概要

نهج جراحي منقح للحث على هيدروكال الدم الانففاوتيك في خنزير غينيا

Published: June 04, 2020
doi:

概要

هذه المادة يوضح نهج خارج الدورة لطمس الكيس اللافاوفي الخنزير غينيا وإصابة القناة اللافاوفية مع اختيار غرامة من أجل حث الهيدروبس اللافاوتيكي التجريبية.

Abstract

الهيدروكالية اللاففاوية هي توسيع لوسائل الإعلام السكالا التي ترتبط في معظم الأحيان بمرض مينيير ، على الرغم من أن الآلية (الفيزيولوجيا) المرضية لا تزال غير واضحة. من أجل دراسة كافية لخصائص الهيدروكالية اللافاوفية ، مثل أصول فقدان السمع منخفض التردد ، هناك حاجة إلى نموذج موثوق به. خنزير غينيا هو نموذج جيد لأنه يسمع في المناطق منخفضة التردد التي تتأثر بشكل افتراضي بالمياه المائية اللافاوفية. وقد أظهرت الأبحاث السابقة أن الهيدروكالية اللافاوفية يمكن أن يتم حثها جراحيًا عن طريق النهج اللاطرادية أو خارج الدورة التي تنطوي على الحفر على القناة اللافاوفية والحويصلات. ومع ذلك ، ما إذا كان من الممكن إنشاء نموذج هيدروبس الانففاوتيك باستخدام نهج خارج الدورة التي تجنبت الحفر الخطير على القناة اللافاوفية والكيس غير معروف. وكان الهدف من هذه الدراسة لإظهار نهج خارج الدورة المنقحة للحث على الهيدروبس اللافاوتيكي التجريبي ة في 30 يوما بعد العملية عن طريق طمس الكيس الليمفاوي ة وإصابة القناة اللمفاوية اللافاوتيكية مع اختيار غرامة. ويتألف حجم العينة من سبعة خنازير غينيا. وأجريت قياسات وظيفية للسمع وحصدت العظام الزمنية في وقت لاحق للتحليل النسيجي. وكان هذا النهج معدل نجاح 86٪ في تحقيق هيدروبس الخلايا الليمفاوية. كان خطر تسرب السائل النخاعي ضئيلاً. ولم تحدث في العينة أي وفيات أو إصابات في ما بين العمليات الجراحية. طريقة المقدمة يوضح وسيلة آمنة وموثوق بها للحث على الهيدروبس اللافاوفي في نقطة زمنية سريعة نسبيا من 30 يوما. الآثار السريرية هي أن الطريقة المقدمة توفر نموذجا موثوقا لمواصلة استكشاف أصول فقدان السمع منخفضة التردد التي يمكن أن تكون مرتبطة هيدروبسيا ً داوفيلاتيك.

Introduction

هيدروبسة الاندوسالفية الاندافية هو توسيع وسائل الإعلام سكالا. يمكن قياس وجود هيدروبس الخلايا الليمفاوية اللاففاوتيكية باستخدام المنطقة المقطعية للوسائط سكالا. ويعتقد أن الهيدروكالية السريرية يمكن أن تكون مرتبطة مع انخفاض التردد الحسية فقدان السمع، مثل تلك التي ينظر إليها في مرض مينيير. ولكن أصل (أو أصل) فقدان السمع لا يزال غير واضح. لدراسة أصول فقدان السمع منخفض التردد المرتبط بهيدروساخ الغدد الليمفاوية الداوفية دراسة كافية، هناك حاجة إلى نموذج موثوق به.

