JoVE Journal > Chemistry
概要
Abstract
Introduction
Protocol
結果
Discussion
開示
Acknowledgements
Materials
参考文献
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.
化学

Простой метод для размера контролируемого синтеза стабильных олигомерных кластеров наночастиц золота в условиях окружающей среды

Published: February 05, 2016
doi:
10.3791/53388
, , ,
1Department of Pathology and Laboratory Medicine,University of North Carolina at Chapel Hill, 2Condensed Matter Physics Department, Laboratory of Biophysics,Jozef Stefan Institute

概要

Мы опишем простой способ получения высокостабильных олигомерные кластеры наночастиц золота с помощью сокращения тетрахлороаурат (HAuCl 4) с тиоцианата натрия (NaSCN). В oligoclusters имеют узкое распределение по размерам и могут быть изготовлены с широким диапазоном размеров и поверхностных слоев.

Abstract

Снижения разбавленных водных HAuCl 4 с тиоцианата натрия (NaSCN) в щелочных условиях производит наночастицы диаметром нм 2 до 3. Стабильные винограда, как олигомерные кластеры этих желтых наночастиц узким распределением по размерам синтезируются в условиях окружающей среды с помощью двух методов. Способ задержка времени контролирует количество субъединиц в oligoclusters путем изменения времени между добавлением HAuCl 4 к щелочным раствором и последующее добавление восстановителя, NaSCN. Желтые oligoclusters производится в диапазоне размеров от ~ 3 до ~ 25 нм. Этот диапазон размера может быть продлен путем надстройка метода, использующего гидроксилированного золотую хлорид (Na + [Аи (ОН 4-х) Cl х] -) для автоматического каталитически увеличить число субъединиц в синтезированный oligocluster наночастиц, обеспечивать общий диапазон 3 нм до 70 нм. Препараты сырой oligocluster отображения узким распределением по размерам и не требуют мехтермо фракционирования для большинства целей. В oligoclusters образованные могут быть сконцентрированы> 300 раз без агрегации и смеси сырой реакционной остаются стабильными в течение нескольких недель без дальнейшей обработки. Поскольку эти олигомерные кластеры могут быть сконцентрированы, прежде дериватизации они позволяют дорогие дериватизирующие агенты, используемые в экономическом отношении. Кроме того, мы представляем две модели, с помощью которых предсказания размера частиц могут быть сделаны с большой точностью.

Introduction

Использование наночастиц золота в качестве инструмента в обоих биомедицинских применений и фундаментальных исследований значительно вырос за последние несколько десятилетий. Мало кто из современных наноматериалов были применены к стольких различных областях, находя их использование во всем от солнечных панелей к лечению рака фототермическая; от электрического до биологических датчиков; от химического катализа в системах доставки лекарственных средств 1-7. Проценты в золотых наночастиц в качестве инструментов в этих областях обусловлены уникальными свойствами наночастицы золота обладают которые включают специальные структурные, оптические и электронные свойства 8.

Существует растущая использование наночастиц золота 9,10 в биологических и химических анализов. Несмотря на наличие многих источников для покупки золотых наночастиц, они приходят на значительном цене по сравнению со стоимостью в синтезе дома. Высокая стоимость коммерчески доступных наночастиц делает в доме синтеза деsirable. Наша методика включает синтез олигомерных нанокластеров сделанных небольших 2-3 нм сферических золотых субъединиц. Имея все преимущества классической наночастиц золота, олигомерные нанокластеры предпочтительным выбором, когда дело доходит до проницаемости или фильтрации ставки измерений, поскольку их модульная структура имитирует структуру белков.

В настоящее время наиболее общие подходы к в доме синтеза наночастиц золота включать сокращение хлорида золота (HAuCl 4) в водных условиях 11,12. Снижение HAuCl 4 с общими восстанавливающих реагентов, таких как боргидрид натрия (NaBH 4) или цитрата натрия, обеспечивает производство сферических наночастиц 13. Наночастицы золота, синтезированные с помощью этих методов ограничены в их полезного диапазона размеров, поскольку они становятся чувствительными к присутствию солей в биологических буферов, как повысить их основные диаметры. Способ, была описана ранеедля синтеза желтых наночастиц 2-3 нм в диаметре от сокращения HAuCl 4 с тиоцианата натрия в щелочных условиях 14,15.

