu ou pas de racines superficielles après ce traitement d'inversion sont éliminés de l'expérience. Cette élimination doit être rares, jamais conduisant à l'élimination du génotype qu'ils représentent. 2. Insectes Cercopes adultes sont recueillies sur le terrain, identifiés à l'espèce, et introduit dans des cages de ponte où ils sont fournis feuillage des brachiariagrasses sensibles à nourrir. Les femelles pondent leurs œufs dans le sol contenue dans un bac peu profond, placé sur le fond des cages. Après plusieurs jours, le sol est en suspension dans l'eau et passé à travers une série de tamis (42, 60 et 150 mesh) pour collecter les oeufs. Suspendre le matériel tamisée dans une solution saline à 30% des causes les oeufs matures à flotter, laissant derrière lui des œufs immatures et toute matière organique résiduelle. Pour éviter la contamination par des pathogènes d'insectes, les œufs sont désinfectés dans une solution d'hypochlorite de sodium à 0,5% pendant 5 min, puis rincée avec de l'eau distillée. Chaque usine de test (unité expérimentale) est infesté à la surface du sol avec six oeufs matures. Seuls les oeufs matures à proximité d'incubation sont sélectionnés pour les infestations. Ils peuvent être identifiés par la présence de deux points rouges dans leur partie antérieure, correspondant aux yeux de l'insecte; traces roses dans leur partie postérieure, correspondant à l'abdomen de l'insecte, et un opercule en entier. L'éclosion réussie est confirmée quatre jours plus tard, à quel point tout oeuf non éclos est remplacé par un nouveau-né cercope de notre colonie. Test de plantes sont disposées en blocs complets randomisés avec six répétitions par génotype. 3. Évaluations L'expérience est évaluée ca. 30 jours après l'infestation (horaires exacts varient selon les espèces d'insectes étudiés). Les dommages sont notés sur une échelle de 1 à 5 visuels, où 1 correspond à aucun dommage visible et 5 correspond à une usine de mort (figure 1). Notation des dommages plante fournit une estimation de la tolérance. Ampleur des dommages figure 1. Utilisé pour évaluer la tolérance au cercope herbivores dans les Brachiaria spp. 1 = aucun dommage détectable; 2 = 0-25% du feuillage nécrotiques; 3 = 25-50% du feuillage nécrotiques; 4 = 50-75% du feuillage nécrotiques; 5 = 75-100% du feuillage nécrotiques. La survie des insectes est évaluée par le comptage des insectes d'atteindre leur stade soit final ou au stade adulte (figure 2). De notation pour la survie des insectes fournit une estimation de l'antibiose. Figure 2. Cercope le développement du premier stade (à gauche) à l'adulte (à droite). Seuls les insectes d'atteindre au moins leur stade final (flèches) à la date de l'évaluation sont considérés comme des «survivants». 4. Les résultats représentatifs Les résultats d'un test hybrides représentant Brachiaria sélection pour la résistance à l'reducta cercope Aeneolamia sont présentés dans la figure 3. Figure 3. Résultats du dépistage hybrides Brachiaria pour la résistance à cercope Aeneolamia reducta. Nous considérons que les plantes résistantes si leur réponse à l'herbivorie tombe dans la moitié inférieure de ce complot. Augmente Antibiose de droite à gauche et à la tolérance augmente de haut en bas. Les flèches indiquent à nos chèques résistants.