Çeşitli Kemirgen Modeller sistometrik Analizleri kullanarak Mesane Büyütme için Biyomalzeme Değerlendirilmesi

Cerrahi Yöntem 1. Cerrahi Hazırlık ve Anestezi Gerekli cerrahi aletlerle steril cerrahi alanında ayarlayın: tıraş makaslar, diş ile forseps, ince atravmatik forseps, ince iğne sürücü, gazlı bez, Metzenbaum makas, tenotomi makas, neşter bıçağı, 30 ayar derialtı iğne, serum fizyolojik 1 ml şırınga, dört doldurdu 6-0 polipropilen sütür, 7-0 polyglactin dikiş, 4-0 polyglactin sütür. Indüksiyon odasında izofluran inhalasyonu ile hayvan uyutmak. Cerrahi alan transfer olmadan önce hayvanın tam indüksiyon onaylayın. Inhalasyon anestezisi tüp sürekli anestezi için uygun konumda olduğundan emin olun. Steril örtüyü üzerine hayvan sırtüstü yerleştirin. [Sistometrik analizi için, sistostomi kateter Tünel bölümüne bakınız.] Alt karın kürk kaldırmak için tıraş makası kullanın. Hazırlık olması ile karıntadine ve% 70 etanol. Insizyon öncesi, bir tür buprenorfin (0.05-0.1 mg / kg) olarak analjezik perioperatif ağrı kontrolü için deri altına enjekte edilebilir. 2. Mesanenin insizyon ve Pozlama 1-2 cm (hayvanın büyüklüğüne ve sıçan veya fare olsun bağımlı) deri yoluyla neşter ile alt orta hat kesi olun. Altta yatan bağırsak veya mesane kesmemeye özen rektus ile kesi alt kısmında kesi derinleştirmek. Dişli forseps kullanarak rektus yükseltmesine ve ince Metzenbaum makas ile kas serbest arka yüzeyi incelemek. Cildinizin insizyon uzunluğu boyunca orta hatta kas kalanı sarın. Insizyonel yara (Şekil 1) ile mesane sunun. Mesane genellikle pelvis en bağımlı organ. (Erkek, prostat, aslında daha bağımlı olduğunu ve daha büyüktürsıkıştırılmış mesane.) Yer biri fiyatına mesane arka duvar yoluyla sütür ve sonra başka bir 6-0 polipropilen sütür ile mesane ön duvarı boyunca. Yanal ek sütürler yerleştirin. Bu sütürler bağlamayın. Sütürler gergin tutulur zaman, mesane yaklaşık 1 cm 2 (Şekil 2) boyutlarında bir kare yapılandırma olacaktır. Kolayca mesane dokusu ile çekilebilir bu dikişler çok fazla gerginlik var dikkatli olun. Yaklaşık 1 cm (sıçan mesane içinde 1.5-2 cm) için orta hatta anterior mesane duvarı (mesane kubbesi sadece inferiyor) üzerinden uzunlamasına mesane sarın. 3. İskele ve anastomoz Ince makas kullanarak, mesane defekti yaklaşık alanına ipek iskele kırpın. 7-0 polyglactin sütür kullanarak, çalışan, sürekli olarak iskele bir köşesinde başlar ve mesane için sütürsu geçirmez bir mühür kusurun etrafında her şekilde (Şekil 3) oluşturmak için moda. 30 ayar derialtı iğne ile mesanenin duvarından bunun telkin tarafından steril serum fizyolojik ile mesane doldurularak anastomoz bütünlüğünü test edin. Bir sızıntı bulunursa, bu açığını kapatmak için ek bir kesintiye 7-0 polyglactin dikiş ile kapatılabilir. Karnın içine yeniden mesaneye geri azaltın. 4. İnsizyonel Kapanış Karın duvarının kapatılması öncesinde (<3 mg /% 0.25 kg) lokal anestezi için bupivakain ile rektus kas ve deri altı doku enjekte. Sürekli, çalışan 4-0 polyglactin sütür ile Reapproximate rektus. Sürekli, çalışan 4-0 polyglactin dikiş ile cilt kapatın. Temizleyin ve insizyon (Şekil 4) kurulayın. Anesteziden uyanışı için bir sıcak, temiz bir kafes içine hayvan aktarın. </ol> Sistometrik analizi için sistostomi kateter yerleştirilmesi için uygulanan safhalar aşağıdaki gibidir: 5.. Sistostomi Kateter Tünel Tıraş makaslar, diş ile forseps, ince atravmatik forseps, ince iğne sürücü, gazlı bez, Metzenbaum