-Alkolsüz Steatohepatitis (NASH) çözünürlük değerlendirmek farelerde hayatta kalınabilir karaciğer biyopsisi yordam eklenmesi
概要
Klinik ayarları’nda, karaciğer biyopsisi alkolsüz steatohepatitis (yağlanma, inflamasyon, balon Hepatosit ve fibrozis) aşamaları değerlendirmek için kullanılır. Burada, biz hayatta kalınabilir karaciğer biyopsisi histolojik analizler için klinik ile uyumlu bir şekilde daha fazla terapötik ajanlar değerlendirilmesi etkinleştirmek için kullanılabilecek farelerde göstermektedir.
Abstract
Klinik tedaviler alkolsüz steatohepatitis (NASH) tedavisi için değerlendirilmesi temel ve çalışma karaciğer biyopsi ve hastalık bitiş noktaları, sık sık geliştirilmiş her tedavi kol bir yüzdesi olarak yansıyan düzelme değerlendirilmesi dahil, kötüleşti veya değişmeden kaldı. Geleneksel preklinik kemirgen çalışmaları için sözde NASH tedaviler genellikle karaciğer hastalığı/NASH mevcut tedavi grupları üzerinde kolayca ölçülebilir bitiş noktaları gibi rastgele yerine terapötik müdahale başında düzeyini bilmeden tarafından sınırlıdır vücut ağırlığı, metabolik durum veya benzer. Burada, bir diyet kaynaklı NASH fare modeli, temel karaciğer hastalığı fibrozis sergi değil fare dışlamak için ve hayvan tedavi grupları arasında benzer fibrozis ile eşit olarak dağıtmak için değerlendirilmesi için karaciğer biyopsisi teknikte tarif. Bu düzeyleri sonra terminal, sonrası müdahale düzeyleri içinde vivo farmakolojik etkileri daha doğru bir anlayış için karşılaştırılabilir ve böylece daha doğru bir şekilde yansıtmak klinik deneme tasarım stratejileri. Fare düzgün anestezi ve steril koşullar kullanarak ameliyat için hazır. Üst karın küçük bir kesi yapılır ve karaciğer sol yan lob maruz kalmaktadır. Bir kama karaciğer ameliyatla ve absorbe jelatin benzer büyüklükte bir parçası herhangi bir kanama durdurmak için onun yerine konur. Fare ameliyatla sütüre ve zımbalanmış kapalı ve normale döndü 1 gün içinde iyileşir. Tüm süreç fare başına 5-10 dakika sürer. Burada belgili tanımlık yarar, bu yordamın glukagon benzeri peptid-1 (GLP-1) reseptör agonist liraglutide NASH bitiş noktaları fareler üzerinde etkisini değerlendirmek için ön çalışma biyopsi yararlanarak örnekler.
Introduction
Alkolsüz steatohepatitis (NASH) Progresif bir karaciğer hastalığı ve obezite ve tip 2 Diyabet ile dernek nedeniyle giderek yaygın hale geliyor bu alkolsüz yağlı karaciğer hastalığı (NAFLD), daha ağır bir tür olduğunu. NAFLD/NASH ya da onaylı biyolojik kolayca hastalık ilerleme değerlendirmek için onaylanmış hiçbir tedaviler vardır. NASH tanısı histolojik olarak inflamasyon değerlendirme tarafından karaciğer lipid (yağlanma), balon Hepatosit ve fibrozis1,2,3,4fazla. Klinik çalışmalarda, bu bitiş noktası biyopsi ile ve ikinci karaciğer biyopsisi belirli bir tedavi süre sonra toplanan bir karaciğer örnek çalışmada önce değerlendirilir. Böylece, test aracısı etkinliğini karaciğer patolojisi olan bireylerde değişiklik ile daha önce tespit/sayısal değerlendirilir (yani, biyopsi kanıtlanmış) tedavi gruplarına randomize NASH. Bu aynı histolojik bitiş noktaları genellikle potansiyel NASH therapeutics preklinik çalışmaları, ancak yalnızca terminal doku euthanized fareler ve böylece temel ve bir yetersizlik etkinlik derecesini bir anlayış olmadan değerlendirirken kemirgen modellerinde kullanılır temel hastalık durumu tedavi grupları arasındaki farkları için kontrol etmek için.
