Perturbation cuticule: Une méthode pour recueillir l’hémolympe des larves de Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Reimels, T. A. et Pfleger, C.M. Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2016).
L’hémolympe de Drosophila sert à la fois de sang et de liquide interstitiel, circulant dans tout le corps pendant les stades de larve et d’adulte. Cette vidéo décrit un protocole pour recueillir l’hémolympe larvaire afin de quantifier les cellules circulantes.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Reimels et Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Concentration d’oursocytes circulants Pour obtenir des larves d’à peu près au même stade de développement pour cet essai, limitez la collecte des œufs en permettant aux femelles de pondre des œufs pendant une période déterminée de 2 à 6 heures. Recueillir les larves dans des puits de vaisselle diss?…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
