原稿は、マウスで異所性心移植を実行するために必要な手順について説明します。
この技術は最初のコリー、ウィンとラッセルによって報告されて以来、現在では40年以上です。それは中に習熟し、この技術を利用する他のラボのために数年かかったが、それは現在では広く世界中の多くの研究室で使用されます。独自の技術への重要な改良点は、開発され、新見によって2001年に報告された。ここで説明する私たちの中心部にある3外科医(Plenter、グラツィア、ピエトラ)の手に10年以上にわたって進化してきた技術である。これらの技術は、現在、外科医と研究者の若い世代に渡されている。
詳細我々は他の人がこの非常に有用なモデルを使用することができる場合があり、このような方法で、ここに関係するように努力する – 主に新見の経験に基づいて、使用される手順は、細部に進化してきた。新見のように、我々は学習へのビデオの援助が初心者のための貴重な資源であることを発見した。
時代には、マウスにおいて、腎臓、肺、肝臓および膵臓の移植を行うことが可能である場合、1973 1-4歴基本臓器移植および免疫学の研究の基礎は、マウスにおける異所性心臓移植モデルのままである。現在に至るまでいくつかの論文は、この手順の改善/改良5,6を詳細に発表されている。
固形臓器、主に血管新生移植のモデルとして、この手順では、誰にも劣らない。一度マスターして、この手順では、同種の拒絶反応7、慢性血管障害8および虚血再灌流障害9のメカニズムの開発に研究に適しています。
正常にこの手順を学習するためのキーは、他の手術、インストラクターや細部への研修生と注意側の忍耐のようなものです。プロセスの開始時に新しい外科医は、そのTを見つけるちょっと各移植に多くの時間を過ごすことになります。経験が得られるように、外科倍、したがって虚血は、大幅に削減されます。すべてのステップの詳細に注意を払って、遅かれ早かれ、成功につながる。
インストラクターは渡すために最善を行うことができ、かつ、これらの手術の間に遭遇する可能性のあるピットの滝のすべてを予測する一方で、「創造的な」訓練生は、おそらく、自分のいくつかを見つける!
手順は以下の通りの基本です。大動脈弓昇順ドナーは、受信者の腹部下大静脈(IVC)に吻合、端側である受信者腹部大動脈およびドナー肺動脈に吻合、端側である。血液は冠動脈へのドナーの大動脈を通して逆行で受信者の大動脈から流れます。血液は、それが冠静脈洞を介して右心房に排出する冠状系を介して流入した後、右心室に送り込まれ、受信者IVCに肺動脈を介して。このようにして、冠動脈のシステムは、動脈血を供給され、洞調律は、再灌流の1〜2分以内に移植片に戻ります。心臓の左室が下にロードされた本質的圧力であるため、左心室自由壁は、時間の経過とともに萎縮します。
この手術法は、習得することは容易ではないが、一度マスターして、強力な研究ツールである。研究者/外科医は技術の一貫性により、細部へのこだわりによって報われる。学習段階の間に忍耐が鍵となります。新見3によって発行され、ビデオベースの学習ツールを用いてそれが最初に成功した手順を達成するための試みが11〜90%の成功率を達成するために78試行の平均をとる。動画は、手術11,12の重要な教育ツールとなっている。
トラブルシューティング
吻合から出血は発生し、これが原因縫合糸で正しい緊張の欠如、または少なすぎ、縫合糸のいずれかに思われることがあります。このようなゲルフォームなどの凝固誘導剤は、リークを低減するために有用になることができますが、我々は、外科医が得意技に頼ることをお勧めします。混雑した非拍動している心臓は、特に静脈側にあまりにもタイトな吻合に最も一般的である。非beatiNG、非灌流移植片は、一般的に冠状動脈の1に移動した気泡が原因で発生します。これは、血管への気泡の侵入を避けるために湿らせたツーぬれ場を維持することが重要である。
技術の限界
研究者は、完全に機能する心臓への影響を調査したい場合、この手法は適していない。それは、現在までに実行することは不可能証明された同所移植技術を必要とするでしょう。
既存の方法に関して意義
1は、マウスで完全に血管新生し、固形臓器移植への影響を研究することを希望した場合、心臓モデルは、おそらくマスターするのが最も簡単です。肺、腎臓および肝臓移植のマウスモデルが存在するが、多くを学ぶことが困難と完璧ですか。
プロトコル内での重要なステップ
それは非常に重要であることを全層P血管外膜と縫合針の内膜を含むロバが達成される。エッジのEvertionもシールや吻合の治癒を助ける内膜への内膜の接触があることを保証します。別の極めて重要な要因は、吻合縫合線の張力も最適であることを保証することである。緩すぎると不可逆的な漏れがあるでしょう、きつすぎると流れるように狭窄が発生します。動脈側の場合は混雑の心はなり静脈側にあれば、これは、移植片の不十分な灌流になります。
なかでも、繰り返し、手順や細部への継続的な注意の一貫性は素晴らしい結果とfundableと発行可能なデータが得られます。
The authors have nothing to disclose.
著者は、私たちの研究室で彼の前の仕事のために博士ビアジオピエトラに感謝したいと思います。
Instrument | Roboz # | Fine Science Tools # | Arosurgical # |
Straight micro-dissecting forcep #5 | RS-5015 | 11295-51 | |
Curved micro-dissecting forcep #7 | RS-5047 | 11297-00 | |
Curved serrated forcep | RS-5137 | 11052-10 | |
Vannas micro-dissecting scissors, short | RS-5610 | 09.140.08 | |
Micro-dissecting scissors, straight, sharp, long | 11.602.11 | ||
Micro spring handle needle holder | 11.549.15 | ||
Straight mosquito forcep | 91308-12 | ||
Micro-dissecting scissors, straight, blunt | RS-5962 | 14078-10 | |
Micro-dissecting scissors, curved, blunt | RS-5981 | 14079-10 | |
Micro retractor | RS-6540 | ||
Instrument tray, 10” x 6 ½” x ¾” | RT-1350S | ||
Silk suture, 5/0, 22.5m spool | 18020-50 | ||
Suture | |||
10/0 nylon | T4A10Q07 | ||
5/0 silk | E19A05N | ||
Gloves | Drapes | ||
Biogel from Medex Supply | Precept, #64-9012-9 | ||
Syringes | Cotton applicators | ||
B-D 1cc insulin, #329424 | Fisher-brand, #23-400-100 | ||
Povidone-Iodine swabs | |||
PDI, #B40600 | |||
4/0 Cotton ties | |||
Domestic cotton autoclaved with instruments |