דרוזופילה (לא כולל) אופטוגנטיקה: שיטה לתפעל מעגלים עצביים
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: דה פריס, S. E., קלנדינין, T. גירוי אופטוגנטי של התנהגות בריחה ב Drosophila מלנוגאסטר. ג’יי ויס אקספ. (2013).
אופטוגנטיקה מאפשרת שימוש באור כדי לתפעל נוירונים מהונדסים גנטית כדי לבטא חלבונים רגישים לאור-opsins ספציפיים שהפעלת האור שלהם גורמת לשינוי במצב הנוירון. כאן אנו מתארים גישה אופטוגנטית בדרוזופילה באמצעות opsin Channelrhodopsin2. פרוטוקול הדוגמה כולל מבחני אופטוגנטיקה שנקבעו כדי לחקור את המעגלים העצביים שמאחורי התנהגות הבריחה של הזבוב.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך דה פריס ו קלנדינין, גירוי אופטוגנטי של התנהגות בריחה ב Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2013). 1. צור זבובים Channelrhodopsin קרוס UAS-ChR2 טס עם הנהג Gal4 על פי בחירתך, אנו משתמשים G105-Gal4, אשר בא לידי ביטוי נוירונים פומה-1 באונה האופטית. כדי למנוע את האפשרות של …
Representative Results
איור 1: הגדרה ניסיונית המציגה את הפלטפורמה עם המחזיק האנכי וארבע זרועות הקירור המחזיקות כיורי חום עם מערכי LED מודבקים אליהם. (A)ההגדרה תחת תאורת הסביבה. (B)ההגדרה כאשר נוריות LED מוארות. (ג)מבט מקרוב על נורית תלת-…
Materials
| Reagent | |||
| All-trans Retinal | Advance Scientific Chemical Inc | R3041 | |
| Equipment | |||
| Heat Sink 9.2 C/W | Luxeonstar | LPD30-30B | 30 mm square X 30 mm high |
| Carclo 18° Tri-Lens | Luxeonstar | 10507 | |
| Blue Rebel LED on Tri-Star Base | Luxeonstar | MR-B0030-20T | 470 nm, 174 lm @ 700 mA. |
| 700 mA BuckPuck DC Driver | Luxeonstar | 3021-D-E-700 | |
| Wiring Harness for BuckPuck Driver | Luxeonstar | 3021-HE | |
| Pre-cut thermal adhesive tape | Luxeonstar | LXT-S-12 | 20 mm Hex Base |
| Snap-Loc Coolant Hose, ¼" ID | McMaster-Carr | 5307K49 | |
| Snap-Loc Coolant Hose Connector | McMaster-Carr | 5307K39 | ¼" NPT Male |
| Laboratory Grade Switching Mode Programmable DC Power Supply | BK Precision | 1698 | |
| Exilim camera | Casio | EX-FH20 |