makas, tenotomi makası, küçük kavisli kelepçe, neşter bıçağı, 6-0 polipropilen, 4-0: gerekli cerrahi aletler steril cerrahi saha ayarlama poliglaktin dikiş, 3-0 ipek sütür (fareler için 4-0 ipek sütür), 18G iğne, 22G künt uçlu iğne, 25G iğne, 1 ml serum fizyolojik dolu şırınga, polietilen boru 50 (PE-50) ~ 10 bir uzunluk için kesilecek cm. Nazik bir aleve maruz kaldığında Flare PE-50 tüp sonunda. Ucundan eritebilir veya lümen (bu "non-alevlendi" sonuna kadar bağlı bir 25G iğne ile serum fizyolojik enjekte ve akış sağlanarak kontrol edilebilir) tıkamak için dikkatli olun. Bu, mesane (Şekil 5) içindeki tüp sürdürmek için bir çapa olarak hizmet eder. <li> olarak yukarıdaki adım 1.2 'de hayvan uyuştur. Skapula ve ventrum üzerindeki alt karın arasındaki hayvanın sırtına hem kürk kaldırmak için tıraş makas kullanın. Betadin ve% 70 etanol ile Prep alanları. Drape üzerine yüzükoyun hayvan yerleştirin. Skapula arasındaki sırtında 1 cm boyunda insizyon olun. Metzenbaum makas kullanarak, düzlemde makas ipuçları yerleştirerek ve bunları ventral karın etrafında bir tünel oluşturmak için yayılarak deri ve alttaki kas arasındaki bir uçak geliştirmek. Hayvan sırtüstü konumlandırın. Karın kesisi yapın ve yukarıdaki adımları 2,1-2,4 mesane maruz bırakmaktadır. Karın içine geri mesane azaltın. Lütfen dorsal cilt insizyonu başlayarak adım 5.6 oluşturduğunuz kendi subkutan tünel içine küçük bir kelepçe yerleştirin. Karnın içine kelepçe uçları ile karın duvarı yoluyla intra-abdominal içeriği, delip korumak için parmaklarını kullanma. S kavrayınmooth kelepçe ile PE-50 boru sonu ve dorsal insizyonla geri çekin. Soğan biçiminde sonunda karın duvarı (Şekil 6) Geçmişte çekti olmadığından emin olun. 6. Sistostomi tüpü yerleştirilmesi Kesiden mesane sunun. Bu noktadan itibaren, mesane hasar veya inflamasyon neden olabilir mesane travma önlemek için ince forseps ile ele alınması gerektiğini olabilir eğrilik sizin sistometrik sonuçları ya da post-operatif hayvan için ek bir rahatsızlık sonucu. Sistostomi tüpü için önerilen sitenin not edin. Bu, mesane (augment segmenti üstün) kubbesi yer almalıdır. Bu, borunun bükülme ya oklüzyon önleyecektir. 6-0 polipropilen sütür kullanarak aşağıdaki şekilde mesane kubbesi bir pursestring dikiş yerleştirin: place İlk atışta uzunlamasına mesane duvarı boyunca, sistostomi tüpü için önerilen siteye yanal. Sütür yanlışlıkla tüm yol boyunca çekilmiş değil böylece gevşek ucunda küçük bir kelepçe bırakın. Enine yönde sonraki atış, ilk olarak İlk atışta çıkışında biraz yan mesane duvar girecek başlangıç ​​yerleştirin. Sütür gergin çekmeyin. Sadece son enine dikiş çıkış yeri yukarı rutin mesane içine gidiyor (uzunlamasına) ilk bir dahaki sütür paralel yerleştirin. Dördüncü atış son dikiş ve çok ilk atış için giriş yanındaki sonu çıkmak için yanal başlayacaktır. Doğru yapıldığında, bu kateter önerilen sitesi (Şekil 7) etrafında çevresel bir kare oluşturur. Delip pursestring sütür merkezinde, bir 18G iğne mesane duvarı kullanma. (Intraluminal olmak için yeterli) çok derinden delmek için dikkatli olun. Açılış içinde ince forseps ipuçları yerleştirin ve hafifçe delik genişletmek için yayıldı. Defekt içine kateter soğan biçiminde ucunumesane kadar intraluminal olduğunu. Kateter etrafında sıkı pursestring dikiş çekin ve aşağı kravat. Burası (Şekil 8) tutarak kateter etrafında mesane duvar kavrama olmalıdır. Sütür bir ucunu alın ve bir kez kateter etrafında sarın ve daha fazla kateter güvenliğini sağlamak için bu bağlama. 