Yetişkin NAFLD ile % 25’i NASH için yükseltilmiş serum aminotransferaz düzeyleri temel alınarak tahmin ediliyor olsa da, NASH histolojik kanıt4dışında onaylamak için alternatif yok kesin yöntem vardır. Radyolojik yöntemleri (ultrason, bilgisayarlı tomografi ve manyetik rezonans görüntüleme) gibi noninvaziv yöntemler hepatik yağlanma algılamak için geliştirilmiştir, ancak bu yöntemleri NASH tanılayamaz veya fibrozis sahne belirlemek. Geçici elastography karaciğer Sertlik ölçme için umut verici bir non-invaziv modality sunmaktadır. Fibrozis aşamaları ayırt doğru olarak gösterilmiştir. Ancak, daha yüksek vücut kitle indeksi (VKİ) ve yağ dokusu ile doğruluğu azalır. 5 bu obez olarak NASH hastaların çoğu nedeniyle problemlidir. Bu yaklaşımlar klinik önemi, Bu modalities hiçbiri preklinik çalışmalarda kullanılmaktadır.
Bu sorunu gidermek için Dr Jonathan Roth araştırma grubu bir karaciğer biyopsisi yordam NASH6,7,8Amylin NASH (AMLN) fare modeli uygulamak için ilk idi. Onlar akıllı metabolik hastalık ile korelasyon NASH hastalığının derecesi ile biyopsi geçerliliği nitelendirdi. Karaciğer biyopsisi yordam NASH, AMLN modeli ve yararını tedavi edici bir ortamda, özellikle liraglutide etkinliğini değerlendirmek için burada biz ayrıntılı olarak tarif.
Protocol
Representative Results
Discussion
Burada fare karaciğer biyopsisi yordamı ilk Clapper vd.10tarafından açıklanan ve yararını NASH, önceki raporlar6,9‘ a benzer, bir fare modeli reaksiyonların ayrıntılı olarak açıklanmaktadır. Karaciğer biyopsisi yordamı NASH fenotip öncesi ve tedavi sonrası, tedavi klinik gerçekleştirilen için benzer bir şekilde değerlendirmek için değerli bir araçtır. Biyopsi için doğrudan karşılaştırma için her konu, yani aynı fare-ebilmek var olmak kullanılmış için her iki saat Puan sağlar. Biz de çevirim potansiyelini göstermek. Bizim çalışmada biz için geliştirilmiş NAS % 66 Yanıtlayıcı oranı gözlenen ise biyopsi kanıtlanmış NASH bireylerde bir klinik deneme olarak, NAS, bir % 39 yanıt oranı (hasta iyileşme ile) liraglutide elde edildi. Ayrıca, hastaların % %26 9, % 14 ve % 36 plasebo kolundan karşı sırasıyla11kötüleşen geliştirilmiş fibrozis puanı vardı. Bizim çalışmada, liraglutide tedavi ile % 17 iyileşme oranı görülmektedir. Bu karşılaştırmalar temel karaciğer biyopsisi gücünü vurgulamak ve potansiyel translasyonel anlayış, en az tedavi bu sınıfı için onaylayın.
Karaciğer dokusunun yeterince büyük bir parça düzgün histolojik özellikleri analiz etmek için biyopsi işlemi sırasında hasat için kritik, ama aynı zamanda değil de bir parça Karaciğer karaciğer fonksiyonu uzlaşmaya büyük değil. Biz sıfır mortalite ameliyat gözlenen ve hayvanların normal yeme davranışının yeniden başlatılması ile 1 gün içinde tam olarak kurtarılan çıktı. Böylece, biyopsi ve inisiyasyon müdahale çalışmanın arasında zaman hayvan kurtarma tarafından sınırlı değil ama büyük olasılıkla tarafından örnek işleme, analiz ve sonraki randomizasyon için geçen süre.
