Interruzione cuticola: un metodo per raccogliere l'emolinfa dalle larve di Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Reimels, T. A. e Pfleger, C.M. Metodi per esaminare la ghiandola linfatico e gli emociti nelle larve di Drosophila . J. Vis. Exp. (2016).
L’emolinfa Drosophila funge sia da sangue che da liquido interstiziale, circolando in tutto il corpo durante la larva e le fasi adulte. Questo video descrive un protocollo per raccogliere l’emolinfa larvale al fine di quantificare le cellule circolanti.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Reimels e Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. 1. Concentrazione di emociti circolanti Per ottenere larve di circa lo stesso stadio di sviluppo per questo saggio, limitare la raccolta delle uova consentendo alle femmine di deporre le uova per un periodo di tempo fisso di 2 – 6 ore. Raccogliere le larve nei pozzi di sezionatura dei piatti riempiti con 1x soluzione sa…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
