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生化学
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制备与DNA修复因子络合的核小体核心颗粒用于冷冻电镜结构测定
JoVE Journal
生化学
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生化学
Preparation of Nucleosome Core Particles Complexed with DNA Repair Factors for Cryo-Electron Microscopy Structural Determination
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制备与DNA修复因子络合的核小体核心颗粒用于冷冻电镜结构测定
DOI:
10.3791/64061-v
•
07:59 min
•
August 17, 2022
•
Yesenia Rodriguez
,
Kevin John Butay*
1
,
Kedar Sharma*
1
,
Elizabeth Viverette*
1
,
Samuel H. Wilson
1
Genome Integrity and Structural Biology Laboratory
,
National Institute of Environmental Health Sciences, National Institutes of Health
章
00:04
Introduction
00:58
Preparation of NCP-DNA Repair Factor Complex
02:31
Freezing Nucleosomal Complex
04:25
Screen Grids
06:02
Results: Preparation of Nucleosomal Complexes Using Frozen TEM Grids
07:20
Conclusion
概要
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该协议详细概述了使用两种用于冷冻TEM网格的样品制备方法制备核小体复合物。
タグ
Nucleosome
DNA Repair
Cryo-electron Microscopy
Sample Preparation
Cross-linking
Size Exclusion Chromatography
Buffer Exchange
Protein Complex
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