Bize tamamen hepatik fibrozis AMLN NASH-inducing diyet bir sonucu olarak bir dereceye geliştirmek değil fare hariç tutmak için izin bizim çalışma, değişkenliği azaltmak müdahale yardımcı önce karaciğer biyopsisi yordamı fibrozis onay yöntemi olarak kullanmak. Ayrıca, sadece bir terminal karaciğer örnek ve NASH puanı olan karşı olası NASH iyileştirilmesi müdahaleler etkisini daha iyi anlamak için bizim yeteneği gelişmiş. Yeni non-invaziv teknikler daha da araştırdı ve yaygın olarak kabul, karaciğer biyopsisi tek NASH belirlemek için kanıtlanmış kadar.
開示
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Yazarlar minnetle Sally Lee ve Holly Koelkebeck yardım doku işleme ve immünhistokimya uzmanlık için kabul. Yazarlar ayrıca Donna Goldsteen ve laboratuvar hayvan kaynakları personel (MedImmune, Gaithersburg, MD) ile ilgili teknik prosedürler ve hayvan yetiştirme ve bakım onların yardım için teşekkür ederiz.
Materials
| Isoflurane | Henry Schein | 29405 | |
| 5-0 suture | Ethicon | J834G | |
| 7mm Wound Clips | Reflex | 203-1000 | |
| Absorbable gelatin sponge (GelFoam) | Pfizer | 09-0353-01 | Compressed, Any Size |
| Alcohol Prep Pad | VWR | 75856-902 | |
| Animal Clippers | Oster | 78005010002 | Size 40 Blade |
| Artificial Tears | Henry Schein | 048272 | Tube |
| Buprenorphine (Buprenex) | Reckitt Benckiser | NDC 12496-0757-5 | |
| Iodine Prep Pads | Nice Pak Products | C12400 | |
| Sterile Drapes | Stoelting | 50981 | |
| Surgical Gloves | Medline | 54720 |
参考文献
- Brunt, E. M., et al. Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) activity score and the histopathologic diagnosis in NAFLD: distinct clinicopathologic meanings. Hepatology. 53 (3), 810-820 (2011).
- Brunt, E. M. Pathology of nonalcoholic fatty liver disease. Nature Reviews Gastroenterology and Hepatology. 7 (4), 195-203 (2010).
- Kleiner, D. E., et al. Design and validation of a histological scoring system for nonalcoholic fatty liver disease. Hepatology. 41 (6), 1313-1321 (2005).
- Diehl, A. M., Cause Day, C. Pathogenesis, and Treatment of Nonalcoholic Steatohepatitis. New England Journal of Medicine. 377 (21), 2063-2072 (2017).
- Golabi, P., et al. Current complications and challenges in nonalcoholic steatohepatitis screening and diagnosis. Expert Reviews of Gastroenterology and Hepatology. 10 (1), 63-71 (2016).
- Roth, N. C., et al. Prediction of histologic alcoholic hepatitis based on clinical presentation limits the need for liver biopsy. Hepatology Communications. 1 (10), 1070-1084 (2017).
- Kristiansen, M. N., et al. Obese diet-induced mouse models of nonalcoholic steatohepatitis-tracking disease by liver biopsy. World Journal of Hepatology. 8 (16), 673-684 (2016).
- Trevaskis, J. L., et al. Glucagon-like peptide-1 receptor agonism improves metabolic, biochemical, and histopathological indices of nonalcoholic steatohepatitis in mice. American Journal of Physiology Gastrointestinal and Liver Physiology. 302 (8), G762-G772 (2012).
- Tolbol, K. S., et al. Metabolic and hepatic effects of liraglutide, obeticholic acid and elafibranor in diet-induced obese mouse models of biopsy-confirmed nonalcoholic steatohepatitis. World Journal of Gastroenterology. 24 (2), 179-194 (2018).
- Clapper, J. R., et al. Diet-induced mouse model of fatty liver disease and nonalcoholic steatohepatitis reflecting clinical disease progression and methods of assessment. American Journal of Physiology Gastrointestinal and Liver Physiology. 305 (7), G483-G495 (2013).
- Armstrong, M. J., et al. Liraglutide safety and efficacy in patients with non-alcoholic steatohepatitis (LEAN): a multicentre, double-blind, randomised, placebo-controlled phase 2 study. Lancet. 387 (10019), 679-690 (2016).
