삼차신경병증성 통증을 연구하기 위한 마우스의 원위 안와하부 신경(DIoN-CCI)의 만성 수축 손상
概要
생쥐에서 원위 안와하부 신경의 만성 수축 손상은 촉각 자극에 대한 반응으로 자발적 행동(얼굴 손질 활동 증가)과 통각 행동(von Frey 모발 자극에 대한 과민성)의 변화를 유발하며, 이는 지속적인 통증 및 이질증의 징후이며 삼차신경병증성 통증의 모델 역할을 합니다.
Abstract
동물 모델은 신경병증성 통증을 연구하는 데 필요한 도구로 남아 있습니다. 이 원고는 마우스의 삼차신경병증성 통증을 연구하기 위한 원위 안와하부 신경 만성 수축 손상(DIoN-CCI) 모델에 대해 설명합니다. 여기에는 만성 수축 손상을 수행하기 위한 외과적 절차와 진행 중인 통증 및 기계적 이질증의 징후인 자발적 및 유발적 행동의 변화를 평가하기 위한 수술 후 행동 검사가 포함됩니다. 이 방법과 행동 판독은 쥐의 안와하신경 만성 수축 손상(Infraorbital Nerve chronic constriction injury, IoN-CCI) 모델과 유사합니다. 그러나 IoN-CCI 모델을 마우스에 적용하기 위해서는 중요한 변경이 필요합니다. 첫째, 안와 내 접근법은 눈과 수염 패드 사이를 절개하는 보다 로스트랄 접근법으로 대체됩니다. 따라서 IoN은 안와강 외부에서 원위부로 결찰됩니다. 둘째, 생쥐의 운동 활동이 더 높기 때문에 쥐가 작은 우리에서 자유롭게 움직일 수 있도록 하는 것은 맞춤형으로 설계되고 제작된 구속 장치에 쥐를 넣는 것으로 대체됩니다. DIoN 결찰 후, 마우스는 자발적인 행동과 폰 프레이 모발 자극에 대한 반응에서 IoN-CCI 랫트와 유사한 변화, 즉 IoN 영역의 폰 프레이 모발 자극에 대한 지시성 얼굴 그루밍 증가 및 과민 반응을 보입니다.
Introduction
신경병증성 통증은 체성 감각 신경계의 손상으로 인해 발생하며, 이로 인해 감각 신호가 뇌에 비정상적으로 전달됩니다. 체성 감각 신경 손상이 항상 신경병증성 통증으로 이어지는 것은 아니지만, 임상적 신경병증의 중증도에 따라 유병률이 증가한다 1,2. 신경병증성 통증 환자는 자발적인 감각(작열감, 바늘로 찌르는 느낌, 전기 감각)과 비정상적으로 강렬하거나 오래 지속되는 통증, 무해하거나 유해한 자극과 같은 특정 증상을 경험하며, 이러한 증상은 만성화되고 기존 진통제 치료에 내성이 생기는 경향이 있다3. 신경병증성 통증 연구 분야에서 중요한 진전은 쥐의 좌골 신경 주위의 합자를 느슨하게 수축시키면 인간의 신경병증성 통증 상태와 유사한 행동이 발생한다는 발견에서 비롯된다4. 동물들은 열, 추위, 기계적 자극에 대한 역치가 감소하고 통각적 행동을 보인다. 인간과 설치류 사이의 통증 처리에 내재된 생물학적 차이에도 불구하고 동물 모델은 신경병증성 통증 발병의 기본 메커니즘을 연구하고 새로 제안된 치료 전략을 테스트하는 데 유용한 도구입니다.
감각 반사 기반 통증 검사 패러다임은 신경병증성 통증 모델에서 광범위하게 사용되어 왔지만, 지속적인 통증 또는 기타 자주 동반되는 장애(수면 장애, 우울증, 불안)를 측정하는 것은 삶의 질에 영향을 미치는 일반적인 임상 증상이라는 점을 고려할 때 충분한 관심을 받지 못했습니다 5,6,7,8. 쥐의 얼굴 그루밍 행동은 안와하 신경(IoN)의 만성 수축 손상(CCI) 후 자발적인 신경병증성 통증의 척도로 문서화되었습니다.9,10. 또한, 쥐는 IoN 영역의 가벼운 촉각 자극에 대해 과민 반응을 보이는데, 이는 기계적 동질증을 나타냅니다.
쥐에 비해 쥐는 크기가 더 크기 때문에 외과 부상에 더 적합합니다. 그러나 마우스는 비용 및 공간 효율성을 제공하고 더 적은 양의 약물을 필요로 합니다. 또한, 형질전환 기술의 출현은 마우스의 사용을 더욱 촉진시켰다11,12. 따라서 이 절차의 전반적인 목표는 쥐와 유사한 생쥐에서 외과적 안와 하부 신경 손상을 수행하여 삼차신경병증성 통증 연구를 위해 자발적이고 유발된 행동의 변화를 유도하는 것입니다.
Protocol
Representative Results
Discussion
랫트의 경우, 진동촉각 판별에서 복잡한 휘젓는 패턴을 제어하는 온전한 미세한 근육 조직의 중요성과 피부 안와하 신경 영역까지의 정중선 절개의 상대적 거리를 고려할 때, IoN에 대한 안와내 접근법이 바람직하다는 주장이 이전에 제기되어 왔다10. 다른 사람들은 털이 많은 피부, 꼬리에서 진동 패드까지 절개를 통한 원위 접근법이 여러 가지 이점이 ?…
開示
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
저자는 인정서가 없습니다.
Materials
| Chromic catgut (6-0) | Dynek | CG602D | ligatures |
| Cotton applicator | Pharmacy | ||
| Digital video camera | Sony | HDR-CX330E | |
| Dumont #5 forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | |
| Dumont forceps – Micro-blunted tips (#5/45) | Fine Science Tools | 11253-25 | |
| Duratears | Alcon | 0037-820 | ophthalmic ointment |
| Hooked ligation aid | Fine Science Tools | 18062-12 | |
| Ketalar | Pfizer | ketamine (50 mg/mL) | |
| Operation microscope | Kaps | SOM 62 | |
| Precision cotton swab | Qosina | 10225 | |
| Precision trimmer | Philips | HP6392/00 | |
| Rompun | Bayer | xylazine (2%) | |
| Scissors – blunt tips | Fine Science Tools | 14574-09 | |
| Semmes-Weinstein Von Frey Aesthesiometer kit | Stoelting | 58011 | |
| Vicryl Rapide | Ethicon | MPVR489H | sutures |
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