대동맥 반지 공동 문화 분석 결과: Mesenchymal Stromal 세포에 생체 외에서 의 신생 잠재력을 평가 하는 편리한 도구

신생의 복잡 한 프로세스 향상 하 고 기존 맥 관 구조¹에서 새로운 선박 개발을 추진 하 여 조직 관류를 유지 합니다. 프로-신생 및 안티-신생 요인에 의해 단단히 규제, 공정한 과정 이다. 어떤 결핍이이 시스템에 부족 한 선박 유지 보수 또는 성장, 심근 질환, 뇌졸중, 신경 장애 등 심각한 허 혈 성 질환을 일으키는 발생할 수 있습니다. 그러나, 과장 된 혈관 개발 조건 암, 염증 성 질환²를 포함 하 여 특징입니다.

유리한 조직 재생을 달성 하기 위해 신생을 제어 하는 것을 목표로 하는 치료를 개발 하는 것은 중요입니다. 광범위 한 전 임상 및 임상 조사에도 불구 하 고 신생 프로 신생 요인과 microRNAs를 사용 하 여 자극 하려고 원하는 결과^3,,45달성 못했다. 일시적 효과 대 한 가능한 이유: 신생 단백질 및 핵 산의 한정 된 수의 제한 된 장 수 대상 성장 요인^6,7. 수용 성 신생 요소는 신생을 시작에 대 한 필수, 유지 보수 및 맥 관 구조의 기능 세포 유형 pericytes 및 평활 근 세포⁸을 포함 하 여 지원에 따라 다릅니다. 프로-신생 요법의 분야는 지금 잠재적인 줄기 세포 그리고 조상 세포 원 맥 관 구조, 자동 갱신 또는로 차별화 개발 물리적으로 새로 지 원하는 신생 요소를 로컬로 제공할 수 있습니다 탐험 내 피 같은 셀^9,10. 찾는 최적의 신생 세포 유형 이러한 기능적 요구 사항을 충족 하는 기능으로 허 혈 성 조직 재생에 대 한 위대한 약속을 보유 하고있다.

임상으로 잠재적인 세포 기반 치료를 성공적으로 번역 하기 위해 전 임상 연구 하 그들의 효능을 입증 하 고 기본 신생 메커니즘을 강조 해야 합니다. 설립 된 신생 분석 실험의 높은 숫자에도 불구 하 고 필드 “금 표준” 생체 외에서 분석 결과 안정적으로 잠재적인 후보 셀 유형^11,12, 의 효능을 평가할 수 있는 부족 ¹³. 대부분 체 외에서 신생 분석 실험 (내 피 확산, 마이그레이션 및 관 형성 분석을 포함 하 여) 일반적으로 내 피 세포의 phenotypical 변화 나 감 별 법으로 셀 또는 화합물의 효과 평가 관 및 네트워크 구조^14,15. 이러한 기능은 신생에 대 한 중요 한 동안, “번역” 분석 결과 또한 평가 해야 한다: 1) 확대 또는 pericytes 또는 평활 근 세포, ECM, 지하실 막의 2) 처리를 포함 하 여 지원 세포 유형의 교체 및 3) 기능 microvasculature의 형성을 촉진 하는 효율성. 각 막 분석 결과 및 Matrigel 플러그 분석 결과를 포함 하 여 신생 모델, vivo에서 독특한 vivo에서 microenvironment을 정리 하지만 추적 관리 셀의 어려움에 의해 도전 물리적 상호 작용을 관찰 하. 또한, vivo에서 모델 이종 면역 거부 잠재 수용자 세포 치료 후보¹⁶테스트 하는 동안 발생할 수 있습니다. 신생 모델 비보 전 특히 대동맥 반지 분석 결과 제공할 수 있습니다: 1) 쉽게 관찰과 3) ECM 호스트와 인공 공급에서의 염증 성 제외 4) 관 형 구조, 2) 액세서리 지원 셀의 정량화 구성 요소, 및 5) 신속 하 고 저렴 한 설치^17,18. 일반적으로, 대동맥 반지 분석 결과 작은 분 비 단백질, 약리학 대리인, 및 유전자 변형 쥐 모델^19,,2021의 신생 잠재력을 테스트할 수 있습니다.

