概要

Asymmetrische Walkway: Roman Behavioral Assay zur Untersuchung Asymmetrische Locomotion

Published: January 15, 2016
doi:

概要

Here, we present a protocol to quantify precise stepping in rodents. Cortical and the spinal central pattern generator signals are required for precise foot-placement during obstructed locomotion. We report here the novel constrained walking task that directly examines precise stepping behavior.

Abstract

Verhaltenstests werden gewöhnlich für die Beurteilung der sensomotorischen Beeinträchtigung des zentralen Nervensystems (ZNS) verwendet. Die raffiniertesten Methoden zur Quantifizierung Bewegungsdefizite bei Nagetieren soll Minute Störungen unbeschränkte Gangoberirdisch zu messen (z. B. Hand BBB-Score oder automatisierte CatWalk). Jedoch kortikalen Eingänge für die Erzeugung von Grund Beförderung auf dem Rücken zentralen Mustergenerator (CPG) hergestellt erforderlich. So ungezwungen Walking Aufgaben testen Bewegungsdefizite aufgrund von Motor kortikalen Wertminderung nur indirekt. In dieser Studie, schlagen wir eine neue, präzise Fuß-Platzierung Bewegungs Aufgabe, die kortikale Eingänge zum Rücken CPG wertet. Eine instrumentierte peg-Weg wurde verwendet, um symmetrische und asymmetrische Bewegungsaufgaben imitiert lateralisiert Bewegungsdefizite zu verhängen. Wir zeigen, dass Verschiebungen von äquidistanten interSchrittLängen von 20% produzieren Veränderungen in den Vorderbein Standphase Eigenschaften während der Fortbewegung mit prefirrte Schrittlänge. Außerdem schlagen wir vor, dass die asymmetrische Gehweg erlaubt Messungen der Verhaltensergebnisse durch kortikale Steuersignale erzeugt. Diese Maßnahmen sind für die Beurteilung der Wertminderung nach dem kortikalen Schäden relevant.

Introduction

Nach Schlaganfall Morbidität in der überlebenden Bevölkerung enthält grobmotorischen Beeinträchtigungen, die eine Herausforderung für die quantitative Auswertung in beiden Menschen darstellen Post Schlaganfall und Tiermodellen von neurologischen Beeinträchtigungen 1. In der klinischen Einstellung werden diese motorischen Beeinträchtigungen mit subjektiven Kriterien, die mehr empfindlich gegen starke anstatt moderate Wertminderung von der Mehrheit der Patienten zeigten gemessen. In ähnlicher Weise sind solche subjektiven Einschätzungen der posttrauma motorisches Verhalten bei Tieren gemeinsam, z. B. das Basso, Beattie, und Bresnahan (BBB) ​​Bewegungsskala Methode 2,3. Während diese subjektiven Bewertungsmethoden Übersetzung zwischen Gangrehabilitation Studien in Vierbeiner Tiermodellen und Menschen zu helfen, werden die Details der motorische Defizite mit Aktivität aus getrennten Muskelgruppen verbunden sind, nicht beurteilt. Darüber hinaus ist die Bewertung der Kraft kortikalen Beitrag zur Fortbewegung, wie die mutmaßlichen Täter von Kraftdefizit Apoplexie,kann nur erhalten indirekt auch mit den meisten neuen automatisierten quantitativen Methoden 4,5 werden, da sie auf offenem Feld oder lineare Fuß Aufgaben verlassen. Diese Aufgaben erfordern nicht kortikalen Beitrag und kann von den neuronalen Mechanismen des Rückenmarks, das heißt der zentralen Mustergenerator (CPG) Netzwerk, das in den meisten Tiermodellen von Nervenschäden verschont wird, beispielsweise spinalisierten Tiere 6 durchgeführt werden. -. 8 . Wesentliche kortikalen Beitrag zu diesen Rückenmechanismen wurde experimentell in Aufgaben, die erwarteten Haltungsanpassungen 9 und 10 erreichen, sowie präzise Schritt 10 erfordern in Verbindung gebracht.

