概要

Haemagglutination 분석을 사용하여 혈청의 반응성 및 Titre를 결정

Published: January 29, 2010
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概要

Haemagglutination는 항체가 적혈구에 바인딩 유착의 한 형태입니다. 적혈구가 모두 쉽게 사용할 수 있으며 그 결과는 즉시 육안을 사용하여 관찰할 수 있습니다. 이 비디오는 결과를 해석하고 titre을 결정, haemagglutination 분석에 관련된 단계를 설명합니다.

Abstract

Haemagglutination는 응집의 구체적인 형태이며, 항체가 미립자 항원의 역할을 적혈구에 바인딩할 때 사용됩니다. 적혈구들이 쉽게 사용할 수 있으므로 특히 유용 타겟하고 응집이 육안을 사용하여 관찰할 수있다. 이 기술은 일반적으로 혈액 그룹화 및 바이러스에 대한 항체 부량의 titre (AB)를 결정하는 데 사용됩니다. 이 비디오에서는 haemagglutination 분석을 준비하고 수행에 관련된 단계는 혈액형 A – 항원은 적혈구 (Revercells)에 추가 특정 항체를 사용하여 증명합니다. 항혈청는 순차적으로 Revercells의 정지를 추가하는, U – 96 잘 하단 microtitre 트레이에 희석합니다. 샘플은 60 분 동안 혼합 후 ° C 37 incubated 수 있습니다. 이 시간 후, 샘플 그때 쉽게했습니다 + 적 및 중간 (-/+)의 haemagglutination 반응에 대한 채점 수 있습니다. 이 방법은 신속하고 간단한 방법을 사용하여 평가하는 혈청 샘플의 반응과 titre을 허용합니다. 비디오 분석을 수정할 수있는 방법을 titre를 결정하는 방법 결과를 읽고 해석하는 방법 분석 뒤에 이론, 그리고이 기술의 사용과 관련된 문제를 다룰 것입니다.

Protocol

5 배 Veronal 버퍼 살린 (VBS)의 준비 Veronal 버퍼 살린 (VBS)를 준비하려면, 별도의 세 가지 솔루션을 준비해야합니다. 증류수의 350ml에 나트륨 Barbitone의 NaCl과 0.94gm의 21.25gm을 용해하여 용액 1을 준비합니다. NaCl과 나트륨 Barbitone의 최종 농도는 각각 1.02M과 13mM 있습니다. 뜨거운 증류수의 125ml에 Barbitone의 1.44gm을 용해하여 용액 2를 준비합니다. Barbitone의 최종 농도는 62.5mM입니다. </…

Discussion

haemagglutination 분석 시간이 짧은 기간 내에 평가하기 위해 혈청 샘플의 수많은 수있는 아주 간단한 방법입니다. 그것은 적합한되는 눈은, 전문 장비가 필요없이 읽을되는 장점도 있습니다. 이 기술은 또한 haemagglutination – 억제 테스트의 일환으로, 소변에있는 인간 chorionic gonadotrophin 호르몬의 검출을 위해 수정할 수 있습니다. 표준 haemagglutination 테스트와 관련하여, 관리가 제대로 수행할 수있는 분?…

Acknowledgements

저자는 촬영에 대한 기술과 미스터 폴 목사는 수행 미스 로라 매튜스를 감사하고 싶습니다. 이 프로젝트는 사우스 오스트 레일 리아 대학, 연구소의 의학 프로그램에 의해 투자되었다.

Materials

Material Name タイプ Company Catalogue Number Comment
Revercells   CSL 02490201 Use at 1% final
Anti-A serum   CSL 02611305  
96 well U bottom plate   TRP 92097 Must be U-bottom
Veronal buffered saline       Use at 1x final
37°C room/incubator        
Disposable gloves        

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記事を引用
Costabile, M. Determining the Reactivity and Titre of Serum using a Haemagglutination Assay. J. Vis. Exp. (35), e1752, doi:10.3791/1752 (2010).

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