Здесь мы описываем модификацию этого метода, который производит виноградный подобные oligocluster из желтых наночастиц без необходимости в дополнительных укупорки агентов. Путем простого изменения времени между добавлением HAuCl 4 к щелочным раствором и последующее добавление восстановителя, тиоцианат натрия, мы можем варьировать полученную размер частиц золота из ~ 3 нм до ~ 25 нм. Для изготовления более крупных частиц, простой дополнение процедура может быть использована для выращивания этих oligoclusters добавлением гидроксилированных золота (Hg) в качестве синтезированных oligoclusters в присутствии тиоцианата натрия. С помощью этих двух методов, мы можем надежно производить oligoclusters охватывающих диапазон от ~ 3 нм до ~ 70 нм. Тот факт, что этот метод позволяет хорошо контролировать синтез высококачественного гстарые oligoclusters под стендовых условиях со стандартным оборудованием и ограниченным числом реагентов потенциально расширяет преимущества золотых наночастиц в качестве исследовательского инструмента для исследователей с небольшим или никаким опытом в области химического синтеза.

Protocol

1. Подготовка реагентов Внимание: при работе с химическими веществами и решений всегда соблюдать осторожность. Следуйте надлежащих методов техники безопасности и носить перчатки, очки и халат во все времена. Следует помнить, что наноматериалы могут иметь дополнительные опасности по сравнению с их объемной коллегой. Примечание: Все химические растворы изготавливают моляльная (грамм моль на кг растворителя), а не моляра (грамм моль на литр раствора). Получение хлорида золота Растворить 1 г тригидрата золота (III) хлорида в 100 г H 2 O с получением 25 мМ HAuCl 4. Получение буры (Na 2 B 4 O 7 · 10H 2 O) Растворите 3,81 г буры в 100 г H 2 O, чтобы дать 0,1 моляльной буру (теплый, если необходимо обеспечить полное решение). Получение тиоцианата натрия Растворить 8,1 г тиоцианата натрия в 100 гH 2 O с получением 1 моляльной NaSCN. Получение карбоната натрия Растворите 5,3 г безводного карбоната натрия в 100 г H 2 O с получением 0,5 моляльной Na 2 CO 3. Получение глутатиона Растворить 154 мг восстановленного глутатиона (GSH) в 1 мл 0,5 моляльная Na 2 CO 3 с получением 0,5 моляльная GSH. 2. Синтез Gold Oligoclusters Задержка времени Синтез Gold Oligoclusters Добавить 59,5 мл H 2 O на чистую 125 мл Уитон стеклянной бутылке, содержащей мешалку. Используйте любой плоской нижней чистый стеклянный контейнер, но убедитесь, что это очень чистый. Добавить 7 мл 0,1 моляльной буры и довести решение до энергичного перемешать. Добавить 2,8 мл ~ 25 мМ HAuCl 4 при энергичном перемешивании и ждать желаемое время задержки (добавление HAuCl 4 начинается задержка времени). Время задержки будет определять размерАС синтезированы oligoclusters как показано в таблице 1. После желаемое время задержки, добавьте 700 мкл 1 моляльной NaSCN под кратким интенсивным перемешиванием (1200 оборотов в минуту в течение 30 сек). Удалить мешалку и оставляют реакционную смесь до завершени O / N (распределение по размерам oligoclusters могут быть дополнительно улучшены, позволяя смесь непрерывно перемешивают O / N в то время как реакция идет к завершению). После реакции прийти к завершению синтезированного сырой oligoclusters стабильны в течение недели. Дополнительный роста Oligoclusters Зерноуборочные 10 мл, как-синтезированных oligoclusters до 60 мл HG. Отношение, как-синтезированных oligoclusters до HG определяет размер полученных oligoclusters, увеличивая относительное количество HG производит большие oligoclusters. Добавить 900 мкл 1 моляльной NaSCN под кратким интенсивным перемешиванием (1200 оборотов в минуту в течение 30 сек). Оставляют реакционную идти до завершения O / N (распределение по размерам oligoclustersможет быть дополнительно улучшена, позволяя смесь непрерывно перемешивают O / N в то время как реакция идет к завершению). 