الثانوي تنكس خلايا العقدة الشبكية (رجكس) يحدث عادة في المياه الزرقاء. تصف هذه الدراسة نهجاً مبتكراً من منطوق للعصب البصري الجزئي ترانسيكشن. استخدام هذا النهج المنطوق توفير مساحة يمتد نطاق تطبيق هذا النموذج، ويتيح استكشاف آليات الإصابة الثانوية في رجكس بطريقة جديدة.
وقد أظهرت الدراسات السابقة أن انحطاط الثانوي لخلايا العقدة الشبكية (رجكس) يحدث عادة في المياه الزرقاء. ترانسيكشن جزئي في العصب البصري تعتبر نموذجا مفيداً واستنساخه. بالمقارنة مع النماذج إصابة العصب البصري الأخرى المستخدمة عادة لتقييم تنكس الثانوية، مثل العصب البصري كاملة ترانسيكشن ونماذج سحق العصب البصري، العصب البصري الجزئي ترانسيكشن النموذج متفوقة كما أنه يميز الأولية من انحطاط الثانوية في الموقع. ولذلك، هو بمثابة أداة ممتازة لتقييم تنكس الثانوية. تصف هذه الدراسة نهجاً منطوق رواية من ترانسيكشن العصب البصري الجزئي بالوصول مباشرة إلى منطقة العصب البصري خلف المقلة من خلال الجدار الجانبي المداري من مقلة العين. وعلاوة على ذلك، فإننا نقدم أداة جراحية المصممة حديثا ومنخفضة التكلفة لمساعدة مع ترانسيكتيون. كما يتبين من نتائج الممثل في التمييز بين حدود مناطق الإصابة الأولية والثانوية، بنهج جديد وصك يضمن عالية الكفاءة والاستقرار للنموذج بتوفير مساحة كافية لعملية جراحية. وهذا بدوره يجعل من السهل لفصل غمد سحائي وسفن العيون من العصب البصري قبل ترانسيكتيون. فائدة إضافية أن هذا النهج المنطوق الفضاء لإنقاذ يحسن قدرة المحققين بإدارة المخدرات، وشركات النقل، أو انتقائية حكومة كمبوديا الملكية تتبع عقب السيجارة للعصب البصري بحف جزئيا، مما يسمح استكشاف الآليات وراء الإصابة الثانوية في رجكس، بطريقة جديدة.
يحدث انحطاط الثانوية شيوعاً في الجهاز العصبي المركزي (CNS) بعد الإصابات الرضية، والأمراض الحادة والمزمنة الأعصاب التالية. 1 , 2 , 3 , 4 , 5 موت الخلايا العصبية والخلايا الدبقية هي نتيجة مبكرة للأحداث المرضية الأولية هو وصف انحطاط الأولية، حين تنكس الثانوي يشير إلى موت الخلايا العصبية والخلايا الدبقية، والتي لا تتأثر إلا جزئيا أو بالابتدائية الأضرار. تنكس الثانوية من رجكس يعتقد أيضا أن يحدث في المياه الزرقاء. 6 يوليس et al. 7 أكدت حدوث إصابة ثانوية من رجكس في نموذج إصابة العصب البصري. أنها أظهرت أن الخلايا العصبية محاور عصبية التي لم تتضرر بعد ضرر حاد سوف تتحول في نهاية المطاف بسبب البيئة التنكسية التي تنتجها الضرر المحيطة بهذه محاور عصبية. هذا تنكس الثانوي يؤثر على الخلايا العصبية بطريقة تدريجية تتصل بفداحة الأضرار التي لحقت. حتى الآن، ما زالت الآليات الأساسية لحكومة كمبوديا الملكية الضرر في الزرق غير واضحة، ولا سيما تلك المتصلة بالضرر الثانوي، مما يؤدي إلى عدم كفاية العلاج السريري. 8 , 9 , 10 ولذلك، من الضروري استكشاف الآليات الكامنة لانحطاط الثانوية من رجكس أثناء تطوير الزرق. 11 إنشاء نماذج حيوانية للإصابات الثانوية التي يمكن تقييم كمي في الحجم والتوزيع وآلية من انحطاط الثانوية من رجكس تجتذب اهتماما متزايداً من العلماء الذين يدرسون الثانوي إصابة رجكس.
