Mürin Heterotopik Kalp Nakli Tekniği

Tüm hayvanlar IACUC onayı altında Colorado Barbara Davis Center Hayvan Tesisi Üniversitesi'nde patojen içermeyen koşullar altında muhafaza ve NIH talimatlarına göre bakım için. Prosedür başladıktan sonra anestezi derinliği başlangıçta ayak tutam tarafından ve solunum hızı uyulması tarafından değerlendirilir. 1.. Donör Kalp Hasat (60 mg / kg IP) pentobarbital enjekte edilerek verici fare anestezisi. 4-yollu koltuk ile fare hareketsiz ve kürk klibi. Alkol ile cildinizi silin. Cilt uzak diseksiyon sonra, diyaframa bir enine kesi sadece aşağı yaparak karın boşluğu açmak. Kot yerleştirilmesinden diyafram posterior kesin ve anterior ve süperior kalbi açığa ön göğüs duvarını kaldırın. Göğüs, sol ve sağ tarafta arka yan göğüs boşluğuna kadar kesilmiş tam bir kalınlığa uzatın. Yalıtmakinferior vena kava (IVC) ve sağ atrium içine yerleştirilmesi bitişik IVC'da etrafına gevşek 5-0 ipek sütür koyun. IVC içine, 4 ° C, heparinize edilmiş tuzlu su (200 U / cc) 1.0 cc enjekte edilir, daha sonra 5-0 ipek dikiş ile bölmek ve damar ligate. Benzer şekilde sağ superior vena kava (rSVC) izole ve 5-0 ipek sütür ve bölmek ile ligasyonu. Yavaşça hayvanların sağ tarafına doğru kalp rulo ve sol superior vena kava (lSVC) izole, bir 5-0 ipek sütür ile bağlanır ve sol pulmoner arter açığa bölün. Timüs uzakta ana pulmoner arter (PA) ve sol ve sağ PA şubelerinden disseke ve aort arkı artan küt iken ıslak bir gazlı bez altında kalp sabitleyin. Çevreleyen dokuların aort arkı ücretsiz teşrih künt. Mikro-makas sağ brakiyal-cephalic arterin aorta proksimalinde bölmek için kullanılan, yani kalp ve bölünme arasındaki hiçbir dal olmamalıdırAort noktası. Arkus Bu bölümde implant işlemi için arteriyel manşeti oluşturur. PA gövde ve PA sağ ve sol dalları maruz inferiorda aort manşet yansıtacak. Uzakta mümkün olduğunca kalpten çevre dokulardan sağ ve sol PA dalları teşrih künt. Bu çevre dokulardan PA gövde kolay diseksiyon sağlar. Olarak distal onun çatallanmaya mümkün, sadece proksimal olarak PA gövde bölün. Pulmoner arter Bu bölümde implant işlemi için venöz manşeti oluşturur. Kalp ve kravat tabanı etrafında bir 5-0 ipek sütür yerleştirin. Bundan sonra, kalp tabanında serbest kesilmiş ve 4 ° C tuzlu su içine yerleştirilir. Toplam hasat süresi yaklaşık. 10-15 dk. 2.. Kalp İmplant Tekniği Pentobarbital ile alıcı fareler anestezi (60 mg / kg IP başlangıç ​​dozu, / kg IP ek doz 25 mg gerekirse). Kürk Klip ve4-yollu koltuk ile fare hareketsiz ve steril bir şekilde povidon-iyot ve drape ile cildi hazırla. 2 cm orta hat dikey karın kesi yapmak ve karın boşluğuna girin. Superiorda bağırsak geri çekin ve göğüs üzerinde dışsallaşmış. Dava boyunca steril Nemli gazlı bez (steril serum fizyolojik) sarılı tutun. Böbrek damarlarının altındaki abdominal aorta ve vena kava (IVC) izole ve 4-0 pamuk aort etrafındaki bağları ve anastomoz için VKİ üstün sonra aşağı yerleştirin. Alanında herhangi bir lomber gemileri tespit ve 10-0 naylon sütür ile lige. Pamuk bağları düğüm, birinci alt üstün izledi. Bu şekilde, bir kan aortotomy daha kolay hale aort içinde tutulmaktadır. Aort lümeni girmek için bir 30 G iğne ile aortotomy Form. Yaklaşık 2 mm'lik bir uzunluğa ince mikro makas ile kesi uzatın. Bu kesi uzun boyunca düz bir çizgi yapılırGeminin uzanımının oluşturduğu ekseni. Aşağıdaki şekilde alıcı aorta verici aort yan anastomoz bir son yapın. Donör aort ve alıcı aort ve kravat kesi alt açısına 10-0 naylon dikiş