3. GSH Получение производных и обогащение Oligoclusters Добавить 70 мл в синтезированных oligoclusters сырой (или oligoclusters из надстройки по методу) до 70 мл 30 кДа отсечки центробежной фильтр. Спин течение 15 мин при 3000 х г в. Это концентрирует частицы вниз до объема ~ 250 мкл. Флип устройство снова и восстановить ретентата спиннинг устройство в течение 3 мин при 500 х г в. Восстановленные объем должен быть ~ 250 мкл. Мера восстановлены громкость с помощью микропипетки. Добавить объем 0,5 моляльной глутатиона (или другого тиола), равном 1/9 й извлеченного объема концентрированных oligoclusters (конечная концентрация 50 mmolal GSH). Разрешить реакция производных сидеть при комнатной температуре в течение 5-10 мин. Получение производных происходит быстро. Чрезмерно длинные времена может распустить частицы. Развести произдартизованных oligoclusters в 50 мл фосфатно-буферным раствором Дульбекко. (Другие буферы или H 2 O может быть выбран в качестве разбавителя / промывочного буфера в этом шаге. Выбор, как правило, определяется предполагаемой потоку приложения.) Добавьте все разбавленных дериватизированных oligoclusters до 30 кДа отсечки центробежным фильтром. Спин центробежным фильтром в течение 15 мин при 3000 х г в. Флип устройство снова и восстановить ретентата спиннинг устройство в течение 3 мин при 500 х г в. Восстановленные объем должен быть ~ 250 мкл. Восстановленные концентрированные частицы готовы к использованию и стабильны в течение нескольких месяцев при 4 ° С. 4. Анализ и проверка Oligocluster Synthesis Гель-электрофорез Oligoclusters Электрофорез подготовки сырой oligocluster Смешайте синтезированного oligocluster Подготовительные 2: 1 с буфером нагрузки, содержащей 60% глицерина, ~ 0,15% бромфенола синего и 150 mmolal GSH (запаса 0,5 моляльной G изSH растворяют в 0,5 моляльной Na 2 CO 3). Нагрузка 30 мкл на сборного полиакриламидном градиентном геле (любой кДа) и запустить с Трис-Глицин Запуск буфер (25 мМ Трис, 192 мМ глицина; не используется SDS) за 26 мин при постоянном напряжении (200 V). Электрофорез GSH дериватизованных Oligoclusters Развести GSH-производные oligocluster подготовки 1: 3 с H 2 O (обычно 2 мкл ГШ-oligoclusters с 6 мкл H 2 O). Смешайте разбавленный GSH-производные oligoclusters 2: 1 с буфером нагрузки, содержащей 60% глицерина, ~ 0,15% бромфенола синего и 150 mmolal бикарбоната натрия. Нагрузка 10 мкл на сборного полиакриламидном градиентном геле (любой кДа) и запустить с Трис-Глицин Запуск буфер (25 мМ Трис, 192 мМ глицина; не используется SDS) за 26 мин при постоянном напряжении (200 V). Просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) Подготовка Oligoclusters для ТЕА Для мытья oligoclusters разбавить 20 мкл концентрированных oligoclusters 0,5 мл H 2 O и нагрузки в 0,5 мл 30 кДа отсечки центробежной фильтр. Спин при 14000 х г в течение 10 мин. Удалить фильтрата и ресуспендируют ретентата со свежим 0,5 мл H 2 O. Повторите промывку дважды в общей сложности 3 стирок. Развести окончательного ретентат 500 раз в H 2 O (oligoclusters готовы к гриддинга в этой точке). Гридинг Oligoclusters Тлеющий разряд углерода покрытием сетки. Депозит 0,6 мкл промытых и разводненной oligoclusters на тлеющем выписан сетку, покрытую углеродом. Разрешить сетку до воздушно-сухого в течение 10 мин. Визуализация oligoclusters ТЭМ в 100000-кратном увеличении. Работают на 80 кВ для изображений, показанных здесь.