Darüber hinaus ist den meisten neurologischen Schäden asymmetrische; bewirkt zum Beispiel Schlaganfall hemiparesis dh Schwäche auf einer Seite des Körpers, die in asymmetrischer Gang 11 ergibt. – 14. Die Asymmetrie der hemiplegischen Gangart wird durch asymmetrische spatiotempor hergestelltal Muskelaktivierung am deutlichsten in der Verkürzung des Extensor-assoziierten Standphase und der Verlängerung des Flexor-assoziierten Schwungphase des Schrittzyklus auf der paralytischen Seiten 15,16 manifestiert. Dieser Trend hat sich noch nicht in einer Reihe von Bewegungsgeschwindigkeiten bei gesunden oder paretischen Tieren erforscht. In der aktuellen Studie, verwendeten wir die Analyse von Phasendauer Merkmale 17, die die Beziehung zwischen der Dauer der Schaukel oder Standphase als Funktion der Zyklusdauer in jedem Schritt beschreibt. Das erhaltene lineare Regressionsmodell wurde dann weiter mit einer Analyse der Asymmetrie in allen Gliedern beschrieben.

Berichten wir eine neuartige kostengünstige Methode zur Bestimmung der Aktivität von absteigend kortikalen Eingänge im Motorsystem Vierfüßlers Tiere auf der Grundlage eines präzisen Bewegungsschritt Aufgabe. Diese Aufgabe wird entworfen, um die Motorkortex durch die Einführung Anforderungen an Fußplazierung über einen natürlichen Bereich von Gehgeschwindigkeiten herauszufordern. Außerdem, Fuß-Platzierung Anforderungen werden manipuliert, um den linken oder rechten Seite des Motorsystems bevorzugt herauszufordern. In einer ähnlichen Bewegungsaufgabe, Metz & Whishaw (2009) untersuchte die Ausfallraten, die Anzahl der verpassten Schritte auf unregelmäßige Sprosse Gehweg, bei Ratten. Unsere Methode ist komplementär zu dieser früheren Studie, und es beschreibt die Qualität der Phasensteuerung in "erfolgreichen" Schritte 18.

Protocol

Die folgende Trainingsparadigma verwendet die Analyse von Phaseneinstellungen des durchschnittlichen erwachsenen Sprague-Dawley-Ratte. Bitte stellen Sie sicher, dass die hier beschriebene Protokoll ist in Übereinstimmung mit Ihren Institutional Animal Care-Richtlinien. Alle Verfahren in dieser Studie wurden in Übereinstimmung mit der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) und Büro für Laboratory Animal Welfare (OLAW) an der West Virginia University School of Medicine durchgeführt und hält sich a…

Representative Results

Abbildung 2 zeigt die Analyse der Asymmetrie in den Bewegungsaufgaben für einen einzigen Vertreter unterliegen. (- 400 g, 3 250), wurden die Werte für alle Bedingungen unter Verwendung von Gleichung 1 und 2 von allen Probanden individuell (Abbildung 2) und von zusammengesetzten Daten von 8 weiblichen Sprague-Dawley-Ratten ermittelt. Im Allgemeinen ist die Modulation der Vordergliedmaße Standphase war weniger für die Seite, auf die di…

Discussion

The rationale for this study was to develop a behavioral task that quantitatively assesses the changes in precise control of asymmetric locomotor behaviors. The existence of the spinal CPG has been functionally demonstrated for some time20, but the anatomical and functional characteristics that describe its mechanism as well as its modulatory inputs from descending or sensory feedback pathways have not been characterized until the past decade6,21,22. The current consensus is that the intrinsic spina…

開示

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Kriss Franklin, Amanda Pollard and Justine Shaffer assisted in animal training and data collection. Sarah Freeman and Alisa Ivanova contributed to data analysis. This study is supported by WVU School of Medicine Start-Up, NIH/NIGMS U54GM104942, and NIH CoBRE P20GM109098.

Materials

MATLAB® R2013a MathWorks Design platform for custom videoa video annotation software
Sony HDR-CX380/B High Definition Handycam Sony 27-HDRCX330/B Video acquisition device.
Jif Creamy Peanut Butter – Gluten Free 454 g J.M. Smucker Company NA Food reward stimulus.
Sucrose Tablet – Chocolate 1800 g TestDiet 1811256 Food reward stimulus.
Manzanita Wood Gnawing Sticks BioServe W0016 For presentation of food reward stimulus.

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記事を引用
Tuntevski, K., Ellison, R., Yakovenko, S. Asymmetric Walkway: A Novel Behavioral Assay for Studying Asymmetric Locomotion. J. Vis. Exp. (107), e52921, doi:10.3791/52921 (2016).

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