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从哺乳动物细胞中纯化泛素化p53蛋白
JoVE Journal
生化学
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JoVE Journal 生化学
Purification of Ubiquitinated p53 Proteins from Mammalian Cells

从哺乳动物细胞中纯化泛素化p53蛋白

DOI:

10:55 min

March 21, 2022

, ,

  • 00:05Introduction
  • 00:43Plasmid Transfection
  • 02:16Cell Collection
  • 02:52Purification of Ubiquitinated Proteins under Nondenaturing Conditions
  • 05:01Purification of Ubiquitinated Proteins under Denaturing Conditions
  • 07:49Detection of Purified Ubiquitinated Proteins by Western Blotting
  • 08:29Results: Ubiquitinated p53 Proteins Purified under Nondenaturing and Denaturing Conditions
  • 10:22Conclusion

概要

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该协议描述了一种以p53肿瘤抑制蛋白为例从哺乳动物细胞中纯化泛素蛋白的分步方法。泛素化的p53蛋白在严格的非变性和变性条件下从细胞中纯化。

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