Granulocytes-dépendante boursouflures la peau induite par autoanticorps
概要
Dans le modèle animal décrit dans notre travail actuel, purifié des anticorps IgG contre un tronçon de 200 acides aminés (aa 757-967) de collagène VII sont injectés à plusieurs reprises dans des souris reproduisant le phénotype des cloques ainsi que les caractéristiques de l'histo-et immunopathologiques caractéristiques pour la santé humaine l'épidermolyse bulleuse acquise (EBA)<sup> 1</sup>.
Abstract
Phénomènes auto-immunes surviennent chez des personnes en bonne santé, mais quand la tolérance au soi échoue, la réponse auto-immune peut entraîner une pathologie spécifique. Selon Witebsky postulats, l'un des critères de diagnostic d'une maladie auto-immune est que la reproduction de la maladie chez les animaux de laboratoire par le transfert passif d'autoanticorps. Pour l'épidermolyse bulleuse acquise (EBA), un prototype spécifique d'organe maladie auto-immune de la peau et des muqueuses, plusieurs modèles expérimentaux ont été récemment mis en place. Dans le modèle animal décrit dans notre travail actuel, purifié des anticorps IgG contre un tronçon de 200 acides aminés (aa 757-967) de collagène VII sont injectés à plusieurs reprises dans des souris reproduisant le phénotype des cloques ainsi que les caractéristiques de l'histo-et immunopathologiques caractéristiques pour la santé humaine EBA 1. Véritable maladie répandue est généralement considérée 5-6 jours après la première injection et l'étendue de la maladie est en corrélation avec la dose administrée de la collagen VII IgG spécifiques. Les lésions tissulaires (formation de bulles) dans le groupe expérimental EBA est en fonction sur le recrutement et l'activation des granulocytes par des tissus assortis autoanticorps 2, -4. Par conséquent, ce modèle permet la dissection de la voie de granulocytes-dépendante inflammatoire impliquée dans les lésions tissulaires auto-immunes, comme le modèle ne reproduit que la cellule T-indépendante phase de la réponse auto-immune efférente. De plus, sa valeur est soulignée par un certain nombre d'études démontrant le potentiel blister induisant des anticorps in vivo et étudier le mécanisme de la formation de bulles dans l'EBA 1,3, -6. Enfin, ce modèle va grandement faciliter le développement de nouvelles thérapies anti-inflammatoires dans les maladies provoquées par des auto-anticorps. Dans l'ensemble, le modèle de transfert passif des animaux de l'EBA est un modèle de la maladie accessible et instructif et aidera les chercheurs à analyser non seulement la pathogenèse EBA mais pour répondre fondamentale biologiquement et cliniquementdes questions d'auto-immunité essentielles.
Protocol
Representative Results
Discussion
Le transfert passif d'anticorps chez des animaux de laboratoire est une approche importante pour démontrer leur pathogénicité 7, -12. Les modèles animaux obtenus grâce à cette méthode, en plus d'être l'une preuve indirecte de l'auto-immunité 13, permettre à l'enquête de la phase efférente du mécanisme pathogène. Le modèle de transfert passif d'anticorps induite par des granulocytes-dépendante la peau des cloques sur l'épidermolyse bulleuse acquise (EBA) …
開示
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Les auteurs tiennent à remercier le soutien par des subventions du SI-1281/4-1 Deutsche Forschungsgemeinschaft et ESBIO de la Faculté de médecine de l'Université de Fribourg (pour CS).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | コメント |
| recombinant antigen | The plasmids encoding for the recombinant forms of murine collagen VII are available from the corresponding author. | ||
| immune rabbit serum | www.eurogentec.com | We had New Zealand White rabbits immunized with 200 μg of antigen, 3 times at 2 week intervals. For this purpose we have used the services of Eurogentec S.A., Belgium. | |
| Protein G agarose | Roche Applied Science | 11243233001 | |
| Balb/c mice | Charles River Laboratories | ||
| OCT compound, Tissue-Tek | Sakura Finetek | 4583 | OCT, optimal cutting temperature |
| Cryomold standard | Sakura Finetek | 4557 | 25 mm × 20 mm × 5 mm |
| Cryomold intermediate | Sakura Finetek | 4566 | 15 mm × 15 mm × 5 mm |
| Uni-Link-Einbettkassette | R. Langenbrinck | 09-0503 | Histology processing and embedding cassettes |
| Spezial-Tatowierfarbe Schwarz | H. Hauptnerund & Richard Herberholz GmbH & Co. KG | 71492000 | tattooing paste |
| Tatowierzange TZ1 | EBECO E. Becker & Co GmbH | tattooing device | |
| Heparin | Carl Roth GmbH & Co. | 7692.1 | |
| Formaldehyde 37% | Carl Roth GmbH & Co. | 7386 | |
| Ketamine hydrochloride | Sigma-Aldrich Chemie GmbH | K2753-1G | |
| Xylazine hydrochloride | Sigma-Aldrich Chemie GmbH | X1251-1G | |
| sterile PBS | Biochrom | L182-50 | |
| digital camera | Nikon | Coolpix 5400 | |
| Syringe driven filter unit 0.45 μm | Millipore | ||
| Caliper | Mitutoyo 7309 | 1667338 | Farnell (distributor) |
| disease scoring sheet | example enclosed |
参考文献
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