في عام 1965، وصفت كيمورا وشوكنيشت كيفية حث الهيدروكات اللمفاوية في خنزير غينيا باستخدام نهج intradural1. وشملت تقنيتهم استخدام نهج الفوسا القحفي الخلفي للوصول إلى الفوسا الأوبركولوم وsubarcuate. الخطوات التي تنطوي على قطع دورا، تراجع المخيخ مع محلول رينجر غارقة وسادة القطن، والحفر عبر القناة اللافاوفية والجزء المتوسط من الكيس الليمفاوي ة. ثم وضع شمع العظام في operculum لفصل القناة اللمفاوية الانفية من كيس اللاففاوتيك المنفطي المنفأ. تم إغلاق عيب القحفي ة عن طريق وضع مسحوق الجيلاتين القابل للامتصاص (على سبيل المثال، جيلفوم) وحصاد العضلات المفرطة. تم العثور باستمرار على الأدلة النسيجية للهيدروكالية اللافاوفية في أيام ما بعد الجراحة 1 و 3 و 7 و 14 و 21 و 30 ، مما يدل على أن النهج اللاطرادي كان طريقة موثوقة للحث على هيدروبس ة اللمفاوية اللافاوفية المؤكدة علمًا النسيجيًا. باستخدام نفس النهج التفكيكي مثل كيمورا وشوكنيخت ، ولكن مع نقاط زمنية مختلفة ، أكد الملح وDeMott أن وسائل الإعلام سكالا في المنعطف الثاني من القوقعة تم توسيعها بشكل كبير في اليوم 4 وما بعده2. في حين أن المراضة الفعلية للتحريض على تسرب السائل النخاعي (CSF) باستخدام نهج كيمورا وشوكنيخت اللارادتوري لم يتم الإبلاغ عنها في الدراسة الأصلية ، فإن وجود تسرب CSF يمكن أن يزيد من خطر الإصابة بالتهاب السحايا. وقد اقترح أن فقدان CSF يمكن أن يؤدي إلى تدفق perilymph، مما أدى إلى التوسع المؤقت في وقت واحد من حجم اللمفاوية في خنزير غينيا3. نهج خارج الدورة لتحريض الهيدروكال ية اللافاوفية سيكون خيارا أكثر أمانا.

في عام 1989، وصف أندروز وبومر نهجين جراحيين خارج الدورة للوصول إلى الكيس والقناة اللمفاوية، إما عن طريق نهج الفوسا القحفي الأوسط أو نهج الفوسا القحفي الخلفي، لطمسالكيساللمفاوي 4 . وصفوا إزالة الأوبركولوم مع حفر الماس، ومن ثم إما الحفر قبالة الجزء الوسيط من الكيس الليمفاوي ة أو باستخدام اختيار غرامة لتعطيل الكيس والقناة اللافاوفية. في عام 1993، وصف لي، رايت، ومايرهوف نهجا مماثلا، والتي شملت الحفر من خلال الكيس الليمفاوي والقناة، ولكن اختلف في أنها أيضا عرقلت في وقت واحد القناة القوقعة5. أظهروا وجود هيدروكات اللاففاولوجية، كما تم تقييمها عن طريق علم الأنسجة، في أربعة أسابيع بعد طمس الكيس اللمفاوي اللاإرفي وعرقلة قناة القوقعة. وكان ميجيريان وآخرون أول من نشر مقالا فيديو يدل على طمس خارج الدورة من الكيس والقناة التي شملت الحفر مباشرة على الجزء المتوسط من operculum للدخول في كيس اللاففاوتيك والقناة6. أظهروا أدلة النسيجية من الهيدروكالتيك اللاففاولي في خنزير غينيا ضحى في 28 أسبوعا بعد الجراحة، فضلا عن فقدان السمع في المنطقة 16 كيلو هرتز6. ما إذا كان من الممكن للحث على الهيدروبس اللافاوفي المؤكد بشكل النسيجي وفقدان السمع منخفض التردد في وقت مبكر باستخدام النهج خارج الدورة غير معروف.

الهدف العام لهذا التقرير هو إظهار نهج خارج الدورة للحث على الهيدروبس اللمفاوي ة اللافاوفية التجريبية في 30 يوما بعد الجراحة عن طريق طمس الكيس اللمفاوي اللافي وإصابة القناة اللمفاوية اللافاوية مع اختيار غرامة. الأساس المنطقي وراء استخدام هذه التقنية هو ميزة تجنب الحاجة إلى الحفر على العظام الصدغية petrous ، وبالتالي إزالة خطر إصابة الدورة عن طريق الخطأ والتسبب في تسرب CSF ، مما يقلل من إمكانية إصابة القناة نصف الدائرية الخلفية ، والحد من خطر إصابة الجيوب الأنفية السينية.

