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Parallele Vernehmung der Rekrutierung von '-Arrestin2 für Ligand Screening auf einer GPCR-weiten Skala mit PRESTO-Tango Assay
章
- 00:05Introduction
- 00:43Primary Screening: Poly-L-Lysine Plate Preparation
- 01:25Primary Screening: Cell Culture and Plate Seeding
- 02:22Primary Screening: DNA Plate Preparation and Transfections
- 03:35Primary Screening: Cell Stimulation and Luminescence Reading
- 04:26Secondary Screening: Cell Seeding and Transfections
- 05:59Secondary Screening: Half Log Dose-Curve Drug Plate Preparation and Luminescence Reading
- 07:16Results: Representative Primary Screening Hit Identification and Secondary Screening Dose-Curve Responses
- 08:23Conclusion
Da GPCRs attraktive arzneimittelfähige Ziele sind, ist das GPCR-Ligandenscreening daher für die Identifizierung von Bleiverbindungen und für Deorphanisierungsstudien unerlässlich. Im Rahmen dieser Bemühungen beschreiben wir PRESTO-Tango, eine Open-Source-Ressourcenplattform, die für die gleichzeitige Profilierung der vorübergehenden Rekrutierung von "Arrestin2" bei ca. 300 GPCRs mit einem TEV-basierten Reportertest verwendet wird.