7. Kateter Test ve Abdominal Kesi Kapanış 1 ml enjektör ve 25G iğne ile boru içine iğne yerleştirin ve yavaşça mesane gerilmek için tuzlu su enjekte edilir. Kateter etrafında sızıntı için dikkate alınmalıdır. Eğer idrar sızıntısı görünce, yine mesane sıkıştırmasını tuzlu aspire. Yukarıdaki adımları 4,1-4,4 olarak karın kesi kapatın. 8. (Sıçanlar için) Dorsal insizyon Kapanış ve Kateter güvenli Hayvan eğilimli konumlandırın. Makasla cilt seviyesinde kateter boru kesilir. Bir 22G künt ti takınboru içine p iğne. Çalışan bir moda 4-0 polyglactin boru üzerinden deri kapatın. Cilt ekstrüzyon iğne göbek bırakın. Künt iğne bir intravenöz hat kap yerleştirin. 3-0 ipek sütür kullanılması, cilde kateter ucu (Şekil 9) sabitleyin. Kesi temizleyin. Anesteziden uyanışı için bir sıcak, temiz bir kafes içine sıçan aktarın. 8. * (Fareler ya da sıçanlar için) Dorsal insizyon Kapanış ve Kateter güvenli * Bu dolaştırmaktan veya sonuna eritmek için bir alev ile kateterin distal ucu tıkanmak. * Kangal boru sonu ve (Şekil 10) (kısaltmak için boru kesme DEĞIL) hayvanın sırtında deri kılıf içinde bırakın. * Çalışan bir şekilde 4-0 polyglactin (Şekil 11) ile boru üzerinden deri kapatın. * Sistometri gününde, betadin ve% 70 etanol ile dorsal insizyon hazırlamak. Anestezi altında dorsal insizyon açın ve subkutan poşetten boru sarmalı kaldırın. Kesi kapatın. Anesteziden hayvan canlandırın ve tamamen uyanık olduğunda sistometri gerçekleştirin. 9. Temsilcisi Sonuçları – Cerrahi Yöntemleri Yeniden mesane önemli bir idrar sızıntısı (Şekil 3) ile ilgili komplikasyonları önlemek için mümkün olduğunca su geçirmez olmalıdır. Ağrı veya titreme veya çizilmemesi ve abdominal kesi kemiriyor gibi genellikle tezahür rahatsızlık. Bu meloksikam (0.5-1.0 mg / kg subkutan) gibi non-steroid anti-inflamatuar gibi günlük cilt altı enjeksiyonu ile tedavi edilebilir. Tipik olarak, hayvanlar operasyon sonrası ilk olarak 3 gün için enjeksiyonlar, sadece gerektirir. Bu bir opioid gibi buprenorfin (0.05-0.1 mg / kg subkutan her 8-12 saat) gerektiği gibi takviye edilebilir. Hayvanlar birinci 3 operasyon sonrası gün, TW boyunca günde 3 kez izlenmelidirbuz ameliyat sonrası 3-5 gün için günlük ve sonra ağrı, enfeksiyon belirtileri, yeterli yara iyileşmesi, aktivite, kişisel bakım ve cilt turgor değerlendirmek için daha sonra günlük. Antibiyotikler (Baytril, 5mg/kg subkutan 0.1 ml aşmayan bir hacmi her 24 saat) enfeksiyonuna karşı cerrahi profilaksi olarak, ilk 72 saat aşağıdaki cerrahi için verilmiştir. Normal iyileşme belirtileri, normal yürüme ve aktivite düzeyleri, uygun beslenme ve içme, ağrı veya sıkıntı olmaması (hiçbir seslendirme) ve cagemates normal sosyalleşme vardır. En az 5-7 günlük bir toparlanma süresi mesane iyileşmesi için izin vermek, sistometrik analizden önce verilen ve potansiyel sonuçları etkileyebilir enflamasyon azaltılmalıdır. Sistometrik Analizleri 10. Uyanık sistometrik Analizi Kur veri yakalama ve analiz LabChart v6 (ADInstruments) ve Harvard 22 şırınga pompası (Harvard aparatlar ile infüzyonu ile MLT844 ADInstruments ile tarifformans durumu, Holliston, MA), diğer benzer sistemler mevcuttur rağmen (Şekil 12). Kullanılan sistometrik sisteminin teknik özelliklerine göre hacim ve basınç hem de kalibre. Bir ölçek üzerinde asılı olan metabolik kafesler (bir tel örgü zemin ile kafes) hayvanlar yerleştirin. Ölçekli bir transdüktör bağlanmıştır. Herhangi bir hava kabarcıklarının sistemi temizlemek ve infüzyon pompası ile sürekli akış sağlamak. Bir bilgisayara veri yakalama sistemi bağlayın ve veri iz gözleyin. Buna göre ölçeği ayarlayın. Mesane basınç ve idrar hacmi sürekli olarak kaydedilecektir. Basınç sensörü ve infüzyon pompası bir T-tüpü ile bağlanmış bir 27G iğne ile suprapubik kateterler erişin. 