Representative Results

Синтез золотых oligoclusters были проанализированы с помощью электрофореза гель (рисунок 1) и просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) (рисунок 2). Размер oligoclusters GSH-покрытых можно контролировать с помощью электрофореза в более крупные частицы мигрируют все меньше и темнее. Кроме того, качество любого данного препарата размера может быть выведен широты диапазона видели после электрофореза (т.е. для данного размера, препараты с распределениями узких размера будет производить более жесткие полосы, чем препараты того же размера с более широкими распределений размеров) . Рисунок 2 описывает связь временной задержки (метод задержки времени) или HG: семя (дополнение метод), чтобы oligocluster размер. Средние диаметры рассчитанные методом просвечивающей электронной микроскопии используются для определения задержки времени и HG: рост зависимость семенной oligoclusters для задержки времени и дополнительных методов, соответственно. Блок-схема (рисунок 3), с описанием процедуры для обоих метHODS и таблица (таблица 1) обеспечение предсказанные параметры для получения oligoclusters желаемого размера представлены. Рисунок 1. Полиакриламид градиент гель электрофорез oligoclusters образованных задержка времени и дополнительных методов. Oligoclusters производится задержки времени и дополнительных методов были проанализированы на электрофореза градиентном геле. Дорожки 2-4: oligoclusters образованные после различным временем задержки (45, 135, и 405 сек) между делая HAuCl 4 щелочные и добавление NaSCN Переулках 5-8:. Oligoclusters образованных дополнительными метода. Семенной был сформирован методом задержка времени с 405 задержки сек, обозначенном ↓. Различные количества HG были использованы для дополнения. Соотношения раствора Hg (1 мм в золоте), чтобы отобрать решение (1 мМ в золоте), используемые для приготовления каждого образца показателямТед, а 4xHG, 6xHG, 12xHG и 24xHG. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл. Рисунок 2. Диаметры золотых oligoclusters образованные задержки времени и дополнительных методов. Oligoclusters подготовленные задержки времени и дополнительных методов были проанализированы с помощью ПЭМ. А) и Б) приспособлены с разрешения реф. 16, Copyright 2014 Американского химического общества. (А) представитель ПЭМ-изображения 50 нм х 50 нм участки сеток, изготовленных из образцов с использованием метода задержки времени. Диаметр частиц (ось) и временем задержки используемых при их получении (оси X) указаны оба оси логарифмические. Тяжелая черная линия (R 2 = 0,973) является наилучшим образом подходит с эмпирической 3-параметра уравнение D задержки времени = D 0 + а (1 – е -bt </SUP>), где D задержки времени средний диаметр кластеров в нм, D 0 минимальный диаметр кластеров (~ 3,5 нм); А является максимальное увеличение размера базовой вызвано увеличением времени задержки (~ 20 нм) и б = 0,0021 сек -1. (B) Диаметры oligoclusters образовавшихся после различным временем задержки перед добавлением NaSCN (метод задержки времени) представил в линейном масштабе. (С) Диаметры oligoclusters образовавшихся после того (надстройка метод) различных количеств HG на сформованных семян золотых сформированных способом задержки времени с временем задержки 405 сек. Как показано с помощью тяжелой черной линией, это можно легко увидеть, что диаметр oligoclusters образованный дополнительными метода является , Где с HG и гр Семена концентрации тетрахлороаурат используемые при изготовлении раствора ртути в дополнительными метода и в принятии oligoc люстры методом задержки времени, соответственно. Аналогично Семена V HG и V являются соответствующие объемы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл. Рисунок 3. Учебный плакат схема задержки времени и дополнительных способов получения золота oligoclusters разных размеров. Блок-схема с изложением процедуры для синтеза золотых oligoclusters разных размеров, используя либо задержки времени или дополнительные методы. Щелочной раствор тетрахлороаурат синий. HG красный. Золото семена наночастиц и oligoclusters черные. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы загрузить этот файл. 318px "> Задержка времени процедура Дополнительный процедуры предсказал диаметр (нм) Время задержки (сек) Время задержки (мин) предсказал диаметр (нм) измеряется диаметр ± SD (нм) 4 × HG 6 × HG 12 × HG 24 × HG 100 × HG 1000 × HG 1 0.02 3.5 2 0.03 3.6 3.1 ± 1.3 6.1 6.9 8.4 10,5 16,7 36 3 0,05 3.6 4 0.07 3.7 5 0,08 3.7 2,6 ± 1,1 6.3 7.1 8.7 10,8 17,3 37 6 0.10 3.8 7 0,12 3.8 8 0,13 3.8 9 0,15 3.9 10 0,17 3.9 6.7 7.5 9.2 11,4 18 39 11 0,18 4.0 12 0,20 4.0 13 0,22 4.0 14 0,23 4.1 15 0,25 4.1 3,3 ± 1,5 70,0 7.9 9.7 12,0 19 41 20 0.33 4.3 25 0,42 4.5 30 0,50 4.7 35 0.58 4.9 40 0.67 5.1 45 0,75 5.3 6,4 ± 2 9.1 10,1 12,5 15,5 25 53 60 1.0 5.9 75 1.3 6.4 90 1,5 6.9 105 1.8 7.5 120 2.0 8,0 135 2.3 8.4 11 ± 3 14,4 16,1 20 25 39 84 165 2.8 9.4 195 3.3 10 225 3.8 11 255 4.3 12 285 4.8 13 315 5.3 13 345 5.8 14 375 6.3 14 405 6.8 15 14 ± 5 26 29 35 44 70 150 435 7.3 15 465 7.8 16 495 8.3 16 525 8.8 17 555 9.3 17 585 9.8 18 615 10 18 900 15 20 1200 20 22 20 ± 11 37 42 51 64 102 219 1500 25 23 1800 30 23 2100 35 23 2400 40 23 2700 45 23 3000 50 23 3300 55 23 3600 60 23 25 ± 11 40 45 55 69 109 235 Таблица 1. Oligocluster предсказание размер таблицы. Прогнозируемые диаметры золотых oligoclusters образованные с помощью либо задержки времени или дополнения методов. Прогнозируемая диаметр для метода задержки времени рассчитывается эмпирическую формулу для средний диаметр oligocluster D задержки времени = D 0 + а (1 – е -bt), где D является средний диаметр золотых oligoclusters в нм, D 0 минимальный диаметр (3,5 нм), а является максимальное увеличение размера базовой (20 нм), и б является 0,0021 сек -1, как было показано ранее 16. Прогнозируемая диаметр для надстройки по методу рассчитывается с учетом, что новые наночастицы не могут образовывать с HG, а его наносят равномерно вокруг предварительно сформированные сферические семена, тем самым делая их больше. Ни одна другая предположение не является необходимым. Это можно легко увидеть, что гое диаметр oligoclusters формируется дополнительными метода является , Где с HG и гр Семена концентрации тетрахлороаурат используемые при изготовлении раствора ртути в дополнительными метода и в принятии oligoclusters методом задержки времени, соответственно. Аналогично Семена V HG и V являются соответствующие объемы.