لتوضيح هذه المسألة، أنشأت نموذجا بونت الفئران ليفكوفيتش فربين et al. 12 لتقييم الضرر محواري الناجمين عن انحطاط وموت رجكس. ويعتقد هذا النموذج تشكل أداة جيدة لاستكشاف آليات تنكس الثانوية وتحديد عوامل محصن محتملة. الأداة المستخدمة لإنشاء هذا النموذج من الضرر الثانوي سكين الماس مع مقياس قطاع كمياً عن طريق تعيين عمق أبسسيسيون من خلال مفتاح الاتصال الهاتفي، بغية إكمال ترانسيكتيون كمية للعصب البصري. نهج المسار الجراحية من مقلة العين الملتحمة التصاعدي أو الزمنية. أثناء عملية المنطوق، يمكن أن تتأثر بقوة الملقط، الذي بدوره قد يسبب الإصابة الأولية بالشبكية والأعصاب البصرية. الأهم من ذلك، بسبب المساحة المحدودة للعصب البصري المكشوفة، فإنه من الصعب فصل غمد سحائي قبل شق. ولذلك، من الممكن لأضرار السفن العيون أثناء ترانسيكشن جزئي في العصب البصري، مما يؤدي في الاسكيمية الشبكية وفشل النموذج. وباﻹضافة إلى ذلك، سكين الماس مكلف، وكل استخدام يقلل الحدة تلميح. وهذا قد يؤثر بدوره على عمق وتأثير النمذجة.
تم الحصول على نموذج لانحطاط الثانوية من رجكس الموصوفة في هذه الدراسة من خلال اتباع نهج منطوق جديدة من الجدار المداري الأفقي من مقلة العين. وهذا النهج منطوق الرواية الوصول مباشرة إلى العصب البصري خلف المقلة مطوقة بمخروط العضلات المداري، تجنب الإصابة الأولية لمقلة العين والعصب البصري عند سحب أسفل أو نحو الجانب الأفقي الآنف من مقلة العين. هذا أيضا يزيد من مساحة العمليات الجراحية أثناء إنشاء النموذج، ويمكن عزل غمد سحائي قبل جزئيا ترانسيكتينج العصب البصري. من المهم أن نلاحظ أن مشاركة غير مقصود وإصابة السفن العيون يمكن أن يؤدي إلى فشل النموذج. وعلاوة على ذلك، يتيح النموذج تقييم متابعة transfected الخلايا والعقاقير والمواد الكاشفة في عقب السيجارة للعصب البصري بحف جزئيا. الأدوات الجراحية ذاتية مصممة رخيصة ويمكن أن تكون متعددة تستخدم الأوقات، مما يقلل من التكلفة للنمذجة. كان سيظهر نموذج الضرر الثانوي رجكس المنشأة بهذه الطريقة إلى إمكانية تكرار نتائج جيدة والاستقرار.
الإجراءات التنفيذية
هناك بعض النقاط جديرة لإشعار عملية البناء النموذجي. في الخطوة 4، 2، ينبغي إجراء حركة الجراحية بعناية لتجنب إتلاف المفرج أعلاه العضلات سوبفاسسيال. وبخاصة، عندما قطع اللفافة تحت الجلد في كانثوس الجانبي الخارجي، ينبغي استخدام ملقط مسنن حاد لسحب التصاعدي من اللفافة تحت الجلد على سطح اللفافة رأسياً؛ ينبغي قطع اللفافة مع Vannas مقص الربيع تجنب إلحاق الضرر بالوريد المدارية في كانتوس الخارجي، مما يؤدي إلى فشل النموذج بالنزيف. ويمتاز خطوة 4.3 يحتمل أن تمنع النزيف عند إزالة مباشرة من الأوعية الدموية. في فصل العضلات المداري في الخطوة 4، 5، والسبب في ملقط مسنن حاد الانتقاء ولكن لم فانس مقص الربيع لتجنب النزف والنزف المستمر. يتم فصل العضلات صراحة على كلا الجانبين في الاتجاه العمودي لشق لفافة الجلد؛ وفي الوقت نفسه، يتم تمدد العضلات العميقة للمدار إلى الخارج ومحيطيا. هذا الإجراء سوف تكشف عن أعمق أجزاء تجويف المداري، توفير إطار جراحة أكبر والسماح بالوصول دون عائق إلى الأنسجة التي تتراكب على العصب البصري. الإجراءات المذكورة أعلاه، في حالة حدوث نزيف، ضغط ينبغي تطبيق استخدام عقيمة جراحية أو مسحات القطن. سيتم إيقاف نزيف طفيف بعد عدة ثوان قبل هذا الإجراء. وغرض الخطوة 4، 6 لتسهيل عمليات المتابعة لإزالة بعض العضلات والدهون ومنفصلة بسهولة في المخروط العضلات المدار لفضح العصب البصري على طول اتجاه العصب البصري في عمق المداري.
