Agar-Montage: Eine grundlegende Methode zur Montage lebender Zebrafisch-Embryonen für Langzeitaufnahmen
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Hagedorn E. J., et al. Generation von parabiotischen Zebrafisch-Embryonen durch chirurgische Fusion der Entwicklung Blastulae. J. Vis. (2016).
Dieses Video beschreibt Schritt für Schritt Anleitungen zur Montage lebender Zebrafisch-Embryonen auf 6 Brunnenplatten mit niedriger Schmelzagarose. Es bietet auch den Prozess, um Bilder von lebenden Embryonen zu erfassen und es mit Software zu analysieren.
Protocol
1. Mikroskop-Setup, Bildaufnahme, -verarbeitung und -analyse 0,8% Niedrigschmelzpunkt (LMP) Agarose vorbereiten: 0,8 g LMP-Agarose zu 100 ml E3 hinzufügen und erhitzen, bis es vollständig gelöst ist. Während heiß, aliquot 1 ml LMP Agarose in 1,5 ml Mikrofuge-Röhrchen in einem 37 °C Heizblock. Die LMP-Agarose bleibt bei 37 °C geschmolzen. Fügen Sie 40 l von 4 mg/ml (25x), pH 7,0 Tricain zu jeder 1 ml Aliquot von LMP-Agarose bei 37 °C hinzu. HINWEIS: Wenn Sie mit einem…
Materials
| LMP agarose (Ultrapure LMP agarose) | Invitrogen | 16520100 |
| Tricaine (powder) (Tricaine Methanesulfonato, Tricaine-S) | Western Chemical Inc | MS 222 |
| Glass-bottom 6-well plates used for imaging | MatTek | P06G1.5-20-F |
| 10 ml pipette pump (green) (Pipette Pump Pipettor) | Novatech International | F37898-0000 |
Cite This Article
Agar Mounting: A Basic Method of Mounting Live Zebrafish Embryos for Long-Term Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20187, doi: (2023).