Discussion

Эта рукопись представляет собой подробный протокол для настольной синтеза монодисперсных золотых oligoclusters (рисунок 3). Способ способен производить широкий диапазон размеров простым изменением времени между добавлением HAuCl 4 к щелочным раствором и последующее добавление восстановителя, тиоцианата натрия. Добавление HAuCl 4 до щелочной буферный водный раствора приводит к временной зависимости гидроксилирования HAuCl 4 к гидроксилированного золота (Na + [Аи (ОН 4-х) Cl х] -). Это гидроксилирования результаты менее HAuCl 4 будут доступны, хотя гидроксилирование не идет к завершению, как это представляет собой равновесную реакцию. Зарождение и формирование De Novo золотых мономеров может быть инициирован только HAuCl 4. Гидроксилированные золота способен лишь добавив к существующим наночастиц золота, что приводит к образованию золотых oligoclusters; наша дополненияСпособ использует эту 16. Oligoclusters образованные с помощью метода задержки времени могут быть использованы в качестве затравок при котором гидроксилированных золото наносится, тем самым увеличивая размер посеянных oligoclusters. Семенами рост можно контролировать, изменяя соотношение количества гидроксилированных золота (HG) против синтезированного oligocluster (Рисунок 1). В обоих методах размер частиц легко может быть предсказано, выбрав правильный задержку (рис 2А, Б) или выбрав право начиная семена и правильное соотношение добавленной гидроксилированных золота (HG) (рис 2С). Прогнозы на самых полезных размеров частиц представлены (Таблица 1). Увеличивая размер GSH дериватизированных oligoclusters можно контролировать с помощью электрофореза в более крупные частицы мигрируют все меньше и появляются в частности темнее, чем позже в результате того, что коэффициент экстинкции наночастиц золота увеличивается пропорционально размеру частиц.