kalmak dikiş yerleştirin. Donör aort ve abdominal aorta ve kravat kesi üstün köşesinde birinci karşısında ikinci 10-0 naylon yerleştirin. Aort yan duvarında üstün inferior için çalışan bir dikiş hattı yapmak ve önceden yerleştirilmiş kalmak ilmek karşı kravat. Eğer dikiş olarak birlikte intimas (damar iç yüzeyi) getirmek için emin olun. Sonra bir koşu moda ve kravat medial tarafını dikin. Her iki tarafında birinci ve son dikiş mümkün kalmak dikiş kadar yakın yerleştirilmelidir. Sonra 5 dikiş yaparak toplamda bu ikisi arasında 3 eşit aralıklı dikiş hedefliyoruz. Aşağıdaki şekilde alıcı IVC için verici pulmoner arter yan anastomoz bir son yapın. Puncture 30 G iğne ile IVC'nin ve yakl kesi uzatmak. Ince mikro makas ile 2 mm. Bu kesi kabın uzunlamasına ekseni boyunca düz bir çizgi yapılır. 10-0 naylon IVC'da kesi alt köşesine donör pulmoner arter kravat. Donör arter ve IVC'da ve kravat kesi üstün köşesinde birinci karşısında ikinci 10-0 naylon yerleştirin. Pulmoner arter ve IVC'da ve kravat arasında çalışan bir dikiş hattı yapmak. Her iki tarafında birinci ve son dikiş mümkün kalmak dikiş kadar yakın yerleştirilmelidir. Sonra 7 dikiş yaparak toplamda bu ikisi arasında 5 eşit aralıklı dikiş hedefliyoruz. Distal 4-0 pamuk tie yeniden kurulması venöz akışını bırakın. Venöz anastomoz hemostaz gözlenmiştir sonra yakın 4-0 pamuk tie yavaş yavaş gevşek ve arteriyel anastomoz hemostaz için görülmektedir. Her iki anastomozlar güvenli olarak kabul edilir zaman, c çıkarınotton fare bağlar. Karın bağırsak dönün. Karın duvarı çalışan bir moda 5-0 İpek sütür kullanarak iki kat olarak kapalıdır. Kapanması üzerine sıvı tedavisi gibi karın içine steril, ılık normal tuzlu bir 1.0 ml puşe ve normal tuzlu 0.8 ml operasyon sonrası deri altına enjekte edilir. Hiçbir diğer destekleyici tedbirler ameliyat sırasında gereklidir. Bir ısınma battaniye hayvan kurtarın. Toplam implant süresi yaklaşık. Yeni başlayanlar için 90-120 dakika, tecrübesi ile 45-60 dk. Buprenorfin analjezi, 0.05 mg / kg, SC, prosedürün başında 0.1-0.2 ml ve 72 saat sonrası-op için her 6-12 saat yönetmek. 3.. Greft değerlendirme Trans-abdominal palpasyonla günlük greft fonksiyonu değerlendirmek. Bir intraperitoneal enjeksiyon verilecek sanki fare tutun. Yavaşça karın duvarına karşı bir işaret parmağının ucuna basarak ve dayak str tespitgreft ength ve düzenlilik. 0 palpasyon Kalitesi 4 arası bir puan (normal genlik ve frekans) Give (non-dayak greft reddetti). ÖNEMLİ NOTLAR: Tüm enstrümanlar, sterilize steril eldiven işlem boyunca giyilir ve steril bir alan korunur. Verici ve alıcı ameliyatları, bir operasyon mikroskopunun kullanılması ile gerçekleştirilir. Anastomozlar "temiz" olduğundan emin olun. Bu dikiş yerleştirirken arka duvarları yakalanmış değil olmasıdır. Bu önemli bir daralma felci-uzuv hind başarısız bir greft ve aşırı durumlarda bu olacak daha büyük olasılıkla sonuç akmasına neden olacaktır. Ayrıca tam kalınlıkta damar adventitianın ve dikiş iğnesinin intima elde edilir dahil geçer hayati önem taşımaktadır. Kenarlarının Evertion ayrıca sızdırmazlık ve anastomoz iyileşmesi yardımcıları intima-to-intimada temas, var olmasını sağlar. Bir diğer hayati önemli gerçekveya anastomoz dikiş hatlarının gerilimi de en uygun olduğunu garanti etmektedir. Çok gevşek ve geri döndürülemez sızıntı olacak, çok sıkı ve akış darlık neden olur. Venöz tarafında bir sıkışık kalp neden olur ise, arteriyel tarafında bu, greft düşük perfüzyon neden olacaktır.