쥐 이소성 심장 이식 기술

모든 동물은 IACUC 승인 아래 콜로라도 바바라 데이비스 센터의 동물 시설의 대학에서 무균 조건 하에서 보관 및 NIH의 지침에 따라 마음에 든다고했다. 절차가 시작되면 마취의 깊이는 처음에 발가락 핀치에 의해 호흡 속도의 준수에 의해 판단된다. 1. 기증자 심장 수확 (60 ㎎ / ㎏ IP)을 펜토 바르 비탈을 주입하여 기증자 마우스를 마취. 4 방향 감금하여 마우스를 고정화 및 모피 클립. 알코올로 피부를 닦아냅니다. 피부를 멀리 해부 후 격막 횡 절개 단지 열등함으로써 복강을 열고. 늑골 삽입에 다이어프램 후방을 차단하고 전방과 우량 마음을 노출 전방 흉벽을 들어 올립니다. 가슴의 왼쪽과 오른쪽에있는 후방 측면 흉강을 잘라 전체 두께를 확장 할 수 있습니다. 격리하대 정맥 (IVC)과 우심방으로의 삽입에 인접한 IVC 주변의 느슨한 5-0 실크 봉합사를 놓습니다. IVC에 4 ° C 헤파린 식염수 (200 U / CC)의 1.0 CC를 주입 후 5-0 실크 봉합사와 분열과 혈관을 결찰. 비슷한 방식으로 오른쪽 우수한 대정 맥 (rSVC)를 분리하고 5-0 실크 봉합사 및 분할로 결찰. 부드럽게 동물의 오른쪽을 향해 마음을 굴러 왼쪽 우수한 대정 맥 (lSVC)를 분리, 5-0 실크 봉합사로 결찰 왼쪽 폐의 동맥을 노출 나눕니다. 흉선은 거리의 주요 폐동맥 (PA)와 왼쪽과 오른쪽 PA 지점에서 해부 및 대동맥 궁을 상승 무디게하는 동안 젖은 거즈 아래에 마음을 고정합니다. 주변 조직의 대동맥 궁 무료 해부 무딘. 마이크로 가위가 오른쪽 상완 – 두부 동맥 대동맥 근위부를 구분하는 데 사용되는, 즉 심장과 부문 사이에 지점이 없어야합니다대동맥의 포인트. 대동맥이 섹션에서는 임플란트 처리를위한 동맥 커프를 형성한다. PA 트렁크와 PA의 왼쪽과 오른쪽 지점을 노출 하방 대동맥 커프를 반영합니다. 멀리 가능한 한 마음에서 주변 조직에서 왼쪽과 오른쪽 PA 지점을 해부하다 무딘. 이 주변 조직에서 PA 트렁크 쉽게 절개 할 수 있습니다. 같은 원심의 분기점에 가능한 단지 근위와 PA 트렁크를 나눈다. 폐동맥의이 섹션에서는 임플란트 프로세스의 정맥 팔목을 형성한다. 마음과 넥타이의 기지 주변 5-0 실크 봉합사를 놓습니다. 마음은 그 기본에서 무료로 절단하고, 4 ° C의 식염수에 배치됩니다. 총 수확 시간이 약입니다. 10 ~ 15 분. 2. 심장 임플란트 기술 펜토 바르 비탈로받는 생쥐를 마취 (60 ㎎ / ㎏ IP 초기 용량 / kg IP 보충 량 25 ㎎을 필요한 경우). 모피 클립과4 방향 감금하여 마우스를 무력화하고 멸균 방식으로 포비돈 – 요오드와 드레이프로 피부를 예비 학교. 2cm의 중간 선 수직 복부 절개를 복강을 입력합니다. 우량 창자를 집어 가슴에 구체화. 케이스를 통해 멸균 촉촉한 거즈 (멸균 식염수)에 싸서 보관하십시오. 신장 혈관 아래의 복부 대동맥과 하대 정맥 (IVC)를 분리하고 4-0면 대동맥 주위 관계와 문 합부에 IVC 우수한 다음 열등을 배치합니다. 필드 내의 허리 혈관을 확인하고 10-0 나일론 봉합사로 결찰. 면 넥타이 매듭, 먼저 열등는 뛰어난 하였다. 이 방법으로 몇 가지 혈액 aortotomy 쉽게 만드는 대동맥에서 유지됩니다. 대동맥의 루멘을 입력 30 G 바늘로 aortotomy를 형성한다. 대략 2 mm의 길이에 미세한 마이크로 가위로 절개를 확장합니다. 이 절개 긴 따라 직선으로 이루어진다용기의 itudinal 축. 다음과 같은 방식으로받는 사람의 대동맥에 기증자의 대동맥 측 문합에 끝을 확인합니다. 기증자의 대동맥과받는 사람의 대동맥과 넥타이 절개의 떨어지는 각도에 10-0 나일론 봉합사 숙박 스티치를 놓습니다. 