<p class="jove_content"> Дополнения метод имеет два ограничения, первое из которых является большое реакционные объемы, необходимые при высоких HG: соотношениях семян. Второе ограничение для надстройки по методу происходит от вышеупомянутой тем, что гидроксилирование HAuCl 4 представляет собой равновесную реакцию и не идет к завершению. Неполным гидроксилирование HAuCl 4 имеет минимальное влияние на дополнительными реакции, когда концентрация семян oligocluster остается высоким. Когда концентрация семян oligocluster низки, как это имеет место при использовании длинный семя задержка времени и высокой HG: коэффициенты семян, влияние unhydroxylated HAuCl 4 может стать значительным. В этих условиях HAuCl 4 способен зародыши синтез новых oligoclusters, в результате чего гетерогенных популяций oligoclusters.

Синтезированного oligoclusters произведенные задержки времени или Add-On метода являются стабильными в течение нескольких недель, только развивается следовые количества осадка золота. Даже после бытьING концентрировали в 300 раз, что oligoclusters остаются стабильными и противостоять агрегации. Золотые oligoclusters описанные здесь также есть дополнительное преимущество, которое позволяет быть сконцентрированы без предварительного получения производных, тем самым позволяя дорогие дериватизирующие агенты, которые будут использоваться в меньших объемах. После дериватизации с глутатиона (GSH), кластеры оставались стабильными до одного года. GSH-производного также обеспечивает сильный отрицательный заряд 13, что делает их противостоять агрегации при воздействии физиологических буферах или животного плазмы, таким образом, что делает их пригодными для экспериментов в естественных условиях. Получение производных может быть достигнуто широкое разнообразие тиоловых групп, содержащий реагенты.

Аменабельности oligoclusters дериватизации с другими тиоловыми содержащий молекул 17,18 обеспечивает удобный и легкий модификации поверхности монослоя, таким образом, контрольный химию поверхности и реакционной способности oligoclusters. Другие химические вещества, используемые в настоящем Протоколе CAп легко заменить аналогичными химическими веществами, не ухудшая синтез. Это включает в себя замену буры с другими щелочными буферами (например., Карбонат) и тиоцианата натрия для других солей тиоцианатных (например., KSCN).

Главным атрибутом этого протокола является его простота, которая должна быть подчеркнуто. Только вес масштаба миллиграмм и магнитной мешалкой требуется производить коммерческие качество золотых oligoclusters которые могут быть использованы для продвинутых биологических и материальных применений. Широкая применимость чему способствует широкий диапазон размеров, чем могут быть получены и по монодисперсности. Кроме того, в доме производство является низкая стоимость.

В oligoclusters особенно ценны для изучения проницаемости базальных мембран и барьеров крови. Они могут быть легко управляются с физиологическим раствором через различные маршруты и отслеживать в естественных условиях 19-21. Полученные образцы тканей могут быть впоследствии исследовали подэлектронный микроскоп 16,22. Кроме проницаемости, распространение био обеспечивает ценные фармакологические информация и администрация смеси oligoclusters разных размеров дает ценную информацию о размере зависимого размещения частиц внутри тела 23-25. Наконец, из-за их уникальной структуры они не проявляются локализованные поверхностного плазмонного резонанса (LSPR) возможно что делает их идеальными кандидатами для флуоресцентного мечения, которая не является легко достижимым в золотых наночастиц, потому что интерференция между LSPR и флуорофором результатов в почти полной тушению флуоресценции 26 ,

開示

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

ТК признает поддержку со стороны Агентства Словении исследований (ARRS, предоставляет БИ-США / 13-14-040, и J3-6803). ОС подтверждает поддержку от Национального института здоровья (NIH) гранта RO1HL49277.

