Fare ve Sıçanlarda Anksiyete Ardışık sokaklar Testi
Summary
Artı-labirent önlemler anksiyete gibi kemirgenler davranış. Kapalı iki zıt ve iki zıt açık kollar vardır; endişeli kemirgenler açık kollar kaçının. Merkezi alanı tamamen açık ne de kapalı ne, bu nedenle burada harcanan zaman belirsiz ve yorumlamak zordur. Burada, bu alanda ortadan artı-labirentte protokolünün bir değişikliği tarif edilmektedir.
Abstract
Artı-labirent Montgomery erken işten elde edildi. O sıçan kapalı olanlar tercih, bir labirentin açık kollar önlemek eğiliminde olduğu görülmektedir. Handley, Mithani ve Dosya<em> Ve ark.</em> Bugün kullandığımız artı-labirent tasarım ilk çalışmalar yapılan, 1987 Lister fareler ile kullanmak için bir tasarım yayınladı. Zaman harcanan ve kayıtları içine, açık kollar anksiyete bir dizin olan, bu endekslerin alt, daha endişeli faredir. Alternatif olarak, kapalı kollarında zamanının çoğunu geçirdiği bir fare endişeli olarak sınıflandırılır. Artı-labirent sorunlardan biri zamanında harcanan süre, yani, ve girişleri içine, açık kollar anksiyete oldukça net ölçüsüdür, orta alanda zaman zaman burada geçirdi rağmen, yorumlamak daha zordur sınıflandırılmıştır "karar verme" olarak. Birçok testlerde orta alanda zaman toplam test zaman önemli bir parçasıdır. Çoban<em> Ve ark.</em> Onlar "sıfır labirent" denen merkezi bölgeye, ortadan kaldırmak için ustaca bir tasarım üretti. Yaygın olarak artı-labirent gibi kabul Ancak, çeşitli gruplar tarafından kullanılmasına rağmen, bu olmamıştı. Bu yazıda orta alanı ortadan kaldırır sadece artı-labirent tasarım bir değişiklik tanımlamak değil, aynı zamanda ışık-karanlık kutusu ve ortaya çıkması testleri gibi diğer anksiyete testleri, öğeleri içermektedir. Dört sokakları doğrusal bir dizi, her anksiyojenik özellikleri artan sahip. Genel olarak kullanımım ve artı-labirent benzer sonuçlar vermiştir. Bu artı-labirent (kesin bir sonuca bu noktada ulaşılabilir önce daha fazla veri gereklidir) daha duyarlı olmamasına rağmen, sadece bir, örneğin, yararlı olacaktır artı-labirent sonuçlarının yararlı bir onay sağlar bir mutant fare tek bir örneği mevcut olduğu gibi, örneğin, TRK-esaslı mutagenez programlarına.
Introduction
Yükseltilmiş artı-labirent Montgomery erken işten elde edildi. 27 O kapalı olanlar tercih, sıçan bir labirent açık kollar önlemek eğiliminde olduğu görülmektedir. Handley ve Mithani ve Dosya ve ark. 22,29 bugün kullandığımız artı-labirent tasarım ilk çalışmalar yapılan, 1987 Lister fareler 25 ile kullanmak için bir tasarım yayınladı. Şimdi anksiyolitik tedavileri 23 için standart bir testtir ve bazı protokoller 36,24 yayınlanmıştır http://www.jove.com/video/1088 ; http://currentprotocols.com/protocol/ph0538 .
Elevasyonlu artı-labirentte planında + şeklinde, merkezi bir bölgede kesişen iki karşıt açık ve iki karşıt kapalı kollarda oluşur. Yüzde zaman harcanan ve yüzde girişleri içine, açık kollar bir dizin varanksiyete-benzeri davranışlar, bu endekslerin alt, daha endişeli faredir. Alternatif olarak, kapalı kollarında zamanının çoğunu geçirdiği bir fare endişeli olarak sınıflandırılır.
