Perturbation cuticule: Une méthode pour recueillir l’hémolympe des larves de Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

Source : Reimels, T. A. et Pfleger, C.M. Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2016).

L’hémolympe de Drosophila sert à la fois de sang et de liquide interstitiel, circulant dans tout le corps pendant les stades de larve et d’adulte. Cette vidéo décrit un protocole pour recueillir l’hémolympe larvaire afin de quantifier les cellules circulantes.

Protocol

Ce protocole est un extrait de Reimels et Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Concentration d’oursocytes circulants Pour obtenir des larves d’à peu près au même stade de développement pour cet essai, limitez la collecte des œufs en permettant aux femelles de pondre des œufs pendant une période déterminée de 2 à 6 heures. Recueillir les larves dans des puits de vaisselle diss?…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
Countess Automated Cell Counter Invitrogen C10227
Countess cell counting chamber slides Invitrogen C10283
hemocytometer Hausser Scientific 3200
trypan blue stain Life Technologies T10282

Play Video

記事を引用
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).

View Video