zPDX-Analyse der Invasivität: Untersuchung des invasiven Verhaltens metastasierender Krebszellen in Zebrafisch-Embryo-Xenografts
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Ren, J. et al. Invasives Verhalten menschlicher Brustkrebszellen in embryonalen Zebrafischen. J. Vis. Exp. (2017).
Dieses Video beschreibt eine Mikroinjektionsmethode zur Verabreichung von Brustkrebszellen in den Perivitelline-Raum transgener Zebrafischembryonen. Nach der Inkubation visualisieren wir den Embryo unter einem Fluoreszenzmikroskop, um die Invasion, Verbreitung und Metastasierung von Krebszellen zu beobachten.
Protocol
1. Bild und Analyse des metastasierenden Prozesses Sammeln Sie mehrere anästhesierte Embryonen mit einer Breitspitzen-Pasteur-Pipette und übertragen Sie sie auf den Glasboden einer Polystyrolschale. Entfernen Sie überschüssiges Wasser und halten Sie eine begrenzte Menge an Eiwasser. Manipulieren Sie den Embryo in Position mit einem Haarschleifenwerkzeug und legen Sie eine Abdeckung auf das Glas. Verwenden Sie ein invertiertes konfokales Mikroskop in Kombination mit Wasse…
開示
The authors have nothing to disclose.
Materials
| Wide-tip Pasteur pipette (0.5-20 µL) | Eppendorf | F276456I | |
| Confocal microscope | Leica | SP5 STED | |
| Stereo microscope | Leica | MZ16FA | |
| Tg (fli:EGFP) zebrafish strain | Kindly provided by Dr. Ewa SnaarJagalska (Institute of Biology, Leiden University, Leiden, The Netherlands) | ||
| Polystyrene dish with glass bottom | WillCo | GWST-5040 | |
| Fluorescent stereo microscope | Leica | M165 FC | |
| Tricaine (3-aminobenzoic acid) | SigmaAldrich | A-5040 |
