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Incorporazione ottimizzata di analoghi degli acidi grassi alchinici per il rilevamento di proteine acilate grasse utilizzando la chimica dei clic
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生化学
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JoVE Journal 生化学
Optimized Incorporation of Alkynyl Fatty Acid Analogs for the Detection of Fatty Acylated Proteins using Click Chemistry
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Incorporazione ottimizzata di analoghi degli acidi grassi alchinici per il rilevamento di proteine acilate grasse utilizzando la chimica dei clic

DOI:
10.3791/62107-v

•

07:27 min

•

April 09, 2021

•

, ,
1生物学科,University of Waterloo

章

  • 00:04Introduction
  • 00:44Cell Culture
  • 01:25Preparation and Saponification of Fatty Acid Analogs
  • 03:35Click Reaction on Cell Lysates
  • 04:12Click Reaction on Immunoprecipitated Proteins
  • 05:13Results: Detection of Fatty Acylated Proteins Using Click Chemistry
  • 06:57Conclusion

概要

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Lo studio dell'acilazione grassa ha importanti implicazioni nelle interazioni proteiche cellulari e nelle malattie. Qui viene presentato un protocollo modificato per migliorare il rilevamento della chimica dei clic delle proteine acilate grasse, che può essere applicato in vari tipi di cellule e combinato con altri saggi, tra cui pulse-chase e spettrometria di massa.

タグ

Alkynyl Fatty Acid AnalogsClick ChemistryFatty Acylated ProteinsFatty Acid LabelingMetabolic LabelingHEK-293 T-cellsBSA-bound Fatty AcidsSaponificationPotassium HydroxideFatty Acid-free BSA

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