Materials

125 ml Wheaton glass bottles Fisher Scientific SC-06-404F
Borax     (Na2B4O7·10H2O) Fisher Scientific S25537
Gold(III) Chloride trihydrate Sigma Aldrich G4022
Sodium thiocyanate Sigma Aldrich 251410
Sodium carbonate Sigma Aldrich S7795
Glutathione Sigma Aldrich G4251
Dulbecco's phosphate buffered saline (DPBS) Corning 21-031-CV
Centricon Plus – 70 Millipore UCF703008
Sodium bicarbonate Sigma Aldrich S6014
CF200-Cu Carbon film on 200 mesh copper grids  Electron Microscopy Sciences 71150
10X TRIS/GLYCINE buffer Bio-Rad 161-0734
Any kD Mini-PROTEAN TGX Gel Bio-Rad 456-9033
DOWNLOAD MATERIALS LIST

参考文献

  1. Dreaden, E. C., Austin, L. A., Mackey, M. A., El-Sayed, M. A. Size matters: gold nanoparticles in targeted cancer drug delivery. Ther. Deliv. 3 (4), 457-478 (2012).
  2. Huang, X., Jain, P., El-Sayed, I., El-Sayed, M. Plasmonic photothermal therapy (PPTT) using gold nanoparticles. Lasers Med. Sci. 23 (3), 217-228 (2008).
  3. Notarianni, M., et al. Plasmonic effect of gold nanoparticles in organic solar cells. Sol. Energy. 106, 23-37 (2013).
  4. Jain, P. K., Huang, X., El-Sayed, I. H., El-Sayed, M. A. Noble Metals on the Nanoscale: Optical and Photothermal Properties and Some Applications in Imaging, Sensing, Biology, and Medicine. Acc. Chem. Res. 41 (12), 1578-1586 (2008).
  5. Huang, X., El-Sayed, M. A. Gold nanoparticles: Optical properties and implementations in cancer diagnosis and photothermal therapy. J. Adv. Res. 1 (1), 13-28 (2010).
  6. Cioffi, N., et al. Electrosynthesis and characterization of gold nanoparticles for electronic capacitance sensing of pollutants. Electrochim. Acta. 56 (10), 3713-3720 (2011).
  7. Mikami, Y., Dhakshinamoorthy, A., Alvaro, M., Garcia, H. Catalytic activity of unsupported gold nanoparticles. Catal. Sci. Tech. 3 (1), 58-69 (2012).
  8. González, A. L., Noguez, C., Barnard, A. S. Map of the Structural and Optical Properties of Gold Nanoparticles at Thermal Equilibrium. J. Phys. Chem. C. 116 (26), 14170-14175 (2012).
  9. Neeley, A., et al. Selective Detection of Chemical and Biological Toxins Using Gold-Nanoparticle-Based Two-Photon Scattering Assay. IEEE Trans. Nanotechnol. 10 (1), 26-34 (2011).
  10. An, H., Jin, B. Prospects of nanoparticle-DNA binding and its implications in medical biotechnology. Biotechnol. Adv. 30 (6), 1721-1732 (2012).
  11. Wang, S., Qian, K., Bi, X., Huang, W. Influence of Speciation of Aqueous HAuCl4 on the Synthesis, Structure, and Property of Au Colloids. J. Phys. Chem. C. 113 (16), 6505-6510 (2009).
  12. Britton, H. T. S., Dodd, E. N. Electrometric studies of the precipitation of hydroxides. Part V. Tervalent gold chloride solutions. J. Chem. Soc. , 2464-2467 (1932).
  13. Schaaff, T. G., Knight, G., Shafigullin, M. N., Borkman, R. F., Whetten, R. L. Isolation and Selected Properties of a 10.4 kDa Gold:Glutathione Cluster Compound. J. Phys. Chem. B. 102 (52), 10643-10646 (1998).