خطوات أهم أجزاء من البروتوكول الحالي على 5.1-5.6. المهم لا للتلف المفرج حول رأس العصب البصري. وينبغي أن ترانسيكتيد العصب البصري جزئيا على الأقل 1.5-2.0 ملم من الجزء الخلفي العين، لتجنب أي ضرر للشريان العيون التي تخترق العصب داخل 1 مم العين وإمدادات الدم إلى الشبكية الداخلية. والغرض من القطع المستقيمة الجانبية تحقيق أفضل من التعرض للعصب البصري المستقيمة الجانبية على نطاق واسع، وكتل من الواضح أنه يرى العصب البصري. وفي الوقت نفسه، لتجنب إزالة العيون الشريان الذي يقترن مع غمد سحائي (الشكل 5)، من الضروري أن فصل وفصل دوراً حول العصب البصري ودراسة نمط غمد سحائي، الأوعية الدموية استخدام الملقط لتدوير الغمد بلطف. وبالإضافة إلى ذلك، ينبغي تحديد منطقة خالية من الأوعية الدموية، مما يسمح قطع طولية في غمد سحائي. كما أنها ضرورية للحفاظ على مسافة عمل صغيرة من الجزء الخلفي العين، وتفادي الجزء من بلده دوراً التي يرتبط ارتباطاً وثيقا بالشريان العيون. الشبكية يكون عادة شفافاً، ويمكن ترسيمها وضوح الأوعية الدموية. في حالة تلف الدم الشبكية، تحولت شبكية العين، مما يؤدي إلى مظهر حليبي أبيض ندفا. قاعة الزجاجي للعين والعدسة ستصبح عادة غائم كذلك، مع حجم العين انخفضت على مر الزمن. في هذه الدراسة، أكدت الصور قبل الجراحة وبعد الجراحة للنظارة أي ضرر لإمدادات الدم النظارة في النموذج بعد تطبيق الخطوات المذكورة أعلاه.
وعلاوة على ذلك، مطلوب رعاية خاصة في عدة خطوات من هذا الطراز. عند استخدام ملقط مسنن منحنى حاد أو غيرها من الأدوات الجراحية لفضح العصب البصري، الجراح ينبغي تجنب القوة المفرطة، كما أنها قد تتلف العصب البصري، ومقلة العين أو الشريان العيون، مما أدى إلى إصابة الأولية والاسكيميه الشبكية. وبالإضافة إلى ذلك، الأوعية الدموية المحيطة بالعين وينبغي أن لا يكون معطوباً، لتجنب النزيف المستمر، مما قد يؤدي إلى فشل النمذجة. سي المستخدمة في هذه التجربة يتطلب الاستخدام الدقيق. عندما يتم وضع العصب البصري داخل الاخدود الصك، العصب البصري وسطح مخدد تحتاج إلى أحكام تركيبها لضمان اتساق جيد والتكرار لكل نموذج الحيوان. مع الممارسة، يمكن أن تكتمل العملية الجراحية الكامل خلال 15-20 دقيقة في العين، بعد أن أجريت تخفيضات الدخول الأولى.