Protocol

وقد أجريت جميع الإجراءات المذكورة أدناه مباشرة في قسم البروتوكول على النحو المبين في البروتوكولات التي وافقت عليها جامعة واشنطن في لجنة سانت لويس المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها. 1. تحريض مخدر ورصد العلامات الحيوية ملاحظة: استخدمت هذه الدراسة ?…

Representative Results

استخدمت الطريقة المعروضة نهجًا خارج الدورة لطمس الكيس اللمفاوي اللافطي وإصابة القناة اللمفاوية اللاففاوتيكية بانتقاء ناعم في سبعة خنازير غينيا تتكون من ذكرين وخمس إناث. كان متوسط مدة الجراحة 2 ساعة من الشق إلى الإغلاق. وتراوح إجمالي وقت الحفر بين 5-10 دقائق. كانت هناك حاج?…

Discussion

وكان الأسلوب خارج الدورة المقدمة معدل نجاح 86٪ في تحقيق الهيدروبس اللافاوفي المؤكد بشكل النسيجي وفقدان السمع منخفضة التردد. حققت الطريقة بشكل موثوق الأدلة النسيجية من الهيدروكالتيك اللافي ة الاندانية بحلول يوم ما بعد الجراحة 30 ، بما يتفق مع الدراسات السابقة التي استخدمت نهج ًا intradural<sup clas…

開示

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

نشكر شانون م. ليفلر على المساعدة في الأرقام وجدول المواد. تم دعم الأبحاث الواردة في هذا المنشور من قبل المعهد الوطني للصمم واضطرابات الاتصال الأخرى داخل المعاهد الوطنية للصحة ، من خلال منحة تدريب “تطوير الطبيب / الباحثين في ENT الأكاديمية” ، رقم الجائزة T32DC000022 (C.V.V.) وR01 DC014997 (J.T.L). المحتوى هو مسؤولية المؤلفين فقط ولا يمثل بالضرورة وجهات النظر الرسمية للمعاهد الوطنية للصحة.

Materials

12 mL syringe Henke-Sass Wolf 5100-X00V0
1 mL and 3 mL syringe BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-87 15859152
27.5 butterfly gauge needle Terumo Surflo Winged Infusion Set, Terumo Corporation, Japan) (Ordered from McKesson) 448407
4-0 suture McKesson 1034507
4×4 gauze sponges Dukal (Ordered form McKesson) 374454
60mL syringe Fisher Sci 22-031-375
Anspach otologic drill Anspach SC2100
atipamezole Zoetis 107204-6
autoclave Fisher sci 15-103-0508
autoclave bags McKesson 524881
bayonet separator Olympus AL 130564
bupivicaine auro Medics Pharma 555150-169-10
clear sterile drape 3M 1020
cotton balls Fisherbrand (ordered from Fisher Sci) 22-456-885
cotton swabs McKesson 508716
diamond burrs #3, #2, #1, and #0.5 mm Anspach QD8-3SD; QD8-2SD; QD8-1SD; QD8-05SD
diaper pad McKesson 945330
disposable 15 blade Swann-Morton 0305
enrofloxacin Hospira 0409-4888-01
epinephrine McKesson 63739-0456
eye ointment Dechra Vet Products 17033-211-38
Freer elevator Grace Medical 215100FX
gelfoam Pfizer (Ordered from McKesson) 82830
hair trimmers Oster Power Pro Cordless (ordered from Amazon) 078400-020-000
iodine scrub Purdue Pharma (ordered from mcKesson) 521243
iris scissors Olympus CL-542114
ketamine Henry Schein Animal Health 55853
lactated ringers B. Braun Medical (ordered from McKesson) 186662
lancet knife by Rosen Grace Medical 151100FX referred to as curette in the text
lubricant Milex (ordered from Cooper Surgical) MX5030
masking tape 3M (ordered from fisher sci 19047259
metal rectangle basin Amazon B07NQDBC6T
needle holder Olympus CR 213015-ENT
needles: 27 gage, 18 gauge BD Precision(Ordered from Fischer Sci) 14-826-48 14-826-5D
neonatal warming isollete Air Borne Life Support Systems 731-1800
operating microscope Carl Zeiss OPMI pico
oxygen tank AirGas OX USP200
pulse ox CapnoTrue (Ordered from Medacx) M-3090112001
rectal probe with heating blanket Harvard Apparatus probe: PY2 50-7217 Heating Blanket: PY2 50-7214
red body holder Lichtenhan Lab N/A In-house product
right angle Olympus BV-230337
rosen needle Olympus AM-130566 customized, it is the instrument I use to tear the sac
rubber tubing for O2 administration Fisher Sci 14-171-104
saran wrap Fisher Sci NC9617977
stereotactic head holder WUSTL Instrument Machine Shop N/A In-house product
sterile drapes Cardinal Health 7553
suction tube by Baron Grace Medical 034903FX 034905FX #3 and #5 Suction
tissue forceps adson brown Grace Medical 325112FX
Weitlander retractor Olympus Grace Medical BL200011 100313FX
xylazine Akorn 59399-110-20

