Препарирование Средняя кишка и слюнных желез от Ae. aegypti комаров

Препарирование кишки и слюнных желез тканей от комаров требует предварительной подготовки 1X фосфатным буферным солевым раствором (1X PBS) решение и обезболивания комаров, подвергая при температуре 4 ° С, пока не обездвижен. Комары остаются под наркозом, помещая в чашке Петри, которые хранятся в холоде на льду. Другие материалы, необходимые включают в себя: световой микроскоп оснащен 10-кратным цели, пипетки, с острым концом щипцов, стекло, иглы наконечник зонда. Средняя кишка рассечение Место капли 1X PBS на предметное стекло монтируется под световым микроскопом. Передача комаров на подготовленную слайд, нанеся комаров грудной клетки с помощью иглы-наконечник зонда. Удерживая комаров с зондом, использование щипцов, чтобы понять второго до последнего сегмента брюшка и аккуратно снять комаров живота одним движением руки. Средняя кишка должна оставаться прикрепленной к иммобилизованным грудной клетки. Откажитесь от живота. Используйте пинцет, чтобы отделить кишки из грудной клетки. Слюнные железы рассечение Место капли 1X PBS на предметное стекло монтируется под световым микроскопом. Возьмите комаров на stabbling грудной клетки с помощью иглы-наконечник зонда. Снимите комаров ноги с помощью пальцев. Передача комаров на слайде. Удалить глава комаров использованием щипцов. Удерживая комаров грудной клетки с зондом, использовать другой зонд осторожно надавите на грудную клетку. Слюнные железы расположены на передней части грудной клетки и может быть выделен с помощью иглы-наконечника зонда и разрыв вложения, которые соединяют железы к грудной клетке. Неповрежденная слюнных желез состоят из трех долей: двух боковых долей и медиальной доле.