Optogenetik, ışık aktivasyonu nöronun durumunda bir değişikliği tetikleyen belirli opsinleri ifade etmek için genetik olarak tasarlanmış nöronları manipüle etmek için ışık kullanımını sağlar. Burada Opsin Channelrhodopsin2 kullanarak Drosophila optogenetik bir yaklaşım tarif ediyoruz. Örnek protokol, sineğin kaçış davranışının arkasındaki nöronal devreyi incelemek için ayarlanmış bir optogenetik test içerir.
Protocol
Bu protokol, Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013)’de Kaçış Davranışının Optogenetik Uyarılması de Vries ve Clandinin’den bir alıntıdır. 1. Channelrhodopsin Sinekleri Üret Cross UAS-ChR2 seçtiğiniz Gal4 sürücüsü ile uçar, optik lobdaki Foma-1 nöronlarında ifade edilen G105-Gal4 kullanıyoruz. Mavi ışık stimülasyonuna görsel bir yanıt olasılığını ortadan kaldırmak için, her iki uçucu çizgi de w+norpA a…
Representative Results
Şekil 1: Platformu dikey tutucu ve ısı emicileri tutan dört soğutma sıvısı çapalama kolu ile gösteren deneysel kurulum ve bunlara LED dizileri yapıştırılmış. (A) Ortam aydınlatması altında kurulum. (B) LED’ler aydınlatıldığında kurulum. (C) Isı emici üzerinde bir Tri-Star LED’in yakından görünümü. (D) Tri-Star’ın tri-lens t…
Materials
Reagent
All-trans Retinal
Advance Scientific Chemical Inc
R3041
Equipment
Heat Sink 9.2 C/W
Luxeonstar
LPD30-30B
30 mm square X 30 mm high
Carclo 18° Tri-Lens
Luxeonstar
10507
Blue Rebel LED on Tri-Star Base
Luxeonstar
MR-B0030-20T
470 nm, 174 lm @ 700 mA.
700 mA BuckPuck DC Driver
Luxeonstar
3021-D-E-700
Wiring Harness for BuckPuck Driver
Luxeonstar
3021-HE
Pre-cut thermal adhesive tape
Luxeonstar
LXT-S-12
20 mm Hex Base
Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID
McMaster-Carr
5307K49
Snap-Loc Coolant Hose Connector
McMaster-Carr
5307K39
¼" NPT Male
Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply