Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

Lichen Zhang; Rong Huang; Liaoxun Lu; Rui Fu; Guo Guo; Yanrong Gu; Zhuangzhuang Liu; Le He; Marie Malissen; Yinming Liang

doi:10.3791/62328

ジャーナル

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免疫学と感染

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Gene Knock-in por CRISPR/Cas9 e Classificação celular em linhas de células macrófagos e t

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免疫学と感染
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JoVE Journal 免疫学と感染

Gene Knock-in by CRISPR/Cas9 and Cell Sorting in Macrophage and T Cell Lines

Gene Knock-in por CRISPR/Cas9 e Classificação celular em linhas de células macrófagos e t

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•

11:32 min

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November 13, 2021

DOI:

10.3791/62328-v

DOI:

10.3791/62328-v

•

11:32 min

November 13, 2021

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Lichen Zhang¹, Rong Huang¹, Liaoxun Lu¹, Rui Fu¹, Guo Guo¹, Yanrong Gu¹, Zhuangzhuang Liu¹, Le He¹, Marie Malissen², Yinming Liang¹

¹The Laboratory of Genetic Regulators in the Immune System, School of Laboratory Medicine,Xinxiang Medical University, ²Centre d’Immunologie de Marseille-Luminy,Aix Marseille Université

概要

Este protocolo usa repórteres fluorescentes e classificação celular para simplificar experimentos de knock-in em linhas de células macrófagos e t. Dois plasmídeos são usados para esses experimentos simplificados de knock-in, ou seja, um plasmídeo de expressão CRISPR/Cas9 e DsRed2 e um plasmídeo de recombinação homólogo que expressa EBFP2, que está permanentemente integrado no lócus Rosa26 em células imunes.

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