De organotypische hippocampus Slice Cultuur Model is voor de behandeling Neuronale Letsel
概要
De organoptypic hippocampus slice cultuur-model is een<em> In vitro</em> Model gebruikt om de neuronale verwonding in een verscheidenheid van paradigma te onderzoeken. In dit artikel beschrijven we de methoden voor het genereren van slice culturen en kwantificeren van neuronale verwonding.
Abstract
Organotypische hippocampale slice cultuur is een in vitro methode om de mechanismen van de neuronale schade in de basisarchitectuur en samenstelling van de hippocampus relatief behouden blijft een te onderzoeken. Het organotypische cultuur systeem maakt het mogelijk voor het onderzoek van neuronale, astrocytaire en microgliale effecten, maar als een ex vivo voorbereiding, wordt niet ingegaan op effecten van de bloedstroom, of aanwerving van perifere inflammatoire cellen. Te dien einde, is deze cultuur methode vaak gebruikt om excitotoxisch en hypoxische schade aan piramidale neuronen van de hippocampus te onderzoeken, maar is ook gebruikt om de ontstekingsreactie te onderzoeken. Hierin beschrijven we de methoden voor het genereren van de hippocampus slice culturen van postnatale knaagdieren hersenen, het toedienen van giftige stimuli om neuronale letsel veroorzaken, en het testen en kwantificeren van hippocampale neuronale dood.
Protocol
Discussion
Er zijn twee belangrijke punten om te volgen om reproduceerbare en consistente resultaten te waarborgen bij het repliceren van experimenten. Ten eerste is het belangrijk om de hippocampus plakken leeftijd verhuurd voor 12-14 dagen voor de experimenten. Met slice isolement, is er een significant microgliale reactie, en microglia geactiveerd blijven voor enige tijd, met een terugkeer naar een rustplaats vertakte staat die zich per dag 10 in vitro 3,6. Ten tweede, de gemiddelde PI fluorescentie-intensit…
開示
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gefinancierd door NINDS, American Heart Association, American Federation for Aging Research, March of Dimes
参考文献
- Stoppin, L., Buchs, P. A., Muller, D. A simple method for organotypic cultures of nervous tissue. J Neurosci Methods. 37 (2), 173-173 (1991).
- McCullough, L., Wu, L., Haughey, N. Neuroprotective Function of the PGE2 EP2 Receptor in Cerebral Ischemia. J Neurosci. 24 (1), 257-257 (2004).
- Czapiga, M., Colton, C. A. Function of microglia in organotypic slice cultures. J Neurosci Res. 56, 644-644 (1999).
- Newell, D. W., Barth, A., Papermaster, V. Glutamate and non-glutamate receptor mediated toxicity caused by oxygen and glucose deprivation in organotypic hippocampal cultures. J Neurosci. 15, 7702-7702 (1995).
- Wu, L., Wang, Q., Liang, X. Divergent Effects of prostaglandin recetor signaling on neuronal survival. Neuroscience letter. 421, 253-253 (2007).
- Hailer, N. P., Jarhult, J. D., Nitsch, R., R, . Resting microglial cells in vitro: Analysis of morphology and adhesion molecule expression in organotypic hippocampal slice cultures. Glia. 18, 319-319 (1996).
