Drosophila melanogaster Dissezione ovarica: una tecnica per la preparazione dei tessuti ex vivo
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Parker, D. J., et al. J. Vis. Exp. (2017).
Questo video descrive l’anatomia generale dell’ovaio di Drosophila e presenta un metodo per sezionare le ovaie per l’imaging vivo o fisso.
Protocol
Questo protocollo è un estratto da Parker et al., Studying Mitochondrial Structure and Function in Drosophila Ovaries, J. Vis. Exp. 1. Preparazione della Drosophila (gli strumenti richiesti sono raffigurati nella figura 1A) Per uno qualsiasi degli esperimenti descritti, raccogliere drosophila (mantenuto a temperatura ambiente, o 25 °C) entro 5 giorni dall’eclusione e metterli in una fiala pi…
Representative Results
Figura 1: Piano sperimentale e preparazione. (A) Strumenti utilizzati nei metodi descritti: A. Flaconcino a mosca; B. Mezzo di sezionamento degli insetti; C. Paraformaldeide; D. Spazzola a mosca; E. Sezionare il piatto; F. Vetri di copertura; G. Tubo di microfugo. H. Piatto con fondo di vetro; I. Vetri di vetro; J. micropipette da 1.000 μL; K. micropipette da 200 μL; L. micropipette da …
Materials
| Grace's Media (Insect Dissecting Medium) | Fisher Scientific | 30611031-2 | |
| 41 Paraformaldehyde AQ | Electronic Microscopy Sciences | 50-259-99 | |
| PolyLysine | MP Biomedicals | ICN15017625 | |
| Fly Vials | Fisher Scientific | AS-515 | |
| Fly Vial Plugs | Fisher Scientific | AS273 | |
| Jazzmix Drosophila food (Drosophila food) | Fisher Scientific | AS153 | |
| Azer Scientific EverMark Select Microscope Slides | Fisher Scientific | 22-026-252 | |
| Microscope Cover Glass | Fisher Scientific | 12-542-B | |
| Mat Tek Corp Glass Bottom Mircrowell Dish | Fisher Scientific | P35G-0-14-C | |
| Active Dried Yeast | Fisher Scientific | ICN10140001 | |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Technologies | 11251-20 | |
| Moria Nickel Plated Pin Holder | Fine Science Technologies | 26016-12 | |
| Minutien Pins | Fine Science Technologies | 26002-15 | |
| MYFP ( w[*]; P{w[+mC]=sqh-EYFP-Mito}3 ) | Bloomington Stock Center | 7194 | |
| Fly Pad | Fly stuff | 59-118 | |
| Blowgun | Fly stuff | 54-104 | |
| Blowgun needle | Flystuff | 54-119 | |
| Dissecting Microscope | Carl Zeiss | Stemi 2000 |
