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Einzelmolekül-Verweilzeitanalyse der Restriktionsendonuklilease-vermittelten DNA-Spaltung
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09:53 min
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February 07, 2021
DOI:
概要
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Mit Hilfe von Quantenpunkt-markierter DNA und Totalreflexionsfluoreszenzmikroskopie können wir den Reaktionsmechanismus von Restriktionsendonukleasen untersuchen, während wir unmarkierte Proteine verwenden. Diese Einzelmolekültechnik ermöglicht die massiv gemultiplexte Beobachtung einzelner Protein-DNA-Wechselwirkungen, und Daten können gepoolt werden, um gut bevölkerte Verweilzeitverteilungen zu erzeugen.
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Etson, C. M., Todorov, P., Shatery Nejad, N., Shrestha, N., Walt, D. R. Single-Molecule Dwell-Time Analysis of Restriction Endonuclease-Mediated DNA Cleavage. J. Vis. Exp. (168), e62112, doi:10.3791/62112 (2021).
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