このコンテンツを視聴するには、JoVE 購読が必要です。 サインイン又は無料トライアルを申し込む。
Parallelle ondervraging van β-Arrestin2 Recruitment for Ligand Screening op een GPCR-Brede Schaal met presto-Tango Assay
章
- 00:05Introduction
- 00:43Primary Screening: Poly-L-Lysine Plate Preparation
- 01:25Primary Screening: Cell Culture and Plate Seeding
- 02:22Primary Screening: DNA Plate Preparation and Transfections
- 03:35Primary Screening: Cell Stimulation and Luminescence Reading
- 04:26Secondary Screening: Cell Seeding and Transfections
- 05:59Secondary Screening: Half Log Dose-Curve Drug Plate Preparation and Luminescence Reading
- 07:16Results: Representative Primary Screening Hit Identification and Secondary Screening Dose-Curve Responses
- 08:23Conclusion
Aangezien GPCRs aantrekkelijke geneesmiddelendoelstellingen zijn, is GPCR ligandscreening dus onmisbaar voor de identificatie van loodverbindingen en voor deorphanisatiestudies. In de richting van deze inspanningen beschrijven we PRESTO-Tango, een open-source resource platform dat wordt gebruikt voor gelijktijdige profilering van voorbijgaande β-arrestin2 werving bij ongeveer 300 GPCRs met behulp van een TEV-gebaseerde reporter test.
