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Unicellulaire Quantification du taux de dégradation des protéines par microscopie de Fluorescence Time-lapse en Culture cellulaire adhérente
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発生生物学
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JoVE Journal 発生生物学
Single-Cell Quantification of Protein Degradation Rates by Time-Lapse Fluorescence Microscopy in Adherent Cell Culture
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Unicellulaire Quantification du taux de dégradation des protéines par microscopie de Fluorescence Time-lapse en Culture cellulaire adhérente

DOI:
10.3791/56604-v

•

12:06 min

•

February 04, 2018

•

,
1UPSUTER, Institute of Bioengineering (IBI), School of Life Sciences,École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

章

  • 00:00標題
  • 01:42Cell seeding and pulse labeling of the SNAP-tag
  • 04:15Time-lapse microscopy
  • 05:23Image processing and analysis
  • 07:55結果
  • 10:13Conclusions

概要

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Ce protocole décrit une méthode pour déterminer la protéine demi-vies dans cellules adhérentes de vie unique, en utilisant des impulsions d’étiquetage et de Time-lapse imagerie de fluorescence des protéines de fusion SNAP-tag.

タグ

Protein DegradationSingle-cellTime-lapse Fluorescence MicroscopyAdherent Cell CultureSNAP-tagProtein Half-lifeFluorescence ImagingProtein TurnoverHeterogeneityEndogenous Protein TaggingOverexpressionDNA Repair EnzymeBenzylguanineFluorescent DyeExponential DecayEmbryonic Stem CellsMonolayerCell-cell InteractionsN-cadherin

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