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Ausdruck, Solubilisierung und Reinigung der eukaryotischen Borat-Transporter
JoVE Journal
生化学
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JoVE Journal 生化学
Expression, Solubilization, and Purification of Eukaryotic Borate Transporters

Ausdruck, Solubilisierung und Reinigung der eukaryotischen Borat-Transporter

DOI:

08:55 min

March 07, 2019

, ,

  • 00:04標題
  • 00:28Borate Transporter Overexpression in S. cerevisiae
  • 01:55Yeast Membrane Harvest
  • 03:51Protein Solubilization and Purification
  • 05:56Glutaraldehyde Cross-Linking Assay
  • 07:09Results: Representative Borate Transporter Purification and Analysis
  • 08:18Conclusion

概要

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Hier präsentieren wir ein Protokoll, um auszudrücken, solubilisieren und mehrere eukaryotischen Borat-Transporter mit Homologie zur SLC4 Transporter Familie mit Hefe zu reinigen. Wir beschreiben auch einen chemische Vernetzung Assay zur Beurteilung der gereinigten Homomeric Proteine für Multimeric Montage. Diese Protokolle können für andere anspruchsvolle Membranproteine angepasst werden.

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