Drosophila Monitor de Atividade (DAM): Um método para medir a atividade locomotor em moscas
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Chiu, J.C., et al. Assaying Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms and Sleep Parameters in Drosophila. J. Vis. Exp. (2010).
Este vídeo descreve o sistema de monitor de atividade Drosophila (DAM) usado para rastrear a atividade locomotor. Pesquisadores usam dados de atividade coletados da DAM para estudar ritmos circadianos em moscas frutíferas. O clipe de protocolo em destaque mostra como carregar moscas no dispositivo e registrar dados de atividade para experimentos circadianos.
Protocol
Este protocolo é um trecho de Chiu et al., Assaying Locomotor Activity to Study Circadian Rhythms and Sleep Parameters in Drosophila, J. Vis. Exp. (2010). 1. Carregar moscas em tubos de atividade e sistema de monitoramento de atividades locomotores Antes de carregar moscas em tubos de atividade, ligue as incubadoras que serão usadas para abrigar os monitores de atividade. Ajuste a temperatura usando os controles da incubadora e ajuste o regime claro/escu…
Representative Results
Figura 1: Gráficos de edução gerados usando FaasX mostrando ritmos diários de atividade locomotor de moscas do tipo selvagem rítmico (w por0 moscas carregando um transgene per+) (A e B) vs. arrhythmic w por0 mutantes (C e D). As moscas machos foram mantidas a 25 °C e presas por 4 dias em ciclos LD 12:12 (claro: escuro) seguidos por sete dias em DD (escuridão constante). Par…
Materials
| Drosophila activity monitor (DAM) | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | DAM2 or DAM5 | DAM2 monitors are more compact, and more can fit into a single incubator |
| Power supply interface unit (for DAM system) | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | PSIU9 | Includes PS9-1 AC Power Supply |
| Light controller | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | LC6 | |
| Pyrex glass tubes | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | PGT5, PGT7, and PGT10 | |
| Plastic activity tube caps | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | CAP5 | Yarn can be used instead of plastic caps. |
| DAM System data collection software | Trikinetics Inc.; Waltham, MA | Versions available for both Mac and PC | |
| FaasX software | Centre National de la Recherche Scientifique | Only for Mac | |
| Insomniac 2.0 software | University of Pittsburgh School of Medicine | Runs on Matlab. Can be used on both PC and Macintosh. | |
| Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. Percival incubator | Percival Scientific, Inc. | I-30BLL | Interior space dimension:Width: 65cm;Height: 86cm;Depth: 55cm |
| Environmental incubator with temperature and diurnal control, e.g. DigiTherm Heating/Cooling Incubator with Circadian Timed Lighting and Timed Temperature | Tritech Research, Inc. | 05DT2CIRC001 | Interior space dimension:Width: 36m;Height: 56m;Depth: 28cm |
| APC Smart-UPS 2200VA 120V (Emergency power backup unit) | APC | SU2200NET | Output Power Capacity of 1600 Watts |
| Sucrose | Sigma-Aldrich | S7903 | |
| Bacto Agar | BD Biosciences | 214010 | |
| TissuePrep Paraffin pellets | Fisher Scientific | T565 | Melting point 56 °C-57 °C |
| Block heater | VWR international | 12621-014 |