MSCs는 주로 그들의 paracrine 중재 효과^22,,2324통해 혈관 재생을 위한 유망한 후보자. 혈관 내 피 성장 인자 (VEGF), Hepatocyte 성장 인자 (HGF)를 포함 한 주요 신생 요인 분 비 MSCs 보였다 인슐린 같은 성장 인자-1 (IGF-1), 기본적인 섬유 아 세포 성장 인자 (bFGF), 및 angiopoeitin-1 (중앙-1)^{25 ,26}. 그러나 MSCs도 검색할 수 있습니다 그리고 집에 허 혈 성 또는 염증 조직, 조사를 받고 아직도, 정확한 메커니즘은. 점점, 문학 가설 대부분 MSCs 혈관 주위 세포에서 발생 하는 공동 pericyte 마커, 표현 그리고 pericytes²⁷처럼 행동 수를 지원 합니다. HUCPVCs는 인간의 탯 줄의 혈관 주위 지역에서 파생 하는 MSCs의 젊은 소스입니다. 그들은 pericyte 같은 속성으로 MSCs의 인구를 대표 하 고 용어와 FTM 탯에서 특징. FTM HUCPVCs CD146 및 높은 증식 및 multilineage 잠재력 NG2 면역 권한 속성을 비롯 한 pericyte 마커의 높은 식 설명 하 고 강력한 paracrine 프로필²⁸을 표시 합니다. FTM HUCPVCs pericyte 같은 속성을 통해 새로운 맥 관 구조의 프로 모션을 통해 손상 된 조직의 재생을 촉진 하는 이상적인 후보자 셀 유형입니다.

신생 잠재력과 인간의 MSCs의 pericyte 같은 속성을 테스트 하려면 신생 분석 실험의 매우 제한 된 수 있으며 사용할 수 있는 긍정적인 angiotropic 마이그레이션 (“추적” 라 함), ECM 처리, 물리의 개발 셀 형식 간의 상호 작용 microvasculature 개발에 양적 데이터를 가져오는 동안, 조사 될 수 있다.

이로써 선물이 대동맥 반지 분석 결과의 새로운 응용 프로그램을 설명 하는 프로토콜. 인간의 MSCs 공동 개발 쥐 파생 대동맥 내 피 네트워크 형성, 성숙, 및 항상성 튜브에 그들의 기여를 평가 하기 위해 경작 했다. 이 버전의 대동맥 반지 분석 결과 평가 능력과 집 신생의 사이트를 수행 하 고 ECM 처리를 중재 pericyte 같은 물리를 수립을 통해 내 피 관 개발을 세포 치료의 힘 상호 작용입니다. 생체 외에서 내 피 네트워크 형성에 MSCs의 그물 효과 측정 하 고 세포 상호 작용을 관찰, 뿐만 아니라 우리는 또한 공동 문화에서 MSCs를 분리 하는 프로토콜 최적화. Cytometry 및 정량 Pcr을 수행 하 여 특성화 MSC 표현 형 및 유전자 식 공동 문화에 따라 변화 가능 하다. 모델 셀 유형으로 우리 ontogenetically 일찍 비교 (태아)와 인간의 MSCs의 늦은 (성인) 소스: FTM HUCPVCs와 인간의 골 수 파생 된 MSCs (BMSC), 대동맥 반지 분석 결과에서 각각. 우리는 신생 재생 응용 프로그램에 대 한 조사를 받고 때 어떤 물리적으로 지 원하는 셀 형식의 신생 잠재력 연구 대동맥 반지 분석 결과 사용할 수 있습니다 제안 합니다.