وانغ وآخرون ونشرت 19 نموذج حيوان مشابهة للعصب البصري الجزئي ترانسيكشن المنشأة باستخدام أمبوتاتور كمية عصب البصري. العمليات الجراحية وتشمل: 1) قطع أربا كانتوس الخارجي، تعليق وتحديد بالبيبرال الفعليتين للرئيس؛ استكشاف العصب البصري 2)، وترانسيكتينج الجزء متفوقة من العصب البصري باستخدام أمبوتاتور؛ و 3) خياطة الملتحمة والجلد. على الرغم من أن العملية الجراحية كانت بسيطة نسبيا، تمت مصادفة المشاكل التالية أثناء العملية. على الرغم من أن شق كانتوس الأفقي يمكن أن يعرض مساحة معينة للعملية، هناك حاجة لا مفر منها على امتداد مقلة العين باستمرار من أجل فضح غمد العصب البصري خلف المقلة، لا سيما عند الجراحين المطلوب لفضح خلف المقلة أطول غمد العصب البصري لتيسير المزيد من العزلة غمد؛ كانت القوة لتمتد مقلة العين أكبر، الذي من المحتمل أن يسبب الضرر المباشر الجر مقلة العين والعصب البصري. لا اهتمام خاص بالأوعية الدموية التي قد قطع جنبا إلى جنب مع غمد العصب البصري، والأضرار التي لحقت الأوعية الدموية من المرجح أن يؤدي إلى إنشاء نموذج الفاشلة. الإجراءات الرئيسية لنموذج الضرر الثانوي الموصوف في هذه الورقة: منطوق جديد يقترب من الجدار المداري الأفقي من مقلة العين الوصول مباشرة إلى العصب البصري خلف المقلة محاطة بمخروط العضلات المداري، تجنب الإصابة الأولية إلى مقلة العين والعصب البصري، عندما سحب أسفل أو نحو الجانب الأفقي الآنف من مقلة العين. هذا النهج منطوق جديد يزيد من المساحة لعملية جراحية خلال النمذجة، وتمكن من السهل عزل غمد سحائي، الذي يرتبط ارتباطاً وثيقا بالشريان العيون، قبل ترانسيكشن جزئي للعصب البصري. وأجرى ترانسيكشن جزئي في العصب البصري مع أداة جراحية الذاتي مصممة، التي فعالة من حيث التكلفة وقابلة لإعادة الاستخدام، تقليل التكلفة الإجمالية للنمذجة. هيكل المداري للفئران تختلف عن غيرها من الثدييات، مع المدار الأقرب إلى كانثوس ولا يوجد هيكل عظمى، ولكن مغطاة بالعضلات. أن النهج الجراحية يمكن أن تصل إلى الجزء الخلفي من مقلة العين دون الحاجة إلى تدمير العظام المداري والسمحاق. عن طريق تطهير صارمة قبل الجراحة والاتقاء بالمضادات الحيوية بعد العملية الجراحية، خفضت إلى حد كبير العدوى والتهاب وذمة.
الذاتي المصممة الجراحية مساعد
أنشئ نموذج فأر ترانسيكتيون العصب البصري جزئية استخدام الصك مساعد الجراحية الذاتي المصممة، وملامحها الرئيسية كما يلي. أنها يمكن أن تساعد في ترانسيكتيون الكمية الجزئية للعصب البصري يتعرض إلى حافة مخدد، أيضا ضمان الاتساق ترانسيكتيون بين الحيوانات المختلفة. ونحن اختبار والتحقق من التكرار لإنشاء نموذج مع سي. معامل الحد الأقصى للاختلاف كان 1.85 في المائة، متوسط قيمة 0.67 في المائة ±0. 44%. هذه النتائج تشير إلى أن سي يمكن استخدامها لإنشاء نماذج ترانسيكشن جزئي في العصب البصري، مع إمكانية تكرار نتائج مرضية والأمم المتحدة 20إيفورميتي.
العرض للسطح مخدد وتصميم نصف دائرة السطح الداخلي للاخدود يمكن أثرا أكثر ثابتة على العصب البصري، وتجعل سطح مخدد وإرفاق العصب البصري أكثر أحكاما، أيضا تقليل الأخطاء التجريبية وردود الفعل السلبية. حافة مخدد يسمح توفير حماية أفضل للعصب البصري في groove خلال هذه العملية التي لا ضرر في العصب البصري في groove، بغض النظر عن الحدة القاطع. ميزة أخرى من حافة مخدد هو سحق الوقاية من الإصابات أثناء ترانسيكشن العصب البصري.
ومن المناسب للتشغيل في الفضاء العميق والضيق. على الرغم من أن تم توسيع النهج الجديد من المنطوق، الطريق ما زالت عميقة، والقطب باليد والقسم المشترك يمكن استخدامها لوضع الرأس مخدد بسهولة تحت غمد العصب البصري لإجراء عمليات المتابعة. عندما يتم استخدام الأداة للتشغيل، يمكن استخدام مجموعة واسعة من قطع ترانسيكتيون، مثل تلميح إبرة ز 26. يمكن تحديد حتى سكين ياقوت مسبار جراحية تجنب كدمة وسحق الإصابات الناجمة عن المقص. يمكن إجراء السطوح الاخدود في أعماق رأسية مختلفة لإكمال قطع العصب البصري بدرجات متفاوتة.
مقارنة مع أمبوتاتور وانغ et al. سي لديها هيكل أبسط. وبالإضافة إلى ذلك، خطوة قطع أكثر ملاءمة استخدام سي، مع تحسين الاتساق والتكرار لنموذج الحيوان. وأخيراً، مجموعة الأدوات المطبقة للقطع سي أيضا أوسع. وفي الختام، قد سي، الأمر الذي يجعل شقوق الكمية وموحدة للعصب، بمثابة أداة فعالة لإنشاء نماذج الفئران لتقييم ترانسيكشن العصب البصري.
