ラット中枢神経系および末梢リンパ節の組織切片での免疫組織化学的解析

高度なハイスループットの使用にもかかわらずmethylome、トランスクリプトームまたはプロテオームさえレベルで実行解析、免疫染色は、組織試料、細胞培養物又は細胞塗抹標本に直接タンパク質検出のための黄金の標準のままです。局在/分布パターンを明らかにすることによって、免疫組織化学（IHC）は、相対比と標的タンパク質の地形的相互関係を評価し、さらにそれらの生物学的活性を示すことができます。したがって、IHCは広く、診断、治療の評価のために、 例えば 、臨床研究のためなど病気のメカニズム、動物モデルにおける機能と表現型の変化の研究を利用しています

基本的に組織学、病理学、生化学および免疫を備え、IHCが大幅に蛍光標識した抗体は感染組織¹に肺炎球菌抗原を同定するために初めて使用された1941年以来進めてきました。 VIHCによる細胞製品およびコンポーネントのisualizationは、その特定の抗原（Ag）からに対する抗体（ABS）の結合に基づいています。フルオロフォアタグ付けされた抗体を使用するほかに、免疫反応はまた、ペルオキシダーゼ^2,3またはアルカリホスファターゼ⁴のような酵素を使用して可視化することができます。放射性標識は、オートラジオグラフィーによって可視化しながら、さらに、金コロイドタグ抗体^5は 、光と電子顕微鏡の両方により特異的な抗原-抗体相互作用を検出するために使用されます。

Agを抗体の免疫反応は、直接的および間接的な方法によって検出することができます。それは直接標識一次Absの^6を使用し^ていますように直接的な方法は、より速く、より簡単な本質的です。しかし、感度の大幅な不足のためには、間接的な方法は、直接のものに好適です。二段階の間接検出手順は、最初のように、非標識一次腹筋を必要とし、第二層⁷として、主要な腹筋に対して向けられた二腹筋標識。信号増幅は、さらに二次抗体に結合する酵素 – 結合された第三抗体（三段間接法）を含むことによって達成することができます。一般的に使用される間接的な検出方法は、アビジン – ビオチンペルオキシダーゼ抗ペルオキシダーゼ（PAP）です。あるいは、アルカリホスファターゼantialkalineホスファターゼ（APAAP）複合体ではなく、PAP法を用いることができます。特に、アルカリホスファターゼ（AP）メソッドは、免疫ペルオキシダーゼ法⁴よりもさらに敏感であるように思われます。アビジン – ビオチン複合体（ABC）法は、標識アビジン – ビオチン複合体（LAB）のいずれかとの組み合わせで、ビオチン化二次抗体を使用し、またはストレプトアビジン – ビオチン複合体（SLAB）標識しました。検出感度はさらにペルオキシダーゼまたはアルカリホスファターゼ⁸で標識したアビジンを含むことによって増大させることができます。使用中の他の検出方法は、ポリマー標識、チラミン増幅および免疫ローリングサークル⁹です。特に、別の検出方法は、同じ組織内の複数のAgの検出のために組み合わせることができここに提示1978年^4。同時二重免疫染色で初めて報告されたサンプルは、それぞれ、ペルオキシダーゼ結合し、AP結合二次抗体を用いて、ホルマリン固定、パラフィン包埋されたラットCNSおよびLN組織切片で行いました。信号は、それぞれ、3,3'- diaminobencidine（DAB）色素原とファーストブルー（FB）APAAP複合体を用いて可視化しました。