In Vivo Elektroporasyon: Zebra Balıklarını Transfect etmek için Bölgeye Özgü Bir Yöntem
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Durovic, T., vd. Yetişkin Zebra Balığı Telencephalon’da Plazmid DNA’sının In Vivo Teslimatı için Elektroporasyon Yöntemi. J. Vis. Exp. (2019).
Bu videoda, yetişkin zebra balıklarındaki ependymoglial hücrelere DNA iletimi için bir teknik olan in vivo elektroporasyon açıklanmaktadır.
Protocol
1. Elektroporasyon Balıkları süngerde tutarken enjeksiyon kurulumundan çıkarın. Elektrotların ucunun iç tarafını ultrason jeline batırın. Balık teleensefalonunun üzerini az miktarda ultrason jeli ile örtün. Balık kafasını elektrotlar arasında konumlandırın, pozitif elektrodu balığın başının ventral tarafına ve negatif elektrodu sırt tarafına yerleştirin (Şekil 1C), balığın vücudunu süngerde tutmaya devam ederken. Bu, subventrik…
Representative Results
Şekil 1: Everted zebra balığı teleensefalonun koronal bölümünün şematik gösterimi. (A) Zebra balığı teleensefalonun koronal bölümünün şeması, ventrikül yüzeyini kaplayan ve ventral ventrikül duvarını inşa eden ependymoglial hücrelerin konumunu vurgular. Dorsal ependymal tabaka iki yarımküreyi köprülüyor ve iki hücre katmanı arasında bulunan ventrikülü (V) kaplar: ependy…
Materials
| Ultrasound gel | SignaGel, Parker laboratories INC | 15-60 | Electrode Gel |
| BTX Tweezertrodes Electrodes | Platinum Tweezertrode, BTX Harvard Apparatus | 45-0486 | 1mm diameter |
| Electroporation device | BTX ECM830 Square Wave Electroporation System, BTX Harvard Apparatus | 45-0662 |