Aynı zamanda keşif, risk değerlendirme ve diğer faktörler; faktör analizi bir faktör ağır açık kol faaliyeti yük endeksleri davranış anksiyete benzeri olarak belirlenen ve kapalı kol girişleri büyük ölçüde motor aktivite yansıtırken, faktörler arasındaki sınırların kesin olmadığını göstermiştir karar verme, artı-labirent 12,32 davranış profilini oluşturmaktadır. Burada harcanan zaman 32 "karar verme" olarak sınıflandırılmıştır rağmen orta alanda zaman, yorumlamak daha da problemlidir. Fareler birçok çalışmada, açık kollar üzerinde kapalı kollarında onların çoğu zaman harcamak ve nispeten daha az zaman olmasına rağmen çok zaman silah katılmak orta bölgesinde harcanmaktadır. Bu karar 32 temsil olsa da, te belirsizrms anksiyete-benzeri davranışlar, son derece endişeli fareler orta alanda hem de açık kollar önlemek için beklenebilir olabilir ancak. Bu belirsiz orta alanda ortadan kaldırmak için erken bir girişim iki açık olanlar 33 ile dönüşümlü iki kapalı kadran ile dairesel bir labirent inşa etmek oldu. Bu "sıfır labirent" bir hayvan olarak da açıkça bir açık (anksiyojenik) veya kapalı (nonanxiogenic) bölge. Yaygın olarak artı-labirent gibi kabul Ancak, çeşitli gruplar tarafından kullanılmasına rağmen, bu olmamıştı. Laboratuvarımızda biz artı-labirent ise (ve ardışık sokaklar) hipokampal lezyonlanan farelerde anksiyolitik etkileri gösterdi bulundu, bu Çoban ve ark olduğu gibi tam olarak inşa sıfır labirent üzerinde görülmedi. 13
Ardışık sokakları cihazı bu nedenle artı-labirent orta bölgesinde ortadan kaldırılması temel amacı ile geliştirilmiştir. İkinci olarak, anksiyete benzeri bir davranış diğer test elemanları dahil edilmiştir. Başlayarakkapalı sokakta 1 hayvan, bir ortaya bileşeni, Stone'un "soba borusu" test 34 benzer tanıtıldı. Beyaz gri (sokak 2) ile siyah (sokak 1) sokakları renk değişiklikleri (sokakları 3 ve 4). Bu açık-koyu kutu test 11'de örnek olarak fare, koyu alanlar tercih gözlemlerden kaynaklanmaktadır. Yüksek duvarlar ve hiçbir duvar arasında ani bir geçiş olduğu yerde izleyen sokakları duvarları da yavaş yavaş artı-labirent aksine, yüksekliği düşüş. Sokaklar genişliği giderek duvar yüksekliği giderek azalması ile uyum içinde, labirentin yüksek konumu için fare artırmak yavaş yavaş azalır. Tüm bu faktörler testin duyarlılığı artırmak ve artı-labirent yaptığından daha kaygı gibi davranış daha geniş yayılan amacıyla dahil edilmiştir. Arda sokakları cihazı aynı wa, dirsek anksiyete gibi davranış taban daha geniş için bir girişim olduY bu başlangıçta anksiyete benzeri bir davranış ince modifikasyonları İçerik 17 izni algılama tarafından gerçekleştirilen gibi sosyal etkileşim testiyle dört temel koşulları. İçerik, nikotin etkileri üzerinde yapılan bir çalışmada, yalnızca iki ara anksiyete benzeri bir davranış koşulları değil, en yüksek veya en düşük 20 farklılıkları gördü.
Yanı sıra artı-labirent, anksiyete gibi davranış başka bir yaygın olarak kullanılan test açık-koyu kutusu 11'dir. Açık-koyu kutusu ve artı-labirent sonuçları her zaman birbirleri 35 ile ilişkili değildir. Şimdi anksiyete gibi davranış üniter olgu 19 olmadığı kabul edilir. Bu ikinci gelen kurnazca farklı olduğu ardışık sokakları testi bu nedenle de, makul hatta artı-labirent sonuçları açık-koyu kutusunu kullanarak elde edilen farklı vermek, ve olabilir, ancak eski ve ikinci arasındaki sonuçlar beklenir genel olarak benzer olduğu.
