该视频显示程序生成诱导多能干细胞诱导慢病毒表达OCT4,SOX2,c – Myc和KLF4。
多能性,可以被诱导分化小鼠Oct4的病毒转导,SOX2,KLF4和c – Myc(Takahashi和Yamanaka,2006年; Wernig等人,2007年,大来,等,2007;。Maherali,等, 2007年)。我们已制定了一个重新编程的战略,这四个转录因子的表达强力霉素(DOX)诱导慢病毒载体(Brambrink等,2008)。使用这些诱导结构,我们可以推导出诱导多能干细胞(iPS)细胞从小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)。在这段视频中,我们展示了诱导慢病毒表达四个转录因子,并展示如何用这些病毒感染MEFs中,以产生iPS细胞的生成过程。通过使用诱导慢病毒,四个doxycyline此外培养基控制因素的表达。该系统比传统的逆转录病毒感染的优势是能够打开和关闭基因,使重新编程和基因表达的要求的动力学进行详细分析。
在这段视频中,我们演示了如何使用诱导,慢病毒系统产生GFP阳性,多能干IPS从MEFs Oct4-GFP/R26-M2rtTA和Nanog-GFP/R26-M2rtTA小鼠的细胞。此过程是一个有用的方法产生的iPS细胞,因为它允许在重组过程中的转基因表达的控制。虽然使用iPS细胞的生成病毒,阻碍了这些细胞在临床上使用,此过程确实让我们回答一些问题,强调尚未定义的重编程过程的主要生物。