기증자의 대동맥과 복부 대동맥과 넥타이에 절개의 우수한 코너의 첫 번째 반대 제 10-0 나일론을 놓습니다. 대동맥의 측면 벽에 뛰어난에서 열등에 실행 봉합 라인을 확인하고 이전에 배치 숙​​박 스티치에 넥타이. 당신이 스티치로 함께 intimas (내부 용기면)을 가지고해야합니다. 그런 다음 실행중인 패션과 넥타이 안쪽면을 봉합. 각 측의 처음과 마지막 스티치 가능한 숙박 바늘에 가깝게 배치한다. 그런 다음 5 바늘의 총을 만드는 두 가지 사이에 3 균등하게 스티치를하는 것을 목표로하고 있습니다. 다음과 같은 방식으로받는 사람 IVC에 기증자의 폐 동맥 측 문합에 끝을 확인합니다. Punct우레 30 G 바늘 IVC와 약에 대한 절개를 확장 할 수 있습니다. 미세한 마이크로 가위로 2mm. 이 절개 용기의 종축을 따라 직선으로 이루어진다. 10-0 나일론으로 IVC의 절개의 하부 모서리에 기증자의 폐 동맥을 묶어. 기증자의 동맥과 IVC와 넥타이 절개의 우수한 코너의 첫 번째 반대 제 10-0 나일론을 놓습니다. 폐동맥과 IVC와 넥타이 사이의 실행 봉합 라인을 확인합니다. 각 측의 처음과 마지막 스티치 가능한 숙박 바늘에 가깝게 배치한다. 그런 다음 7 바늘의 총을 만드는 두 가지 사이에 5 균등하게 스티치를하는 것을 목표로하고 있습니다. 원심 4-0면 넥타이 재 구축 정맥의 흐름을 놓습니다. 정맥 문합의 지혈이 관찰되면 근위 4-0면 넥타이는 점차 느슨해 및 동맥 문합은 지혈에 관찰된다. 모두 문합이 안전한 것으로 간주되는 경우, C를 제거년 otton 마우스에서 넥타이. 복부에 창자를 반환합니다. 복부 벽은 실행 방식 5-0 실크 봉합사를 사용하여 두 층으로 닫힙니다. 폐쇄시 유체 인공 호흡으로 복부에 멸균, 따뜻한 생리 식염수 1.0 ml의 알약을 관리하고, 생리 식염수 0.8 ml의 수술 후 피하로 주입된다. 다른 지원 조치는 수술하는 동안 필요하지 않습니다. 온난화 담요에 동물을 복구 할 수 있습니다. 총 주입 시간이 약입니다. 초보자를위한 90 ~ 120 분, 경험이있는 45 ~ 60 분. 부 프레 노르 핀 진통제, 0.05 ㎎ / ㎏, SC, 프로 시저의 시작 부분에서 0.1 ~ 0.2 ㎖ 및 72 시간의 수술 후마다 6 ~ 12 시간을 관리 할 수​​ 있습니다. 3. 이식 평가 트랜스 복부 촉진으로 매일 이식 기능을 평가합니다. 이 복강 내 주사를 부여하는 것처럼 마우스를 누르고 있습니다. 조심스럽게 복부 벽에 집게 손가락의 끝을 눌러 박동 STR를 확인이식의 ength 및 규칙. 0으로 촉진 질 4의 점수 (표준 진폭과 주파수)를 제공 (비 박동는 이식 거부). 중요 사항 : 모든 악기는, 살균 멸균 장갑 절차 전반에 걸쳐 착용하고 멸균 필드가 유지됩니다. 도너 및받는 수술이 운영 현미경을 이용하여 수행된다. 문합은 "깨끗한"있는지 확인합니다. 즉, 바늘을 배치 할 때 다시 벽 적발되지 않습니다이다. 이것은 상당한 수축이 마비 사지에게 뒷다리에 실패한 이식 및 극단적 인 경우가 더 많은 것보다는 가능성이 결과를 흐르게됩니다. 또한, 전체 두께가 혈관 외막 및 봉합 바늘의 내막이 달성 등의 전달하는 매우 중요합니다. 가장자리의 Evertion는 밀봉 및 문합의 치유에 도움 내막 – 투 – 내막 연락이 있다는 것을 보장합니다. 또 다른 매우 중요한 사실또는 문 합부 봉합선의 긴장은 또한 최적의 것을 보장하는 것입니다. 너무 느슨하고 돌이킬 수없는 누수가있을 것입니다, 너무 꽉 흐름에 협착이 발생합니다. 정맥 측에 혼잡 한 마음이 발생할 경우 동맥 측이, 이식의 가난한 관류 될 것이다.