Iniezioni intracerebroventricolari a mano libera nei topi

La somministrazione di agenti sperimentali, come i farmaci¹, i virus² o le cellule³, al cervello è spesso necessaria per la ricerca neuroendocrina. Se l’agente non attraversa facilmente la barriera emato-encefalica o l’obiettivo sperimentale è quello di testare in modo specifico gli effetti centrali dell’agente, è importante disporre di un metodo affidabile per somministrare iniezioni nel cervello. Inoltre, l’iniezione nello spazio intracerebroventricolare (ICV) offre l’opportunità di distribuire ampiamente l’agente nel cervello e fornisce un’ampia area bersaglio, aumentando così la probabilità di successo dell’iniezione².

Un metodo comune per effettuare iniezioni di ICV prevede il posizionamento di una cannula permanente a permanenza. In questo approccio, è necessario un telaio stereotassico per posizionare la cannula disponibile in commercio o su misura, poiché la cannula viene incollata o cementata in posizione. Spesso, al momento del recupero, viene somministrata una dose sovrafisiologica di angiotensina II attraverso la cannula e, se si osserva immediatamente il comportamento del bere, la cannula viene considerata posizionata correttamente⁴. Questo approccio presenta molti vantaggi, tra cui la possibilità di eseguire un’infusione a lungo termine e la possibilità di iniettare più volte lo stesso animale; inoltre, se viene impiegata l’angiotensina II, il corretto posizionamento può essere confermato prima della somministrazione di composti sperimentali. Tuttavia, ci sono alcune limitazioni al posizionamento di una cannula permanente, tra cui la necessità di attrezzature costose (telaio stereotassico), la possibilità di danni alla cannula dopo il posizionamento (ad esempio, i topi possono masticare la cannula di un compagno di gabbia) e la possibilità di infezioni intorno alla cannula permanente. Le iniezioni singole di ICV possono essere effettuate con l’uso di un frame^{stereotassico 3}, che, sebbene efficace, richiede una sostanziale esposizione all’anestesia e, quindi, può oscurare alcuni effetti fisiologici e comportamentali acuti del trattamento. Inoltre, il posizionamento dei topi in un telaio stereotassico richiede una formazione sostanziale per ottenere un posizionamento stabile e prevenire la rottura dei condotti uditivi.

Qui viene descritto un metodo consolidato per effettuare iniezioni a mano libera nei topi. Questo metodo si basa sulle precedenti relazioni ^5,6. I vantaggi di questa tecnica sono che è semplice, rapida e non richiede attrezzature specializzate come un telaio stereotassico. Come descritto di seguito, questa procedura prevede la manipolazione di una siringa di vetro rispetto ai punti di riferimento sulla testa del topo per effettuare le iniezioni, che possono essere eseguite rapidamente e, quindi, richiedono solo pochi minuti di anestesia gassosa il giorno dell’esperimento.