12.5 uL / ​​fare ve 100 uL / ​​sıçan için dk dk serum fizyolojik infüzyonu başlayın. (Bir boşluk ardından mesane basınç artışı), stabilize izleme işeme desen izin verin. Bu genellikle yakla alırkaldığında, 10-20 dakika. 45-120 dakika ya da en azından 3-4 işeme döngüleri için işeme döngüleri kaydedin. Artifact (; tartışma aşağıya bakın yani kateter bükülme, tıkanıklığı, vb) yol açacaktır komplikasyonlar gidermek için gerçek zamanlı olarak tüm işlemler yerine getirilmelidir. Infüzyon Dur, sistemden kateter kesmek ve onun kafesine hayvan dönün. 11. Bilinçsiz sistometrik Analizi (No suprapubik kateter) Üretan (1-2 g / kg) intraperitonal enjeksiyon (IP) ile hayvan uyuşturmak. Yukarıdaki adımları 1,3-2,4 mesane Açığa. Adım 9.2 gibi sistem kalibre. Adım 9,4-9,5 gibi sistemi hazırlayın. Mesane lateral içine basınç sensörü ve infüzyon pompası bir T-tüpü ile bağlanmış bir 27G iğne takın. 45-90 dakika işeme döngüleri kaydedin. Infüzyon Dur, mesaneden iğne kaldırmak ve hayvan euthanize. </ Li> 12. Temsilcisi Sonuçları – sistometrik Analizleri Ürodinamik iz gibi sonra işeme hacimleri, uyum, pik işeme basınçları, inter daralma aralık, işeme döngü süresi ve sonrası rezidüel idrar hacmi gibi parametreler türetmek için analiz edilebilir. Cystometrogram bir dolum ve işeme fazı ayrılabilir. Normal bir dolgu faz mesane intravezikal basınç çok az değişiklik ile dolduğu olduğu idrar yapma döngüsünün kısmıdır. Izleme bir normal işeme faz detrüsör kasılması tekabül intravezikal basıncı sürekli bir artış meydana gelir. Izleme ve işeme fazı esnasında ulaşılan en yüksek basınç tepe işeme basıncı denir. Yüksek bir tepe işeme basıncı obstrüktif işeme paterni, SP kateter bir hypercontractile mesane veya bir bükülme hatırlatıyoruz. Uygunluk hacmi edilince Duri oranının elde hesaplanabilirng dolum fazı ve basınç (uyum = ΔV / ΔP) değişim. Bir hypocompliant mesane düşük basınçta yeterli idrar hacimleri uyuşamayacağı biridir. Intercontraction aralığı cystometrogram üzerinde görüldüğü gibi, iki kasılmaları arasındaki zaman analizi ile hesaplanır. Kısa intercontraction aralığı bir irritabl mesane düşündürür. Işeme döngüsü zaman bütün bir dolum ve tamamlamak için faz işeme ve izleme analiz ederek kolaylıkla tespit edilebilir için gereken süreyi ifade eder. Sistometri bitiminde, (PVR) sonrası rezidüel elde edilebilir. Bu bir detrüsör kontraksiyon tamamlanmasından sonra suprapubik kateter aspirasyon yapılır. Bu parametreler mesane doldurur ve boşaltır gibi araştırmacı nesnel mesane dinamiklerini incelemek yardımcı olur. Şekil 1. Abdominal insizyon Fotoğrafmesane ve ekstrüzyon. Şekil 2. Mesane lümeni pozlama ile Mesane kesi. Şekil 3. Mesane duvara implant entegrasyonu. Şekil 4. Kapalı insizyon Fotoğraf. Şekil 5. PE-50 boru Flared sonu. Şekil 6. PE-50 dorsal insizyonla boru (kateter). Şekil 7.Pursestring sütür. Şekil 8. Mesane kateteri güvenli. Şekil 9. Güvenli kateter. Şekil 10. Subkutan poşet içerisinde Boru sarmalı. Şekil 11. Dorsal insizyonel kapatılması. Şekil 12. Örnek sistometrik set-up. Şekil 13. Temsilcisi sistometri izleme.