Summary

鋤鼻上皮の多電極アレイ録音

Published: March 01, 2010
doi:

Summary

多電極アレイ(MEA)の録音は、神経細胞の大規模な集団の電気的活動を研究するための方法を提供する。同時に組織を刺激しながらここで、我々はマウス鋤鼻上皮からのレコードにMEAの準備の詳細を示す。

Abstract

神経回路を理解することの方法は同時に多数のニューロンから記録する必要があります。の<em> in vitroで</em>研究、一方、現在利用可能な技術は、平面多電極アレイ(MEA)の記録である。ここでは受容体の数百種類を表現する感覚ニューロンの多様な人口を介したフェロモンと社会的手がかりの発見に重要な役割を果たしているマウスの鋤鼻器官(VNO)を、勉強するMEAの使用を文書化する。化学的刺激を提供するロボット液体ハンドラとMEAの記録を組み合わせることで、ニューロンの大規模かつ多様な人口の感覚応答を記録することができます。準備は、私たちは、マウスからVNOの無傷の上皮を除去し、数時間のための神経細胞の電気的活動を監視しながら、化学物質または潜在的リガンドのバッテリーを刺激することができます。したがって、この手法は、リガンド活性を評価するだけでなく、受容体の神経細胞の性質を探求するための有用な方法として機能します。私たちは、鋤鼻上皮、MEAの記録、および化学的刺激を準備するために必要なテクニックを紹介。

Protocol

パート1。電気的記録計我々は、窒化ケイ素で絶縁さ10μmの平坦な窒化チタン電極を有する平面多電極アレイを(ALAサイエンティフィックインスツルメンツ)を使用します。 60電極が30μmの中心間距離と5X6のグリッドで構成される二つのフィールドに配置されています。 (その他の構成も可能です。直径の記録面は10μmで電極が単一ニューロンの活動を分離するという点で大きな電極よ?…

Discussion

多電極アレイの録音は、私たちの神経細胞の大集団の同時活動を監視する能力を許可する。これは特に、VNOの感覚系の特性をプロービングするための便利なツールです。主嗅覚系とは異なり、VNOは、液相中で刺激を検出します。さらに、VNOは異種の組織です。おそらく別の応答プロファイルとマウス1の受容体の約300の異なる種類があります。 MEAの録音は、私たちは確実にニューロン…

Acknowledgements

私たちは、聖研究室のメンバーに感謝したいと思います。この作品は、聴覚障害とコミュニケーション障害研究所(R01 DC005964まで)とNSF IGERT 0548890(HAA)によってサポートされていました。

動物実験は米国の動物福祉の行為と健康ガイドラインの国立研究所に準拠して行われたとワシントン大学の動物実験委員会によって承認された。

References

  1. Dulac, C., Torelo, A. T. Molecular detection of pheromone signals in mammals: from genes to behaviour. Nat Rev Neurosci. 4, 551-562 (2003).
  2. Holy, T. E. Responses of Vomeronasal neurons to natural stimuli. Science. 289, 1569-1572 (2000).
  3. Nodari, F. Sulfated steroids as natural ligands of mouse pheromone-sensing neurons. J Neurosci. 28, 6407-6418 (2008).

Play Video

Cite This Article
Arnson, H. A., Fu, X., Holy, T. E. Multielectrode Array Recordings of the Vomeronasal Epithelium. J. Vis. Exp. (37), e1845, doi:10.3791/1845 (2010).

View Video