ジャーナル
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MRNA Interactome Capture aus Pflanzenprotoplasten
JoVE Journal
生化学
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JoVE Journal 生化学
mRNA Interactome Capture from Plant Protoplasts

MRNA Interactome Capture aus Pflanzenprotoplasten

DOI:

12:29 min

July 28, 2017

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  • 00:05標題
  • 01:15In Vivo mRNA-protein Crosslinking by UV Irradiation
  • 02:38Protoplast Lysis Under Denaturing Conditions
  • 03:59mRNP Pull-down and Purification by Oligo-d(T)25 Beads
  • 08:14mRBP Concentration and Protein Assays
  • 10:04Results: Capture of UV-crosslinked mRNA-bound Proteins by Oligo-d(T)25 Beads
  • 11:53Conclusion

概要

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Hier präsentieren wir ein Interaktom-Capture-Protokoll, das auf Arabidopsis thaliana Blatt-Mesophyll-Protoplasten angewendet wird. Diese Methode beruht kritisch auf in vivo UV-Vernetzung und ermöglicht die Isolierung und Identifizierung von p-mRNA-bindenden Proteinen aus einer physiologischen Umgebung.

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