  14. Baschong, W., Lucocq, J. M., Roth, J. Thiocyanate gold: Small (2-3 nm) Colloidal Gold for Affinity Cytochemical Labeling in Electron Microscopy. Histochemistry. 83 (5), 409-411 (1985).
  15. De Brouckère, L., Casimir, J. Préparation d’hydrosols d’or homéodisperses très stables. Bull. Soc. Chim. Belg. 57 (10-12), 517-524 (1948).
  16. Smithies, O., et al. Stable Oligomeric Clusters of Gold Nanoparticles: Preparation, Size Distribution, Derivatization, and Physical and Biological Properties. Langmuir. 30 (44), 13394-13404 (2014).
  17. Bartz, M., et al. Monothiols derived from glycols as agents for stabilizing gold colloids in water: synthesis, self-assembly and use as crystallization templates. J. Mater. Chem. 9 (5), 1121-1125 (1999).
  18. Hainfeld, J. F., Slatkin, D. N., Focella, T. M., Smilowitz, H. M. Gold nanoparticles: a new X-ray contrast agent. Br. J. Radiol. 79 (939), 248-253 (2006).
  19. Nam, S. Y., Ricles, L. M., Suggs, L. J., Emelianov, S. Y. Ultrasound and Photoacoustic Monitoring of Mesenchymal Stem Cells Labeled with Gold Nanotracers. PLoS One. 7 (5), (2013).
  20. Jokerst, J. V., Thangaraj, M., Kempen, P. J., Sinclair, R., Gambhir, S. S. Photoacoustic Imaging of Mesenchymal Stem Cells in Living Mice via Silica-Coated Gold Nanorods. ACS Nano. 6 (7), 5920-5930 (2013).
  21. Astolfo, A., et al. In vivo visualization of gold-loaded cells in mice using x-ray computed tomography. Nanomed. Nanotechnol. Biol. Med. 9 (2), 284-292 (2013).
  22. Menk, R. H., et al. Gold nanoparticle labeling of cells is a sensitive method to investigate cell distribution and migration in animal models of human disease. Nanomed. Nanotechnol. Biol. Med. 7 (5), 647-654 (2011).
  23. Kumar, A., Zhang, X., Liang, X. J. Gold nanoparticles: Emerging paradigm for targeted drug delivery system. Biotechnol. Adv. 31 (5), 593-606 (2013).
  24. Paciotti, G. F., et al. Colloidal Gold: A Novel Nanoparticle Vector for Tumor Directed Drug Delivery. Drug Deliv. 11 (3), 169-183 (2004).
  25. Khlebtsov, N., Dykman, L. Biodistribution and toxicity of engineered gold nanoparticles: a review of in vitro and in vivo studies. Chem. Soc. Rev. 40 (3), 1647-1671 (2011).
  26. Nerambourg, N., Werts, M. H., Charlot, M., Blanchard-Desce, M. Quenching of Molecular Fluorescence on the Surface of Monolayer-Protected Gold Nanoparticles Investigated Using Place Exchange Equilibria. Langmuir. 23 (10), 5563-5570 (2007).

タグ

Gold NanoparticlesOligomeric ClustersSize-controlled SynthesisSodium ThiocyanateChloroauric AcidStabilityDerivatizationMembrane PermeabilityBench-top ConditionsAdd-on GrowthCentrifugal FiltrationGlutathione (GSH) Conjugation

Play Video
PDF
DOI
DOWNLOAD MATERIALS LIST
記事を引用
Lawrence, M., Testen, A., Koklic, T., Smithies, O. A Simple Method for the Size Controlled Synthesis of Stable Oligomeric Clusters of Gold Nanoparticles under Ambient Conditions. J. Vis. Exp. (108), e53388, doi:10.3791/53388 (2016).
引用ダウンロード
転載と許可

View Video

✖

To prove you're not a robot, please enter the text in the image below

CAPTCHA Image
Play CAPTCHA Audio
Refresh Image