<p class="Jove_content"> Bu artı-labirent tekrar test görülen anksiyete türü değiştirdiği gösterilmiştir. 8,21 birbiri ardına sokaklar takip artı-labirent için bir hayvan türüne maruz değişim ortadan kaldırır olabilir artı-labirentte test tekrarlanır anksiyete benzeri bir davranış ölçülür. Bunun bir örneği, artı-labirent ve birbirini izleyen sokaklar zamansal denge şekilde prefrontal korteks-lezyonlu ve kontrol farelerinin test etmek için kullanılan zaman görülmüştür. Lezyonlu fareler ne olursa olsun test ardışık sokakları ya da 15 ilk artı-labirent ile meydana olsun, cihaz her iki tip anlamlı olarak daha düşük anksiyete gibi davranış gösterdi. Bu artı-labirent ve ardışık sokaklar sıralı kullanım artı labirent testi tekrarlanır zaman görülebilir anksiyolitik ilaçlar duyarlılığı korumak olabilir da mümkündür. 18Sıçanlar da izleyen sokakları daha büyük bir versiyonu üzerinde test edilebilir. Prosedür, tam olarak to fareler için aynı.
Hyponeophagia, ayrı yüksek labirent başına davranış test anksiyete benzeri gelen hayvanların önceki genel deneyimi, için test olduğu gibi, sonucu etkileyebilir. 1,16
Protocol
Representative Results
Discussion
Sonuç olarak, başarılı sokakları testi hipokampal kompleks veya medial prefrontal korteks lezyonları yapıldığında artı-labirent genellikle benzer sonuçlar üretir, ancak daha fazla çalışma diğer beyin bölgelerinde lezyon etkilerini değerlendirmek için gereklidir anksiyete ile ilişkili olduğu düşünülen davranış gibi. Bazen, artı-labirent sonuçları ardışık sokaklar olanlardan belirgin farklılık, bu bir örnek Kir6.2 KO fareler 14 bizim eseridir. Her ikisi de cihazları test edildiğinde, onlar açık artı-labirent silah (daha az anksiyete gösteren vahşi tip farelere göre daha fazla zaman geçirdim beri bizimle, KO fareler kaygı gibi davranış genel bir tek yönlü değişiklik göstermemiştir olduğunu göstermek için izin ) davranış gibi, ancak başarılı sokakları (gösteren davranış anksiyete benzeri büyük) bir sokak 1 daha fazla zaman. Böylece, artı-labirent ve başarılı sokakları kombine kullanımı, iki test bu yana, yanlış pozitif veya yanlış negatif sonuçlar ortadan kaldırabilir rağmenbenzer, işlevsel aynı değildir.
Artı-labirentte olduğu gibi, girdi hiperaktivite sokaklar sayısının seçici olmayan bir artışa yol açmaz. Çalışmalar farelerde davranış organizasyonu bağımsız aktivitesi 28 arasında değişiklik göstermiştir. Photobeam etkinliği izleme kafeslerde ayrı testte belirgin hiperaktif olduğu gösterilmiştir medial septal lezyonlanan sıçanlarda, sadece sokakları 2 ve 3 olarak anlamlı olarak daha fazla girişleri gösterdi;. Sokaklar 1 ve 4 girişlerini kontrol farklı değildi 5 daha az endişeli septal Yani lezyonlanan sıçanlarda cihazı anksiyete bir yelpazede konumlarını yani, tespit etmek için tasarlanmış ne gösteren, art arda sokakları iki orta anksiyete yaratan alanlar arasında ileri ve geri mekik edildi. Onlar daha az endişeli olsaydı, sokaklar 3 ve 4 arasında geçişleri bir artış gördük olurdu.
Hiperaktivite yol açmaz diğer kanıt ardışık sokaklar testinde yanlış pozitif dorsal hipokampal lezyonları olan fareler hiperaktif ama başarılı sokaklar 7 anksiyolitik etki göstermemiştir kalmamasıdır. Lineer cihazı, siyah-beyaz sokak testi ile ilgili bir testte, erkeklerin kontrollere benzer iken GluRA KO dişi farelerde kontrol grubuna göre çok daha kaygı gibi davranış gösterir, ancak her iki cinste 3 belirgin hiperaktif. Kir6.2 KO vahşi farelerden daha evlerinde kafeslerde daha aktif ama başarılı sokaklar 14 les anksiyete gösterdi. Özellikle, 8 KO fareler atladı ya da artı-labirent ama başarılı sokakları gelen hiçbiri düştü.
