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Análise de tempo de permanência de molécula única de clivagem de DNA mediada por endonuclease de restrição
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Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage

Análise de tempo de permanência de molécula única de clivagem de DNA mediada por endonuclease de restrição

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•

09:53 min

•

February 07, 2021

DOI:

10.3791/62112-v

DOI:
10.3791/62112-v

•

09:53 min
February 07, 2021

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2 Views
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1化学科,Tufts University, 2物理学科,Wesleyan University, 3Wyss Institute at Harvard University

概要

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Usando DNA marcado com ponto quântico e microscopia de fluorescência de reflexão interna total, podemos investigar o mecanismo de reação das endonucleases de restrição ao usar proteína não marcada. Essa técnica de molécula única permite a observação massivamente multiplexada de interações proteína-DNA individuais, e os dados podem ser agrupados para gerar distribuições de tempo de permanência bem povoadas.

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Single-molecule Dwell-time AnalysisRestriction EndonucleaseDNA CleavageMultiplexed ApproachGamma Probability DistributionOligonucleotideDTTQuantum DotSulfo-SMCCCHES BufferPBS

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Etson, C. M., Todorov, P., Shatery Nejad, N., Shrestha, N., Walt, D. R. Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage. J. Vis. Exp. (168), e62112, doi:10.3791/62112 (2021).

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