概要

쥐 모델에 수정 사용 하 여 중앙 피로의 여러 플랫폼 메서드

Published: August 14, 2018
doi:

概要

여기, 선물이 수정 사용 하 여 중앙 피로의 쥐 모델을 소개 하는 프로토콜 여러 플랫폼 메서드 (MMPM).

Abstract

이 문서에서는, 우리는 수정 사용 하 여 중앙 피로의 쥐 모델을 도입 여러 플랫폼 메서드 (MMPM). 여러 플랫폼 상자는 물 탱크 바닥에 좁은 플랫폼으로 설계 되었습니다. 모델 쥐 탱크에 투입 되었고 빈 제어 그룹 대비 설정 연속 된 21 일 동안 하루 14 h (18시-8:00)에 대 한 플랫폼에 서 서. 모델링의 끝에, 모델 그룹에서 쥐 명백한 피로 모습을 보여주었다. 모델을 평가 하기 위해 여러 가지 행동 테스트를 수행 했습니다, 오픈 필드를 포함 하 여 테스트 (자주)는 높은 플러스 미로 (EPM) 테스트, 그리고 철저 한 수영 (ES) 테스트. 결과 그 불안, 공간 인식 장애, 불 쌍 한 근육 성능과 거부 자발적인 활동 모델 쥐에 중앙 피로의 진단을 확인 보여주었다. 중앙 신경 전달 물질의 변화는 또한 결과 확인합니다. 결론적으로, 모델은 성공적으로 중앙 피로, 시뮬레이션 및 모델 미래 연구는 질병의 병 적인 메커니즘을 공개 도움이 될 수 있습니다.

Introduction

피로1인간의 건강 위협 하는 주요 요인 중 하나 이다. 지난 수십 년간에서 다양 한 연구는 피로 주변 실행 하지만 중앙 기반, 그리고 항상 감정과 인지 장애와 함께 입증 해야 합니다. 이탈리아 생리학자 A. Mosso 먼저 단어 중앙 피로2제안. 그것은 제한 된 자발적인 활동 및 중앙 신경 조직 (CNS)3의 충 동 장애 때문 인지 장애로 일반적으로 정의 된다. 주변 근육 피로와 비교해, 중앙 피로 CNS, 필연적인 감정/행동 장애, 우울증, 불안, 인지 장애, 그리고 기억 상실을 포함 하 여에 있는 변화를 강조 합니다. 한 연구는 많은 요인은 과도 한 신체 활동 및 정신적인 스트레스는 매우 필수적인4중앙 피로 일으킬 수 보여줍니다. 병 인에 관해서는 트립토판 kynurenine 통로 가설5 같은 이론 설명; 특정 경로에 변화 그러나, 더 깊이 있는 연구는 여전히 중앙 피로의 중앙 주변 상관 관계를 공개 해야 합니다.

중앙 피로의 기본 메커니즘은 아직 불분명로 효과적인 동물 모델 추가 연구에 대 한 확실히 중요 하다. 기존 피로 모델은 주로 러닝6 과 체중 로드 수영7, 정신적 요인에 작은 우려와 같은 과도 한 운동에 의해 유발 됩니다. 더 나은 중앙 피로의 개발 시뮬레이션, 우리의 그룹은 MMPM 쥐 모델 개발. 모델링 하는 동안 쥐의 수 면 시간 부분을 포함 하 여 긴 시간에 대 한 다중 플랫폼 상자에서 좁은 플랫폼에 서 서 남아 있습니다. 과도 한 운동 모델에서 다른 MMPM 모델 중앙 피로의 복잡 한 병 인을 고려 하 여 정신적인 요인으로 부분 수 면 부족을 사용합니다.

모델 평가 대 한 우리는 불안 분위기와 자발적인 활동을 결정 하는 자주 및 EPM 테스트를 사용 합니다. ES 시험 주변 근육 성능을 측정 하기 위해 수행 됩니다. 또한, 우리 쥐의 뇌를가지고 고 도파민 (DA) 감지 / 중앙 신경 전달 물질의 차이 관찰 하 두 hypothalamuses에서 세로토닌 (5-HT) 콘텐츠.

프로토콜 아래는 모델 중앙 피로 반복된 신체 활동 및 수 면, 인간의 인생에서 일반적인 상태를 흉내 낸의 부족에 의해 유도 된 설계 되었습니다. 그러나, 모델 기간을 조정 하 여 그것은 사용할 수 있습니다 다른 많은 분야에서 처럼 수 면 관측 및 스트레스 연구에서. 미래에 연구, 우리이 모델 더 CNS 변화와 중앙 피로의 pathogenesis 메커니즘을 주변 시스템과 그들의 연결을 발견 도움이 될 것입니다 바랍니다.

