Der CApillary FEeder (CAFE) Assay: Eine Methode, um den Verzehr von Lebensmitteln und die Präferenz in Drosophila zu verfolgen
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Diegelmann, S., et al. The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster. J. Vis. (2017).
Dieses Video beschreibt den CApillary FEeder, oder CAFE, Assay, eine Verhaltensmethode, die die Nahrungsaufnahme und die Präferenz von hemmungslosen Fruchtfliegen misst. Das vorgestellte Protokoll zeigt, wie der Test mit minimaler Verdunstung von den flüssigkeitsgefüllten Kapillaren durchgeführt wird, die verwendet werden, um das Essen zu liefern und seine Aufnahme zu verfolgen.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Diegelmann et al., The CApillary FEeder Assay Measures Food Intake in Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017). 1. Montage und Durchführung des CApillar-FEeder-Assays Wenn kein Fasten erforderlich ist, übertragen Sie die experimentellen Fliegen auf den Test durch Tippen oder durch Blasrohr. Achten Sie darauf, drei Steuerfläschchen ohne Fliegen enthalten, um die Verdunstung zu quantifizieren. Entfernen Si…
Representative Results
Abbildung 1: Der Drosophila melanogaster CApillary FEeder Assay. A) Der Fütterungstest mit Fliegen. Befeuchtetes Filterpapier liefert Wasser am Boden der Durchstechflasche. Während des Experiments werden vier Kapillaren bereitgestellt (rot- und blau gefärbte Lebensmittel in gegenüberliegenden Kapillaren). Beachten Sie, dass die Kapillaren durch eine zweite Pipettenspitze in Position gesichert…
Materials
| Vials (breeding) | Greiner Bio-One | 960177 | www.greinerbioone.com |
| Vials (CAFE assay) | Greiner Bio-One | 217101 | www.greinerbioone.com |
| Lid-CAFE assay | Workshop | – | – |
| Plastic box, low wall | Plastime | 353 | www.plastime.it |
| Cover for the plastic box | Workshop | – | – |
| Capillaries | BLAUBRAND | REF 7087 07 | www.brand.de |
| Pipette tips | Greiner Bio-One | 771290 | www.greinerbioone.com |
| Filter paper circles | Whatman | 10 311 804 | www.sigmaaldrich.com |
| D(+)-Sucrose | AppliChem | 57-50-1 | www.applichem.com |
| Ethanol absolute | VWR Chemicals | 20,821,330 | www.vwr.com |
| Food color (red, E124) | Backfun | 10027 | www.backfun.de |
| Food color (blue, E133) | Backfun | 10030 | www.backfun.de |
| Soap solution (CVK 8) | CVH | 103220 | www.cvh.de |
| Digital caliper | GARANT | 412,616 | www.hoffmann-group.com |
| Vials (breeding) | Height 9.8 cm, diameter 4.8 cm | ||
| Vials (CAFE assay) | Height 8 cm, diameter 3.3 cm | ||
| Lid-CAFE assay | Produced in university workshop, technical drawing supplied Please click here to download this file. |
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| Plastic box, low wall | A plastic grid inlay was custom-made for 8 x 10 vial positions | ||
| Cover for the plastic box | Dimensions (37 x 29 x 18 cm) | ||
| Capillaries | DIN ISO 7550 norm, IVD-guideline 98/79 EG, ends polished | ||
| Pipette tips | Pipettes for the outer circle are cut according to the lid | ||
| Filter paper circles | 45 mm diameter works nicely if folded for the vials used | ||
| D(+)-Sucrose | Not harmful | ||
| Ethanol absolute | Highly flammable liquid and vapor | ||
| Food color (red, E124) | Not stated | ||
| Food color (blue, E133) | Not stated | ||
| Soap solution (CVK 8) | Odor neutral soap | ||
| Digital caliper | |||
| Standard fly food | (for 20 L) | ||
| Agar | 160 g | ||
| Brewer's Yeast | 299.33 g | ||
| Cornmeal | 1,200 g | ||
| Molasses | 1.6 L | ||
| Propionic acid | 57.3 mL | ||
| Nipagin 30% | 160 mL |