Olarak şu anda kullanılan ardışık sokakları testin bir sınırlama zemin değişen renk verilen, video izleme sistemleri kullanmak zor olacağını, olmasıdır. Renk sadece anksiyete oluşturur cihazı içinde faktörlerden biri olduğu için, kat, muhtemelen tek bir renge boyanabilir.
nt "> izleyen sokakları testi olası değildir, ancak bu tür artı-labirent 10,23 olarak benzer ethologically bazlı testler ile ilgili değişkenlik sorunları muzdarip, ancak her iki görevler üzerinde hayvanların toplu test bir sonuçsuz açıklamak için yardımcı olabilir değil artı-labirent testi 30,31,37, kaygı gibi davranış test ederken bir çok test yaklaşım avantajlı olabilir.Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Oxford Üniversitesi Açık Erişim finansman sağlamak için Wellcome Trust. Robert Deacon Wellcome Trust hibe WT084655MA tarafından finanse edilen Oxford Oxion grubunun bir üyesidir.
References
- Andrews, N., File, S. E. Handling history of rats modifies behavioural effects of drugs in the elevated plus-maze test of anxiety-like behaviour. Eur. J. Pharmacol. 235, 109-112 (1993).
- Balogh, S. A., McDowell, C. S., Stavnezer, A. J., Denenberg, V. H. A behavioral and neuroanatomical assessment of an inbred substrain of 129 mice with behavioral comparisons to C57BL/6J mice. Brain Res. 836, 38-48 (1999).
- Bannerman, D. M., Deacon, R. M. J., Brady, S., Bruce, A., Sprengel, R., Seeburg, P. H., Rawlins, J. N. P. A comparison of GluR-A-deficient and wild-type mice on a test battery assessing sensorimotor, affective and cognitive behaviors. Behavioral Neuroscience. 118, 643-647 (2004).
- Bannerman, D. M., Deacon, R. M. J., Offen, S., Friswell, J., Grubb, M., Rawlins, J. N. P. A double dissociation of function within the hippocampus: Spatial memory and hyponeophagia. Behav. Neurosci. 116, 884-901 (2002).
- Bannerman, D. M., Matthews, P., Deacon, R. M. J., Rawlins, J. N. P. Medial septal lesions mimic effects of both selective dorsal and ventral hippocampal lesions. Behav. Neurosci. 118, 1033-1141 (2004).
- Bannerman, D. M., Rawlins, J. N. P., McHugh, S. B., Deacon, R. M. J., Yee, B. K., Bast, T., Zhang, W. -. N., Pothuizen, H. H. J., Feldon, J. Regional dissociations within the hippocampus – memory and anxiety-like behaviour. Neurosci. Biobehav. Rev. 28, 273-283 (2004).
- Bannerman, D. M., Yee, B. K., Good, M. A., Heupel, M. J., Iversen, S. D., Rawlins, J. N. P. Double dissociation of function within the hippocampus: A comparison of dorsal, ventral and complete hippocampal cytotoxic lesions. Behavioral Neuroscience. 113, 1170-1188 (1999).
- Carobreza, A. P., Bertoglio, L. J. Ethological and temporal analyses of anxiety-like behavior: The elevated plus-maze model 20 years on. Neurosci. Biobehav. Rev. 29, 1193-1205 (2005).
- Contet, C., Rawlins, J. N. P., Deacon, R. M. J. A comparison of 129S2/SvHsd and C57BL/6JOlaHsd mice on a test battery assessing sensorimotor, affective and cognitive behaviours: implications for the study of genetically modified mice. Behavioural Brain Research. 124, 33-46 (2001).
- Crabbe, J. C., Wahlsten, D., Dudek, B. C. Genetics of mouse behavior: Interactions with laboratory environment. Science. 284, 1670-1672 (1994).
- Crawley, J., Goodwin, F. K. Preliminary report of a simple animal behavior model for the anxiolytic effects of benzodiazepines. Pharmacol. Biochem. Behav. 13, 167-170 (1980).
- Cruz, A. P. M., Frei, F., Graeff, F. G. Ethopharmacological analysis of rat behavior on the elevated plus-maze. Pharmacol. Biochem. Behav. 49, 171-176 (1994).
- Deacon, R. M. J., Bannerman, D. M., Rawlins, J. N. P. Anxiolytic effects of cytotoxic hippocampal lesions in rats. Behavioral Neuroscience. 116, 494-497 (2002).
- Deacon, R. M. J., Brook, R. C., Meyer, D., Haeckel, O., Ashcroft, F. M., Miki, T., Seino, S., Liss, B. Behavioral phenotyping of mice lacking the KATP channel subunit Kir6.2. Physiol. Behav. 87, 723-733 (2006).