参考文献

  1. Kimura, R. S., Schuknecht, H. F. Membranous Hydrops in the Inner Ear of the Guinea Pig after Obliteration of the Endolymphatic Sac. Pract oto-rhino-laryng. 27, 343-354 (1965).
  2. Salt, A. N., DeMott, J. Time course of endolymph volume increase in experimental hydrops measured in vivo with an ionic volume marker. Hearing Research. 74 (1-2), 165-172 (1994).
  3. Walsted, A., Garbarsch, C., Michaels, L. Effect of craniotomy and cerebrospinal fluid loss on the inner ear. An experimental study. Acta Oto-Laryngologica. 114 (6), 626-631 (1994).
  4. Andrews, J. C., Bohmer, A. The surgical approach to the endolymphatic sac and the cochlear aqueduct in the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 10 (1), 61-66 (1989).
  5. Lee, J. R., Wright, C. G., Meyerhoff, W. L. Modified occipital approach to the endolymphatic sac and cochlear aqueduct of the guinea pig. American Journal of Otolaryngology. 14 (2), 165-169 (1993).
  6. Megerian, C. A., et al. Surgical induction of endolymphatic hydrops by obliteration of the endolymphatic duct. Journal of Visualized Experiments. (35), (2010).
  7. Lichtenhan, J. T., Cooper, N. P., Guinan, J. J. A new auditory threshold estimation technique for low frequencies: proof of concept. Ear and Hearing. 34 (1), 42-51 (2013).
  8. Lichtenhan, J. T., Hartsock, J., Dornhoffer, J. R., Donovan, K. M., Salt, A. N. Drug delivery into the cochlear apex: Improved control to sequentially affect finely spaced regions along the entire length of the cochlear spiral. Journal of Neuroscience Methods. 273, 201-209 (2016).
  9. Lichtenhan, J. T., Hartsock, J. J., Gill, R. M., Guinan, J. J., Salt, A. N. The auditory nerve overlapped waveform (ANOW) originates in the cochlear apex. Journal of the Association for Research in Otolaryngology. 15 (3), 395-411 (2014).
  10. Lichtenhan, J. T., Hirose, K., Buchman, C. A., Duncan, R. K., Salt, A. N. Direct administration of 2-Hydroxypropyl-Beta-Cyclodextrin into guinea pig cochleae: Effects on physiological and histological measurements. PloS One. 12 (4), e0175236 (2017).
  11. Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis. Nature Methods. 9 (7), 671-675 (2012).

Play Video

記事を引用
Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, C. A., Lichtenhan, J. T. A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig. J. Vis. Exp. (160), e60597, doi:10.3791/60597 (2020).

View Video