Protocol

모든 동물 지침에 따라 중국 입법에 윤리적인 사용 및 실험실 동물 들에 의해 유지 되었다. 1. 사전 모델링 준비 실험실 준비 실험 전에 적어도 30 분 동안 UV 램프를 실행 합니다. 실험실 온도 25 ± 3 ° C, 상대 습도 30%의 주위에 통제 한다. 6:00 빛 연구소에 돌아서 18:00 12 h/12 h 명암 주기 설정 하에 그것을 해제. ?…

Representative Results

우리는 MMPM를 사용 하 여 중앙 피로의 쥐 모델을 설명 합니다. 24 Wistar 쥐 임의로 제어 그룹 및 각 그룹에 12 쥐 모델 그룹으로 나누어집니다. 모델 장치는 물 탱크 하단 (그림 1)에 좁은 플랫폼으로 설계 되었습니다. 모델 쥐 21 일 (그림 2)에 대 한 부분적인 수 면 시간을 포함 하 여 하루 14 h에 대 한 플랫폼에 서 서. <p class="jove_co…

Discussion

MMPM 원래 수 면 박탈9에 대 한 설계 되었습니다. 쥐 플랫폼 바닥에 고정 물 탱크에 착수 한다. 물의 본능적 인 두려움에 의해 구동, 쥐 플랫폼에 서 서 유지 하 고 아니 수 면 발생 합니다. 연구는 수 면 부족의 다른 시간 쥐 행동 및 인식 장애10, 부정적인 감정을11및 중앙 피로 포함 하 여, 분위기에 다양 한 변화를 이끌어 보여줍니다. 일부 연구 ?…

開示

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

이 작품은 베이징의 자연 과학 재단 (No.7162124), 그리고 중국 의학의 베이징 대학에 대 한 티베트 ao 재단에 의해 지원 되었다.

Materials

multiple platform sleep deprivation water tank Customization,it is provided by the neuroimmunological laboratory of Beijing University of Chinese Medicine 110cm x 60cm x 40cm. There are 15 plastic small platforms at the bottom. The small platform is 6.5cm in diameter and 8cm high
Wistar rats Beijing Weitong Lihua Experimental Animal Technology Company license number SYXK (Beijing) 2016-0011 Use 32 Wistar healthy male rats ,8 week old (200-210 g)
Agilent 1100LC high performance liquid chromatograph  Agilent  G1379A, G1311A, G1313A , G1316A   G1379A, G1311A type chromatographic pump, G1313A automatic sampler, G1316A column temperature box
DECADE II SDC electrochemical detector Dutch ANTEC company glassy carbon electrode, Ag/AgCl reference electrode, workstations (Clarity CHS)
Biofuge Stratos high-speed refrigeration centrifuge HERAEUS
VCX130 ultrasonic fracturing instrument SONICS
ACS-ZEAS electronic scale Phos technology development, Beijing. The weight of the weighing rats can be accurate to 0.1g.
Open Field Box Customization,it is provided by the neuroimmunological laboratory of Beijing University of Chinese Medicine wooden box of open field  100 cm by 100 cm x 40 cm, inside wall and bottom as the gray.The bottom is divided into 25 equal area squares, each of which is 20cm x 20cm, and the 16 grids along the outer wall are the external ones, and the other 9 grids are central.The camera is mounted above the median.
Elevated Plus-maze Beijing zhongshi dechuang technology development co. LTD. The open arms and close  arms of the cross are composed of 30cm x 5cm x 15cm, and the central area is 5cm x 5cm, with a camera mounted above the center and 45cm high.
rat swimming bucket. Zhenhua biological instrument equipment co., LTD. Anhui,China. The volume of plastic drum is 70cm x 30cm x 110cm, which is used for swimming in rats.
Thermometer Shiya instrument co., LTD., changzhou,China. Control water temperature
Small water pump Xincheng technology co., LTD., chengdu,China. Used for water tank and swimming behavior.
Ethovition3.0 behavioral software. Nuldus,Netherlands Measurement analysis of rat behavior videos.

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記事を引用
Zhang, W., Zhang, W., Dai, N., Han, C., Wu, F., Wang, X., Tan, L., Li, J., Li, F., Ren, Q. A Rat Model of Central Fatigue Using a Modified Multiple Platform Method. J. Vis. Exp. (138), e57362, doi:10.3791/57362 (2018).

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