- Deacon, R. M. J., Penny, C., Rawlins, J. N. P. Effects of medial prefrontal cortex cytotoxic lesions in mice. Behav. Brain Res. 139, 139-155 (2003).
- Doremus, T. L., Varlinskaya, E. I., spear, L. P. Age-Related Differences in Elevated Plus Maze Behavior between Adolescent and Adult Rats. Ann. N.Y. Acad. Sci. 1021, 427-430 (2004).
- File, S. E. The use of social interaction as a method for detecting anxiolytic activity of chlordiazepoxide-like drugs. J. Neurosci. Meth. 2, 219-238 (1980).
- File, S. E. One-trial tolerance to the anxiolytic effect of chlordiazepoxide in the plus-maze. Psychopharmacol. 100, 281-282 (1990).
- File, S. E., Elliot, J. M., Heal, D. J., Marsden, C. A. Behavioural detection of anxiolytic action. Experimental approaches to anxiety-like behaviour and depression. , 25-44 (1992).
- File, S. E., Kenny, P. J., Ouagazzal, A. M. Bimodal modulation by nicotine of anxiety-like behaviour in the social interaction test: Role of the dorsal hippocampus. Behav. Neurosci. 112, 1423-1429 (1998).
- File, S. E., Zangrossi, H., Viana, M., Graeff, F. G. Trial 2 in the elevated plus-maze: a different form of fear?. Psychopharmacology. 111, 491-494 (1993).
- Handley, S. L., Mithani, S. Effects of alpha-adrenoceptor agonists and antagonists in a maze-exploration model of “fear”- motivated behaviour. Naunyn-Schmiedeberg’s Arch. Pharmacol. 327, 1-5 (1984).
- Hogg, S. A review of the validity and variability of the elevated plus-maze as an animal model of anxiety-like behaviour. Pharmacol. Biochem. Behav. 54, 21-30 (1996).
- Komada, M., Takao, K., Miyakawa, T. Elevated Plus Maze for Mice. J. Vis. Exp. (22), e1088 (2008).
- Lister, R. G. The use of a plus-maze to measure anxiety-like behaviour in themouse. Psychopharmacology. 92, 180-185 (1987).
- McHugh, S. B., Deacon, R. M. J., Rawlins, J. N. P., Bannerman, D. M. Amygdala and ventral hippocampal lesions contribute differentially to mechanisms of fear and anxiety-like. , 118-163 (2004).
- Montgomery, K. C. The relation between fear induced by novelty stimulation and exploratory behaviour. J. Comp. Physiol. Psychol. 48, 254-260 (1958).
- Paulus, M. P., Dulawa, S. C., Ralph, R. J., Geyer, M. A. Behavioral organization is independent of locomotor activity in 129 and C57 mouse strains. Brain Res. 835, 27-36 (1999).
- Pellow, S., Chopin, P., File, S. E., Briley, M. Validation of open:closed arm entries in an elevated plus-maze as a measure of anxiety-like behaviour in the rat. J. Neurosci. Methods. 14, 149-167 (1985).
- Ramos, A. Animal models of anxiety: do I need multiple tests?. TIPS. 29, 493-498 (2008).
- Ramos, A., Berton, O., Mormede, P., Chauloff, F. A multipletest study of anxiety-like behaviour-related behaviours in six inbred rat strains. Behav. Brain Res. 85, 57-69 (1997).
- Rodgers, R. J., Johnson, J. T. Factor analysis of spatiotemporal and ethological measures in the murine elevated plus-maze test of anxiety-like behaviour. Pharmacol. Biochem. Behav. 52, 297-303 (1995).
- Shepherd, J., Grewal, S. S., Fletcher, A., Bill, D. J., Dourish, C. T. Behavioural and pharmacological characterisation of the elevated “zero-maze” as an animal model of anxiety-like behaviour. Psychopharmacology. , 116-156 (1994).
- Stone, C. P., Lashley, K. S. Wildness and savageness in rats of different strains. Studies in the dynamics of behaviour. , 3-55 (1932).
- Treit, D., Menard, J. Dissociations among the anxiolytic effects of septal, hippocampal, and amygdaloid lesions. Behavioral Neuroscience. 111, 653-658 (1997).
- Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nature Protocols. 2, 322-328 (2007).
- Yamasaki, N., et al. Factor analyses of large-scale data justify the behavioral test battery strategy to reveal the functional significances of the genes expressed in the brain. , (2006).