خصائص النموذج ترانسيكشن العصب البصري الجزئي الفئران
نموذج ترانسيكشن العصب البصري الجزئي مفيد لتقييم تنكس الثانوية في رجكس. ميزة محتملة في هذا النموذج هو القدرة على فصل الأولية من انحطاط الثانوية بدقة في الموقع، سواء في العصب البصري والشبكية. الأعصاب البصرية المركزية والبطني كانوا أكثر عرضه للإصابة الثانوية بعد ترانسيكشن الجزئي (حوالي 1/3 إلى 1/2) للعصب البصري الظهرية (الشكل 6). في شبكية العين، ينبغي أن يستند الموقع الإقليمي للإصابات الأولية والثانوية من رجكس إلى طبوغرافية العصب البصري تناظر رجكس الشبكية بعد ترانسيكتيون الجزئي. إذا تم تقسيم كامل شبكية الفئران إلى الظهرية (العليا) وأجزاء (أدنى) البطني، الإصابات الثانوية والأولية موجودة في كلا الجزأين. ومع ذلك، استناداً إلى العلاقة بين رجكس على الشبكية ومحور عصبي العصب البصري، الموت حكومة كمبوديا الملكية في الشبكية البطني ينبغي أن تكون يعزى أساسا إلى الضرر الثانوي (الشكل 3). 12 , 22 , 23 مزايا هذا النموذج ما يلي: أداة بسيطة وسهلة للعمل مع الإجراءات القياسية؛ أي تأثير على العيون السفن؛ إمكانية تكرار نتائج جيدة والاستقرار. يمكن استخدام هذا الأسلوب ترانسفيكت رجكس من هذا النهج المنطوق توفيرا للمساحة بتطبيق الكشف التدخل القصير (سيرناس)، البلازميدات، وجدعه النواقل الفيروسية للعصب البصري الجزئي؛ وبالإضافة إلى ذلك، يمكن أن توضع الكواشف على السيجارة جزئي في العصب البصري لمعالجة انتقائية أو وضع العلامات من رجكس.
وتتعايش الإصابات الإجمالية والابتدائي والثانوي من رجكس بعد ترانسيكشن جزئي في العصب البصري في هذا النموذج الحيواني، مع حدود واضحة في الشبكية بين أنواع إصابة اثنين. وبالرغم من أن رابطة العصب البصري محاور عصبية وموقع حكومة كمبوديا الملكية على الشبكية يحتاج مزيدا من التحقيق لتمييز أدق، هذا النهج المنطوق الفضاء لإنقاذ يوسع نطاق تطبيق النموذج ويسمح للباحثين لاستكشاف آليات الإصابة الثانوية في رجكس بطريقة جديدة.
The authors have nothing to disclose.
هذا العمل كان تدعمه “بكين مؤسسة العلوم الطبيعية” (7152038)، أموال البحوث الأساسية للجامعات المركزية لجامعة جنوب وسط (2016zzts162) والعلم مؤسسة من عير العين مستشفى مجموعة الأبحاث (رقم المنحة AF156D11). وأخيراً، شكرا يان فانتشينج “شو يي بينغ” لما قدموه من دعم خلال السنوات.
Animal Aneathesia Ventilator System | MIDMARK | Matrx VMR | |
Isoflurane | RWD Life Science Co. | R510-22 | |
Surgical Microscope | Leica AG, Heerbrugg, Switzerland | M620 F20 | |
Tobramycin Eye ointment | Alcon | H20110312 | |
Fluorogold | Biotium | 80014 | |
Iris scissors | 66vision Co. | 54026 | |
Vannas spring scissor | 66vision Co. | 54137B | |
Sharp-serrated forceps/0.12mm toothed forceps | 66vision Co. | 53329A | |
Sharp-curved forceps | 66vision Co. | 53324A | |
Sapphire surgical probe | 66vision Co. | 50205TA | |
26G needle tip | Shandong Weigao Group Medical Polymer Co. | 3151474 | |
10 μl Hamilton Syringe | Hamilton Co. | 80030 | |
5-0 non-absorbable suture | Johnson & Johnson International Co. | W580 | |
Chlorhexidine | Sigma-Aldrich | 282227 | |
Stereotaxie apparatus | RWD Life Science Co. | 68026 | |
Retinal Imaging System | OptoProbe Ltd. | OPTO-RIS | |
RetCamII wide field imaging system | Clarity Medical Systems,Inc. | RetCamII | |
Fluorescence microscope | Leica Microsystems Inc. | DM6000 |